摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-17页 |
第1章 绪论 | 第17-32页 |
·课题背景及研究的目的和意义 | 第17-18页 |
·广谱抗菌肽高产菌株的筛选 | 第18-21页 |
·抗菌肽的生物合成途径研究 | 第21页 |
·代谢调控实现抗菌肽的高效表达 | 第21-22页 |
·培养环境优化提高抗菌肽产量 | 第22-23页 |
·乳酸菌抗菌肽基因工程研究 | 第23-24页 |
·乳酸菌生产细菌素发酵过程优化与控制 | 第24-25页 |
·抗菌肽的提取纯化研究 | 第25-27页 |
·提高抗菌肽活性的方法研究 | 第27-28页 |
·抗菌肽的抑菌机理研究 | 第28-29页 |
·抗菌肽对革兰氏阴性菌和真菌的相关研究 | 第29-30页 |
·乳酸菌抗菌肽开发存在的问题及发展前景 | 第30-31页 |
·本文的主要研究内容 | 第31-32页 |
第2章 试验材料与方法 | 第32-52页 |
·试验材料 | 第32-34页 |
·仪器与设备 | 第32-33页 |
·试剂与药品 | 第33-34页 |
·发酵食品与指示菌来源 | 第34页 |
·产ClassⅡa细菌素乳酸菌的筛选方法 | 第34-39页 |
·传统发酵食品的采集 | 第34页 |
·采集样品中微生物的镜检 | 第34-35页 |
·采集样品中乳酸菌的分离 | 第35页 |
·96 孔板-酶标仪法 | 第35页 |
·Colony-PCR法 | 第35-37页 |
·琼脂扩散法 | 第37页 |
·细菌素活力测定方法 | 第37页 |
·产ClassⅡa细菌素乳酸菌的鉴定 | 第37-39页 |
·Bac-J23 的纯化方法 | 第39-43页 |
·Bradford试剂盒测定蛋白质含量 | 第39-40页 |
·NH4SO_4 盐析法沉淀Bac-J23 | 第40页 |
·菌体细胞吸附纯化Bac-J23 | 第40-41页 |
·阳离子交换法分离纯化Bac-J23 | 第41页 |
·疏水层析法分离纯化Bac-J23 | 第41-42页 |
·Bac-J23 纯度的测定 | 第42-43页 |
·Bac-J23 的理化特性及生物信息学分析 | 第43-47页 |
·Bac-J23 氨基酸组成分析 | 第43-44页 |
·Bac-J23 的N端序列分析 | 第44页 |
·细菌素Bac-J23 的热特性 | 第44-45页 |
·细菌素Bac-J23 的酸碱稳定性 | 第45页 |
·细菌素Bac-J23 的蛋白酶敏感性 | 第45页 |
·细菌素Bac-J23 的等电点测定 | 第45-46页 |
·细菌素Bac-J23 的疏水性/亲水性分析 | 第46页 |
·细菌素Bac-J23 的紫外可见光谱扫描分析 | 第46页 |
·细菌素Bac-J23 的巯基和S-S键含量测定 | 第46-47页 |
·细菌素Bac-J23 的亚细胞定位分析 | 第47页 |
·细菌素Bac-J23 蛋白质序列的跨膜区预测 | 第47页 |
·细菌素Bac-J23 同源性分析 | 第47页 |
·Bac-J23 的合成调控研究 | 第47-52页 |
·菌株生长和Bac-J23 合成曲线 | 第47页 |
·接种量对细菌素Bac-J23 合成的影响 | 第47页 |
·静息细胞体系的建立及静息细胞的制备 | 第47-48页 |
·菌体总核酸(CNA)的测定 | 第48页 |
·菌体干重(DCW)的测定 | 第48页 |
·培养基组分及培养条件的优化 | 第48-49页 |
·群感效应系统(QS)的初步确认 | 第49页 |
·Bac-J23 的合成诱导研究 | 第49-50页 |
·Bac-J23 的有限水解修饰 | 第50-52页 |
第3章 产ClassⅡa细菌素乳酸菌高通量筛选与鉴定 | 第52-69页 |
·引言 | 第52-53页 |
·传统发酵食品中微生态系统的初步镜检 | 第53-55页 |
·采集样品中乳酸菌的的初步分离 | 第55-56页 |
·各样品最佳稀释度和培养基的选择 | 第55页 |
·各样品中乳酸菌的初步分离 | 第55-56页 |
·产ClassⅡa细菌素乳酸菌的筛选 | 第56-62页 |
·琼脂孔扩散法筛选产细菌素乳酸菌 | 第56-58页 |
·96 孔平板法筛选目标菌株 | 第58页 |
·Colony--PCR筛选产ClassⅡa细菌素乳酸菌 | 第58-62页 |
·产ClassⅡa细菌素乳酸菌的鉴定 | 第62-67页 |
·Biolog微生物鉴定系统鉴定菌株J23 | 第62-65页 |
·利用16SrDNA序列鉴定菌株J23 | 第65-67页 |
·本章小结 | 第67-69页 |
第4章 Bac-J23 的分离纯化研究 | 第69-81页 |
·引言 | 第69-70页 |
·蛋白质测定标准曲线的绘制 | 第70页 |
·盐析法分离纯化Bac-J23 | 第70-71页 |
·菌体细胞吸附分离纯化Bac-J23 | 第71-72页 |
·pH对菌体细胞吸附Bac-J23 的影响 | 第71-72页 |
·产生菌J23 细胞吸附纯化Bac-J23 | 第72页 |
·阳离子交换法分离纯化Bac-J23 | 第72-74页 |
·pH对Bac-J23 的纯化效果的影响 | 第72-73页 |
·SP-Sepharose Fast Flow 分离纯化Bac-J23 | 第73-74页 |
·疏水层析法分离纯化Bac-J23 | 第74-75页 |
·细菌素Bac-J23 的纯度鉴定及N端序列分析 | 第75-80页 |
·Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定Bac-J23 纯度与分子量 | 第75-76页 |
·HPLC鉴定Bac-J23 纯度 | 第76-77页 |
·Bac-J23 的N端序列分析 | 第77-80页 |
·本章小结 | 第80-81页 |
第5章 Bac-J23 的理化性质及生物信息学分析 | 第81-94页 |
·引言 | 第81-82页 |
·Bac-J23 的氨基酸组成分析 | 第82-84页 |
·Bac-J23 氨基酸组成分析结果 | 第82-83页 |
·Bac-J23 等电点和消光系数预测 | 第83-84页 |
·Bac-J23 的热力学特性研究 | 第84-86页 |
·升温速率的优化 | 第84-86页 |
·Bac-J23 的热特性研究 | 第86页 |
·Bac-J23 的酸碱稳定性研究 | 第86-87页 |
·Bac-J23 的酶敏感性研究 | 第87页 |
·细菌素Bac-J23 的等电点测定 | 第87-88页 |
·Bac-J23 的疏水性/亲水性分析 | 第88页 |
·Bac-J23 的紫外可见光谱扫描分析 | 第88-89页 |
·Bac-J23 中巯基和S-S键含量测定 | 第89页 |
·Bac-J23 的亚细胞定位预测分析 | 第89-90页 |
·Bac-J23 的跨膜区预测 | 第90-91页 |
·Bac-J23 的同源性分析 | 第91-93页 |
·本章小结 | 第93-94页 |
第6章 Bac-J23 的合成调控及应用影响因素研究 | 第94-117页 |
·引言 | 第94-95页 |
·培养条件对Bac-J23 合成的影响 | 第95-98页 |
·菌株生长与Bac-J23 合成进程的关系 | 第95页 |
·接种量对Bac-J23 合成的影响 | 第95-96页 |
·温度对Bac-J23 合成的影响 | 第96-97页 |
·pH对细菌素合成的影响 | 第97-98页 |
·培养基组分对Bac-J23 合成的影响及优化 | 第98-106页 |
·碳源对Bac-J23 合成的影响 | 第98-99页 |
·氮源对Bac-J23 合成的影响 | 第99-100页 |
·KH_2PO_4 对Bac-J23 合成的影响 | 第100-101页 |
·MgSO_4 对Bac-J23 合成的影响 | 第101页 |
·MnSO_4 对Bac-J23 合成的影响 | 第101-102页 |
·Tween-80 对Bac-J23 合成的影响 | 第102-103页 |
·响应面试验优化Bac-J23 合成条件 | 第103-106页 |
·Bac-J23 合成的诱导调控研究 | 第106-115页 |
·Lactobacillus paracasei基因组中群感效应系统的初步确认 | 第106-107页 |
·发酵体系中诱导因子及其诱导作用的研究 | 第107-109页 |
·外源因子对Bac-J23 合成诱导的研究 | 第109-113页 |
·环境胁迫效应诱导合成Bac-J23 | 第113-115页 |
·本章小结 | 第115-117页 |
第7章 有限水解修饰及食品环境对Bac-J23 活性影响 | 第117-125页 |
·引言 | 第117页 |
·Bac-J23 的酶解产物分析 | 第117-118页 |
·Bac-J23 及其酶解产物与敏感菌细胞的结合研究 | 第118-119页 |
·Bac-J23 及其酶解产物的抗菌活力 | 第119页 |
·食品成分和食品相关环境对Bac-J23 活性的影响 | 第119-123页 |
·酪蛋白对Bac-J23 抗菌活性的影响 | 第119-120页 |
·卵磷脂对Bac-J23 抗菌活性的影响 | 第120-121页 |
·EDTA对Bac-J23 抗菌活力的影响 | 第121页 |
·NaCl对Bac-J23 合成及活性的影响 | 第121-122页 |
·乙醇对Bac-J23 活性的影响 | 第122-123页 |
·Bac-J23 的贮存稳定性分析 | 第123-124页 |
·本章小结 | 第124-125页 |
结论 | 第125-126页 |
展望 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-140页 |
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第140-143页 |
致谢 | 第143-144页 |
个人简历 | 第144页 |