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深黄被孢霉高产诱变菌株抑制消减杂交文库的构建及分析

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
第一章 文献综述第11-24页
   ·多不饱和脂肪酸的研究进展及来源第11-12页
     ·α-亚麻酸的主要来源第11页
     ·EPA 和 DHA 的主要来源第11页
     ·亚油酸的主要来源第11-12页
     ·γ-亚麻酸的主要来源第12页
     ·花生四烯酸的主要来源第12页
   ·多不饱和脂肪酸的生理功能第12-14页
     ·PUFAs 对心血管系统的调节作用第12-13页
     ·PUFAs 对炎症现象的改善作用第13页
     ·PUFAs 对免疫系统的调节作用第13页
     ·PUFAs 对视力的维护作用第13-14页
     ·其他第14页
   ·多不饱和脂肪酸的应用第14-15页
     ·PUFAs 在医学上的应用第14-15页
     ·PUFAs 在食品上的应用第15页
     ·PUFAs 在农业上的应用第15页
   ·差异表达基因的研究方法第15-18页
     ·表达序列标签技术第16页
     ·mRNA 差异显示技术第16页
     ·cDNA 代表性差异分析第16-17页
     ·基因表达系列分析第17-18页
     ·微阵列技术第18页
   ·抑制消减杂交技术的产生背景第18-23页
     ·抑制消减杂交技术的基本原理第19页
     ·抑制消减杂交技术的基本操作过程第19-21页
     ·抑制消减杂交技术的评价第21-22页
     ·抑制消减杂交技术的应用第22-23页
     ·展望第23页
   ·本课题研究的目的和意义第23-24页
第二章 深黄被孢霉高产诱变菌株消减 CDNA 文库的构建第24-37页
   ·材料第24-25页
     ·菌种第24页
     ·化学试剂第24页
     ·引物和接头第24-25页
     ·常用培养基第25页
     ·仪器设备第25页
   ·实验方法第25-32页
     ·菌株的活化及培养第25页
     ·总 RNA 抽提第25-26页
     ·mRNA 的纯化和浓缩第26-27页
     ·抑制性消减杂交第27-30页
     ·二次 PCR 产物的纯化第30-31页
     ·载体连接第31页
     ·感受态的制备第31-32页
     ·转化反应第32页
     ·菌落 PCR 鉴定重组子第32页
   ·结果第32-36页
     ·深黄被孢霉总 RNA 提取结果第32-33页
     ·深黄被孢霉 mRNA 纯化结果第33页
     ·双链 cDNA 反转录和 RsaⅠ酶切检测第33-34页
     ·消减文库中 PCR 产物分析第34页
     ·PCR 产物连接转化第34-35页
     ·消减文库阳性克隆的检测第35-36页
   ·讨论第36页
   ·小结第36-37页
第三章 深黄被孢霉高产诱变菌株差异表达基因的筛选、鉴定及序列分析第37-46页
   ·材料第37-38页
     ·化学试剂第37页
     ·溶液第37页
     ·PCR 引物第37页
     ·仪器设备第37-38页
   ·方法第38-40页
     ·地高辛标记 DNA第38页
     ·探针标记效率的确定第38-39页
     ·尼龙膜的制备第39页
     ·杂交第39页
     ·洗膜第39页
     ·免疫检测第39页
     ·阳性克隆的测序及同源性分析第39-40页
   ·结果与分析第40-44页
     ·斑点杂交筛选结果第40页
     ·序列测定及 ESTs 序列的功能分析第40-44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
第四章 结论及创新点第46-47页
   ·结论第46页
   ·创新点第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
附录第53-60页
作者简历第60页

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