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大豆脂肪氧化酶LOX-3原核表达及功能验证

摘要第8-9页
英文摘要第9页
1 前言第11-20页
    1.1 大豆脂肪氧化酶基因结构及其酶促反应机理的研究进展第11-14页
        1.1.1 大豆脂肪氧化酶的基因结构第11-12页
        1.1.2 大豆脂肪氧化酶的酶促反应机理第12-14页
    1.2 大豆脂肪氧化酶的生理功能研究进展第14-15页
        1.2.1 大豆脂肪氧化酶在大豆生长发育中的作用第14页
        1.2.2 大豆脂肪氧化酶在大豆伤害反应和抗有害生物中的作用第14-15页
        1.2.3 大豆脂肪氧化酶与大豆种子劣变的关系第15页
    1.3 大豆脂肪氧化酶的应用研究进展第15-19页
        1.3.1 食品加工中的应用第15-18页
        1.3.2 轻工业中的应用第18-19页
    1.4 立题依据第19-20页
2 材料与方法第20-35页
    2.1 试验材料及仪器第20页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 载体和菌株第20页
        2.1.3 主要试剂第20页
        2.1.4 仪器第20页
    2.2 试验方法第20-35页
        2.2.1 LOX-3基因的克隆第20-27页
        2.2.2 pET-32b(+)原核表达载体构建第27-29页
        2.2.3 LOX-3目的蛋白的表达与纯化第29-32页
        2.2.4 大豆脂肪氧化酶LOX-3的活性测定第32-33页
        2.2.5 大豆脂肪氧化酶LOX-3漂白β-胡萝卜素实验第33-35页
3 结果与分析第35-45页
    3.1 LOX-3基因的克隆和载体构建第35-40页
        3.1.1 大豆总RNA的提取第35页
        3.1.2 LOX-3基因的克隆第35-37页
        3.1.3 pET32b(+)-LOX-3原核表达载体构建第37-38页
        3.1.4 pET32b(+)-LOX-3重组载体的转化第38-40页
    3.2 pET32b(+)-LOX-3重组蛋白的诱导、纯化与漂白性验证第40-45页
        3.2.1 不同IPTG浓度对pET32b(+)-LOX-3重组蛋白的诱导表达第40-41页
        3.2.2 不同时间及温度对pET32b(+)-LOX-3重组蛋白的诱导表达第41页
        3.2.3 pET32b(+)-LOX-3重组蛋白的纯化第41-42页
        3.2.4 pET32b(+)-LOX-3重组蛋白浓度的测定第42-43页
        3.2.5 大豆脂肪氧化酶LOX-3的活性测定第43-44页
        3.2.6 大豆脂肪氧化酶LOX-3对β-胡萝卜素的漂白性验证第44-45页
4 讨论第45-46页
    4.1 大豆脂肪氧化酶蛋白质的诱导表达第45页
    4.2 大豆脂肪氧化酶漂白功能的探究第45-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-53页

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