| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩略语 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 罗非鱼 | 第13页 |
| 1.2 鲈鱼 | 第13-14页 |
| 1.3 脯氨酸内肽酶的研究现状 | 第14-18页 |
| 1.3.1 脯氨酸内肽酶（PEP） | 第14-15页 |
| 1.3.2 PEP的晶体结构 | 第15-16页 |
| 1.3.3 PEP的应用 | 第16-17页 |
| 1.3.4 PEP抑制剂 | 第17-18页 |
| 1.4 本文的研究思路、主要内容与意义 | 第18-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.1 实验原料 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 实验所用溶液及其配制 | 第20-22页 |
| 2.2.1 缓冲液的配制 | 第20页 |
| 2.2.2 SDS-PAGE配制所需溶液 | 第20-21页 |
| 2.2.3 普通银染所用溶液 | 第21页 |
| 2.2.4 质谱银染所用溶液 | 第21-22页 |
| 2.2.5 培养基及琼脂糖电泳所用试剂 | 第22页 |
| 2.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.4 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.4.1 PEP活性测定方法 | 第23页 |
| 2.4.2 蛋白浓度测定方法 | 第23页 |
| 2.4.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第23-24页 |
| 2.4.4 罗非鱼PEP的分离纯化 | 第24-25页 |
| 2.4.5 鲈鱼PEP的分离纯化 | 第25-26页 |
| 2.4.6 PEP的性质分析 | 第26-27页 |
| 2.4.7 多克隆抗体的制备 | 第27页 |
| 2.4.8 抑制剂对罗非鱼PEP作用机理判断 | 第27-28页 |
| 2.4.9 罗非鱼PEP对胶原小肽的降解 | 第28页 |
| 2.4.10 鲈鱼PEP基因的分子克隆 | 第28-30页 |
| 2.4.11 鲈鱼PEP基因在鲈鱼不同组织内表达差异 | 第30-32页 |
| 2.4.12 不饱和脂肪酸对鲈鱼PEP抑制机理及抑制常数的测定 | 第32页 |
| 2.4.13 光谱法分析不饱和脂肪酸对鲈鱼PEP的结构影响 | 第32-33页 |
| 第3章 结果与分析 | 第33-63页 |
| 3.1 兔抗罗非鱼PEP多克隆抗体的制备 | 第33页 |
| 3.2 罗非鱼PEP的纯化及分子量鉴定 | 第33-36页 |
| 3.3 罗非鱼PEP的MS/MS肽质量指纹谱分析 | 第36-37页 |
| 3.4 鲈鱼PEP的纯化及分子量鉴定 | 第37-39页 |
| 3.5 罗非鱼PEP与鲈鱼PEP性质比较 | 第39-46页 |
| 3.5.1 PEP纯化倍数和得率分析 | 第39-40页 |
| 3.5.2 PEP的最适反应温度 | 第40-41页 |
| 3.5.3 PEP的热稳定性 | 第41页 |
| 3.5.4 PEP的最适pH | 第41-42页 |
| 3.5.5 PEP的pH稳定性 | 第42-43页 |
| 3.5.6 金属离子对PEP活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.5.7 金属离子对PEP热稳定性的影响 | 第44页 |
| 3.5.8 底物特异性 | 第44-45页 |
| 3.5.9 活化能 | 第45-46页 |
| 3.6 罗非鱼PEP的相关研究 | 第46-51页 |
| 3.6.1 蛋白酶抑制剂对PEP活力的影响及机理 | 第46-47页 |
| 3.6.2 Cu~(2+)和Zn~(2+)对PEP的抑制类型 | 第47-49页 |
| 3.6.3 PEP对胶原蛋白小肽的作用与研究 | 第49-51页 |
| 3.7 鲈鱼PEP的相关研究 | 第51-63页 |
| 3.7.1 PEP基因的分子克隆 | 第51-52页 |
| 3.7.2 PEP基因的生物信息学分析 | 第52-54页 |
| 3.7.3 PEP在体内的组织分布 | 第54-56页 |
| 3.7.4 油酸对PEP抑制机理及抑制常数的测定 | 第56-57页 |
| 3.7.5 亚油酸对PEP抑制机理及抑制常数的测定 | 第57-58页 |
| 3.7.6 DHA对PEP抑制机理及抑制常数的测定 | 第58-59页 |
| 3.7.7 圆二色谱法（CD）预测脂肪酸对PEP二级结构的影响 | 第59-61页 |
| 3.7.8 荧光光谱法预测脂肪酸对PEP构象的变化 | 第61-63页 |
| 第4章 讨论 | 第63-69页 |
| 4.1 罗非鱼和鲈鱼PEP的分离纯化 | 第63页 |
| 4.2 罗非鱼和鲈鱼PEP的性质比较 | 第63-65页 |
| 4.3 罗非鱼PEP的相关研究 | 第65-66页 |
| 4.4 鲈鱼PEP的相关研究 | 第66-69页 |
| 第5章 结论与展望 | 第69-72页 |
| 5.1 结论 | 第69-70页 |
| 5.2 创新点 | 第70页 |
| 5.3 展望 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第80页 |
