| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-42页 |
| 1.1 糖尿病流行病分析 | 第20-21页 |
| 1.2 糖尿病的分类及其治疗 | 第21-30页 |
| 1.2.1 糖尿病分类 | 第21-22页 |
| 1.2.2 糖尿病的治疗 | 第22-30页 |
| 1.2.2.1 糖尿病的化合物治疗 | 第22-23页 |
| 1.2.2.2 糖尿病的免疫治疗 | 第23-25页 |
| 1.2.2.3 糖尿病的胰岛素治疗 | 第25-27页 |
| 1.2.2.4 糖尿病的微生物治疗 | 第27-30页 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌概况 | 第30-35页 |
| 1.3.1 枯草芽孢杆菌芽孢形成和构造 | 第30-33页 |
| 1.3.2 芽孢表面展示系统和构建原则 | 第33-34页 |
| 1.3.3 枯草芽孢杆菌在食品及医药行业中的应用 | 第34-35页 |
| 1.4 家蚕疾病模型研究 | 第35-39页 |
| 1.4.1 模式生物家蚕 | 第35-36页 |
| 1.4.2 家蚕疾病模型研究 | 第36-39页 |
| 1.4.2.1 家蚕肝病模型 | 第37页 |
| 1.4.2.2 家蚕帕金森症模型 | 第37页 |
| 1.4.2.3 家蚕高血糖模型 | 第37-38页 |
| 1.4.2.4 家蚕其他疾病模型 | 第38-39页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第39-42页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第40-41页 |
| 1.5.2 研究的技术路线 | 第41-42页 |
| 第二章 人胰岛素原基因的克隆及其芽孢表面展示 | 第42-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第42-46页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第42-43页 |
| 2.1.2 试剂 | 第43页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第43页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第43-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-51页 |
| 2.2.1 人胰岛素原基因hpi的克隆、测序及鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2.2 整合型重组质粒pJS700-HPI的构建 | 第47-48页 |
| 2.2.3 重组枯草芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定 | 第48-50页 |
| 2.2.4 表面展示人胰岛素原重组芽孢的诱导及鉴定 | 第50-51页 |
| 2.2.5 Bacillus subtilis芽孢悬液的制备 | 第51页 |
| 2.3 结果与分析 | 第51-57页 |
| 2.3.1 人胰岛素原基因的克隆与鉴定 | 第51-52页 |
| 2.3.2 重组整合型质粒pJS700-HPI的构建和鉴定 | 第52-53页 |
| 2.3.3 重组枯草芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定 | 第53-55页 |
| 2.3.4 CotC-HPI融合蛋白的表达及鉴定 | 第55-57页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第57-59页 |
| 第三章 家蚕高血糖模型的构建 | 第59-66页 |
| 3.1 材料 | 第59-60页 |
| 3.1.1 试剂 | 第59页 |
| 3.1.2 实验材料 | 第59页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第59-60页 |
| 3.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 3.2.1 葡萄糖溶液的配置和家蚕的微量注射 | 第60页 |
| 3.2.2 家蚕血液糖类物质测定 | 第60页 |
| 3.2.3 家蚕血液中葡萄糖含量的测定 | 第60页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第60-61页 |
| 3.3 结果和分析 | 第61-64页 |
| 3.3.1 各组家蚕体重和体长的观测 | 第61-62页 |
| 3.3.2 家蚕血液的葡萄糖代谢分析 | 第62-63页 |
| 3.3.3 各组家蚕血液总糖含量的测定 | 第63-64页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第64-66页 |
| 第四章 高血糖模型家蚕的差异蛋白质组学分析 | 第66-83页 |
| 4.1 仪器与试剂 | 第66-68页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第66页 |
| 4.1.2 二维电泳相关试剂 | 第66-68页 |
| 4.1.3 考马斯亮蓝染色相关试剂 | 第68页 |
| 4.1.4 质谱鉴定所需试剂 | 第68页 |
| 4.1.5 RNA抽提及RT-PCR试剂 | 第68页 |
| 4.2 材料与方法 | 第68-73页 |
| 4.2.1 家蚕高血糖模型构建 | 第68-69页 |
| 4.2.2 蛋白质样品制备 | 第69页 |
| 4.2.3 二维电泳 | 第69页 |
| 4.2.4 二维凝胶图谱分析 | 第69页 |
| 4.2.5 样品处理和质谱鉴定 | 第69-70页 |
| 4.2.6 数据库比对 | 第70页 |
| 4.2.7 差异蛋白的GO分析 | 第70页 |
| 4.2.8 逆转录PCR(RT-PCR) | 第70-73页 |
| 4.3 结果 | 第73-81页 |
| 4.3.1 高血糖模型家蚕中肠的形态差异 | 第73-74页 |
| 4.3.2 高血糖模型家蚕中肠蛋白质组的差异 | 第74页 |
| 4.3.3 差异蛋白的质谱鉴定 | 第74-77页 |
| 4.3.4 差异蛋白的GO分析 | 第77-78页 |
| 4.3.5 差异蛋白的RT-PCR分析 | 第78-79页 |
| 4.3.6 差异蛋白的Western blot验证 | 第79-81页 |
| 4.4 讨论 | 第81-82页 |
| 4.5 本章小结 | 第82-83页 |
| 第五章 家蚕高血糖模型评估口服重组芽孢的降血糖功效 | 第83-91页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第83-84页 |
| 5.2 实验方法 | 第84-85页 |
| 5.2.1 高血糖模型家蚕的构建和重组芽孢的口添实验 | 第84页 |
| 5.2.2 家蚕体重和体长的测定 | 第84页 |
| 5.2.3 家蚕血液中血糖含量的测定 | 第84页 |
| 5.2.4 家蚕血液蛋白的Western blot分析 | 第84页 |
| 5.2.5 数据处理 | 第84-85页 |
| 5.3 结果 | 第85-88页 |
| 5.3.1 高血糖模型家蚕口添重组芽孢后的体重和体长观测 | 第85-86页 |
| 5.3.2 各组家蚕血液总糖含量的测定 | 第86-87页 |
| 5.3.3 家蚕口服芽孢后血液的Western blot分析验证 | 第87-88页 |
| 5.4 讨论 | 第88-90页 |
| 5.5 本章小结 | 第90-91页 |
| 第六章 糖尿病模型小鼠对口服重组芽孢的验证 | 第91-98页 |
| 6.1 材料与试剂 | 第91-92页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第91页 |
| 6.1.2 试剂 | 第91-92页 |
| 6.1.3 仪器设备 | 第92页 |
| 6.2 实验方法 | 第92-93页 |
| 6.2.1 链脲佐菌素溶液的配置和小鼠的腹腔注射 | 第92页 |
| 6.2.2 小鼠血液中葡萄糖含量的测定 | 第92页 |
| 6.2.3 糖尿病小鼠的分组和重组芽孢的口添实验 | 第92-93页 |
| 6.2.4 小鼠血清中胰岛素水平测定 | 第93页 |
| 6.2.5 数据处理 | 第93页 |
| 6.3 结果 | 第93-96页 |
| 6.3.1 小鼠糖尿病模型的造模结果 | 第93-94页 |
| 6.3.2 小鼠血糖含量的测定 | 第94-95页 |
| 6.3.3 小鼠血清胰岛素水平的测定 | 第95-96页 |
| 6.4 讨论 | 第96-97页 |
| 6.5 本章小结 | 第97-98页 |
| 第七章 总结和展望 | 第98-101页 |
| 7.1 主要工作总结 | 第98-100页 |
| 7.2 创新点 | 第100页 |
| 7.3 展望 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 博士期间发表的学术成果和参加的课题 | 第113-115页 |
