免疫活性肽固相合成工艺及其降低牛奶体细胞数的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 文献回顾 | 第9-25页 |
| ·生物活性肽研究现状 | 第9-14页 |
| ·研究概况 | 第9页 |
| ·生物活性肽的分类 | 第9页 |
| ·生物活性肽的生产 | 第9-11页 |
| ·生物活性肽的特点 | 第11页 |
| ·生物活性肽的功能研究 | 第11-12页 |
| ·生物活性肽在动物饲料中的应用 | 第12-14页 |
| ·牛奶体细胞的概念及危害 | 第14-17页 |
| ·牛奶体细胞和体细胞数 | 第14-15页 |
| ·反映奶牛乳房健康受伤害 | 第15页 |
| ·奶牛产奶量下降 | 第15-16页 |
| ·体细胞数过高对乳脂率的影响 | 第16页 |
| ·体细胞数过高对乳蛋白的影响 | 第16页 |
| ·体细胞数过高对其他乳成分的影响 | 第16页 |
| ·体细胞数的控制措施 | 第16-17页 |
| ·固相肽合成 | 第17-21页 |
| ·固相合成原理 | 第17页 |
| ·固相载体和链接臂 | 第17-18页 |
| ·多肽固相合成的氨基酸保护策略 | 第18-19页 |
| ·多肽化学合成中的缩合剂 | 第19-20页 |
| ·多肽固相合成的监测 | 第20-21页 |
| ·多肽的分析方法 | 第21-22页 |
| ·质谱分析 | 第21页 |
| ·HPLC纯度分析 | 第21-22页 |
| ·其他分析方法 | 第22页 |
| ·多肽的分离纯化 | 第22-23页 |
| ·离子交换层析 | 第22页 |
| ·反相层析 | 第22页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第22-23页 |
| ·亲和层析 | 第23页 |
| ·研究意义和内容 | 第23-25页 |
| ·研究意义 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 免疫活性肽的固相合成 | 第25-47页 |
| ·试验材料与仪器 | 第25-28页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第26-27页 |
| ·多肽合成装置简图 | 第27-28页 |
| ·免疫活性肽的TBTU/Fmoc固相合成 | 第28-31页 |
| ·反应容器的预处理 | 第28页 |
| ·树脂的活化 | 第28页 |
| ·第一个氨基酸的连接 | 第28-29页 |
| ·偶联率的测定方法(即第一个氨基酸的连接率) | 第29-30页 |
| ·树脂上残余反应基团的封闭 | 第30页 |
| ·脱除氨基保护基 | 第30页 |
| ·肽键的形成(TBTU/HOBt缩合法) | 第30页 |
| ·固相合成过程中自由氨基的检测-茚三酮定性显色法 | 第30页 |
| ·残余氨基的乙酰化封闭 | 第30-31页 |
| ·免疫活性肽-树脂复合物的切割 | 第31页 |
| ·合成粗品中免疫活性肽的MS鉴定及定量分析 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-46页 |
| ·免疫活性肽固相合成工艺条件的优化 | 第31-41页 |
| ·第一个氨基酸及后续氨基酸的连接效率 | 第41-44页 |
| ·粗肽的MALDI-TOF MS分析 | 第44-45页 |
| ·免疫活性肽粗品的产率 | 第45页 |
| ·扩大规模的免疫活性肽合成 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第三章 免疫活性肽的分析与纯化制备 | 第47-57页 |
| ·实验部分 | 第47-49页 |
| ·仪器 | 第47-48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| ·免疫活性肽粗品的RP-HPLC分析 | 第48页 |
| ·免疫活性肽粗品的纯化制备 | 第48页 |
| ·TFA和乙腈的去除 | 第48-49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-56页 |
| ·免疫活性肽粗品的RP-HPLC分析 | 第49-51页 |
| ·分离纯化条件的优化 | 第51-53页 |
| ·粗肽制备 | 第53-54页 |
| ·免疫活性肽的纯度与收率 | 第54-55页 |
| ·成本估算 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 免疫活性肽对牛奶体细胞数的影响 | 第57-65页 |
| ·前言 | 第57页 |
| ·试验部分 | 第57-59页 |
| ·试验地点和时间 | 第58页 |
| ·试验牛的选择和分组 | 第58页 |
| ·喂养方法 | 第58页 |
| ·数据的测定和采集 | 第58-59页 |
| ·试验结果 | 第59-63页 |
| ·采食状况 | 第59页 |
| ·奶牛的健康状况 | 第59-60页 |
| ·产奶量 | 第60-61页 |
| ·乳成份分析 | 第61-63页 |
| ·效益分析 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 第五章 结论与展望 | 第65-68页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| ·展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 附录: 缩略词 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
