| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 乳杆菌概述 | 第13页 |
| 1.2 表层蛋白 | 第13-15页 |
| 1.3 乳杆菌的表层蛋白 | 第15-22页 |
| 1.3.1 乳杆菌表层蛋白的概况 | 第15-17页 |
| 1.3.2 乳杆菌表层蛋白的氨基酸组成 | 第17页 |
| 1.3.3 乳杆菌表层蛋白的初级与二级结构 | 第17-19页 |
| 1.3.4 乳杆菌表层蛋白的功能 | 第19-20页 |
| 1.3.5 乳杆菌表层蛋白的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.6 国内研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 存在问题和立题意义 | 第22-25页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 携带表层蛋白乳杆菌的筛选及表层蛋白理化性质的分析 | 第26-44页 |
| 2.1 前言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第27页 |
| 2.2.1 实验菌株与试剂 | 第27页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.3.1 菌株的活化和传代 | 第27-28页 |
| 2.3.2 制备LiCl提取物 | 第28页 |
| 2.3.3 蛋白质相对分子质量的测定 | 第28页 |
| 2.3.4 透射电子显微镜(TEM)观察乳杆菌表层结构 | 第28页 |
| 2.3.5 蛋白质含量的测定 | 第28页 |
| 2.3.6 离子交换层析分离纯化表层蛋白 | 第28-29页 |
| 2.3.7 表层蛋白氨基酸组成的测定 | 第29页 |
| 2.3.8 表层蛋白二级结构的测定 | 第29页 |
| 2.3.9 表层蛋白热变性温度的测定 | 第29页 |
| 2.3.10 数据统计与分析 | 第29页 |
| 2.4 结果和讨论 | 第29-43页 |
| 2.4.1 乳杆菌LiCl提取物的SDS-PAGE分析 | 第29-30页 |
| 2.4.2 乳杆菌表层结构的显微观察 | 第30-32页 |
| 2.4.3 乳杆菌表层蛋白的分离纯化 | 第32-35页 |
| 2.4.4 乳杆菌表层蛋白的氨基酸组成分析 | 第35-37页 |
| 2.4.5 乳杆菌表层蛋白的二级结构 | 第37-40页 |
| 2.4.6 乳杆菌表层蛋白的热变性温度 | 第40-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 表层蛋白对乳杆菌益生特性的影响 | 第44-60页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第44-45页 |
| 3.2.1 实验菌株与试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第45页 |
| 3.3 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.3.1 菌株的活化和传代 | 第45页 |
| 3.3.2 LiCl处理对乳杆菌致死作用的测定 | 第45页 |
| 3.3.3 乳杆菌表面疏水性的测定 | 第45-46页 |
| 3.3.4 乳杆菌表面电荷的测定 | 第46页 |
| 3.3.5 乳杆菌自动聚集能力的测定 | 第46页 |
| 3.3.6 乳杆菌与致病菌的共聚集能力的测定 | 第46-47页 |
| 3.3.7 表层蛋白对致病菌的促凝集作用 | 第47页 |
| 3.3.8 乳杆菌在模拟消化道存活量的测定 | 第47页 |
| 3.3.9 胆盐应激对表层蛋白表达量的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.10 数据统计与分析 | 第48页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第48-59页 |
| 3.4.1 LiCl处理对乳杆菌致死力的测定 | 第48页 |
| 3.4.2 表层蛋白对乳杆菌表面疏水性的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.3 表层蛋白对乳杆菌表面电荷的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.4 表层蛋白对乳杆菌自动聚集率的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.5 表层蛋白对乳杆菌共聚集率的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.6 表层蛋白对肠道致病菌菌体的促凝集作用 | 第52-53页 |
| 3.4.7 表层蛋白对乳杆菌在模拟消化道中存活率的影响 | 第53-57页 |
| 3.4.8 胆盐应激对表层蛋白表达量的影响 | 第57-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 表层蛋白对乳杆菌黏附特性和抑菌作用的影响 | 第60-75页 |
| 4.1 前言 | 第60-61页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第61页 |
| 4.2.1 实验菌株、细胞株与试剂 | 第61页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-63页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第61页 |
| 4.3.2 乳杆菌黏附胶原蛋白的测定 | 第61页 |
| 4.3.3 测定纯化的表层蛋白对乳杆菌黏附胶原蛋白的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.4 测定纯化的表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌黏附胶原蛋白的影响 | 第62页 |
| 4.3.5 乳杆菌黏附HT-29细胞的测定 | 第62页 |
| 4.3.6 乳杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌侵袭HT-29细胞的抑制作用 | 第62页 |
| 4.3.7 测定纯化的表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌黏附HT-29细胞的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.8 数据统计与分析 | 第63页 |
| 4.4 结果和讨论 | 第63-74页 |
| 4.4.1 表层蛋白对乳杆菌黏附胶原蛋白的影响 | 第63-65页 |
| 4.4.2 纯化的表层蛋白对乳杆菌黏附胶原蛋白的影响 | 第65-66页 |
| 4.4.3 纯化的表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌黏附胶原蛋白的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.4 表层蛋白对乳杆菌黏附HT-29细胞的影响 | 第67-69页 |
| 4.4.5 乳杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌侵袭HT-29细胞的抑制作用 | 第69-71页 |
| 4.4.6 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌黏附HT-29细胞的抑制作用 | 第71-74页 |
| 4.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 乳杆菌表层蛋白的肽聚糖水解酶活性 | 第75-90页 |
| 5.1 前言 | 第75页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第75-76页 |
| 5.2.1 实验菌株与试剂 | 第75页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第75-76页 |
| 5.3 实验方法 | 第76-77页 |
| 5.3.1 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌生长的影响 | 第76页 |
| 5.3.2 提取大肠杆菌和沙门氏菌细胞壁肽聚糖 | 第76页 |
| 5.3.3 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌肽聚糖的水解作用 | 第76页 |
| 5.3.4 酶谱分析 | 第76页 |
| 5.3.5 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌细胞的裂解作用 | 第76-77页 |
| 5.3.6 TEM观察表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌细胞形态的影响 | 第77页 |
| 5.3.7 PI、cFDA双标记和流式细胞仪(FCM)分析 | 第77页 |
| 5.3.8 数据统计与分析 | 第77页 |
| 5.4 结果和讨论 | 第77-89页 |
| 5.4.1 乳杆菌表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌生长的影响 | 第77-79页 |
| 5.4.2 乳杆菌表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌细胞壁肽聚糖的水解作用 | 第79-81页 |
| 5.4.3 乳杆菌表层蛋白水解大肠杆菌和沙门氏菌细胞壁肽聚糖的酶谱分析 | 第81-82页 |
| 5.4.4 乳杆菌表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌细胞的裂解作用 | 第82-86页 |
| 5.4.5 TEM观察表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌形态结构的影响 | 第86-87页 |
| 5.4.6 FCM检测表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌生理状态的影响 | 第87-89页 |
| 5.5 本章小结 | 第89-90页 |
| 第六章 乳杆菌表层蛋白对肠道致病菌引起的HT-29细胞凋亡的抑制 | 第90-108页 |
| 6.1 前言 | 第90页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第90-91页 |
| 6.2.1 实验菌株、细胞株与试剂 | 第90-91页 |
| 6.2.2 主要仪器设备 | 第91页 |
| 6.3 实验方法 | 第91-92页 |
| 6.3.1 大肠杆菌与沙门氏菌对HT-29细胞的感染 | 第91页 |
| 6.3.2 Hoechst 33342/PI双染观察细胞凋亡 | 第91页 |
| 6.3.3 FCM检测细胞凋亡 | 第91页 |
| 6.3.4 细胞线粒体膜电位的检测 | 第91-92页 |
| 6.3.5 细胞内Ca2+检测 | 第92页 |
| 6.3.6 Caspase活性检测 | 第92页 |
| 6.3.7 数据统计与分析 | 第92页 |
| 6.4 结果和讨论 | 第92-107页 |
| 6.4.1 大肠杆菌和沙门氏菌引起的细胞凋亡的形态学观察 | 第92-95页 |
| 6.4.2 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌引起的细胞凋亡的影响 | 第95-99页 |
| 6.4.3 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌引起的线粒体膜电位降低的抑制作用 | 第99-102页 |
| 6.4.4 表层蛋白对大肠杆菌和沙门氏菌感染的HT-29细胞内Ca2+浓度的影响 | 第102-106页 |
| 6.4.5 表层蛋白抑制大肠杆菌和沙门氏菌引起的细胞Caspase活性的升高 | 第106-107页 |
| 6.5 本章小结 | 第107-108页 |
| 主要结论与展望 | 第108-110页 |
| 主要结论 | 第108-109页 |
| 展望 | 第109-110页 |
| 论文创新点 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-124页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第124页 |
