| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-27页 |
| ·琥珀酸及其功用 | 第9-10页 |
| ·琥珀酸 | 第9页 |
| ·琥珀酸的功能与用途 | 第9-10页 |
| ·琥珀酸的生产 | 第10-14页 |
| ·大肠杆菌产琥珀酸的代谢工程改造 | 第10-12页 |
| ·大肠杆菌利用廉价碳源生产琥珀酸 | 第12-14页 |
| ·半纤维素及其利用 | 第14-18页 |
| ·半纤维素与木聚糖的结构 | 第15页 |
| ·木聚糖酶 | 第15-17页 |
| ·一体化生物加工过程 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌对半纤维素的利用 | 第18-21页 |
| ·大肠杆菌的蛋白分泌 | 第18-20页 |
| ·利用大肠杆菌生物转化半纤维素 | 第20-21页 |
| ·代谢工程与合成生物学的结合 | 第21-25页 |
| ·基因合成与生物砖 | 第22-23页 |
| ·模块代谢工程 | 第23-25页 |
| ·选题背景及主要技术路线 | 第25-27页 |
| ·选题背景 | 第25页 |
| ·主要技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 木聚糖酶的筛选与表征 | 第27-61页 |
| ·实验材料 | 第27-32页 |
| ·菌种与质粒 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验药品与试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·溶液 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-40页 |
| ·菌体培养与发酵 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化（CaCl2法） | 第33页 |
| ·大肠杆菌染色体 DNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取（碱裂法） | 第34-35页 |
| ·PCR 扩增基因 | 第35-36页 |
| ·PCR 产物纯化回收 | 第36页 |
| ·DNA 的酶切、去磷酸化和连接 | 第36-37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
| ·DNA 片段的切胶回收及纯化 | 第37-38页 |
| ·发酵液菌体浓度和葡萄糖的测定 | 第38页 |
| ·蛋白浓度测定[143] | 第38-39页 |
| ·酶活的测定 | 第39-40页 |
| ·DNS 法测定还原糖 | 第40页 |
| ·实验结果与讨论 | 第40-59页 |
| ·木聚糖利用基因操纵子的构建 | 第40-51页 |
| ·最优木聚糖酶组合的筛选 | 第51-59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 第三章 木聚糖水解效率的优化 | 第61-103页 |
| ·实验材料 | 第61-64页 |
| ·菌种与质粒 | 第61-62页 |
| ·实验仪器 | 第62-63页 |
| ·实验药品与试剂 | 第63页 |
| ·培养基 | 第63页 |
| ·溶液 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-70页 |
| ·大肠杆菌电转化感受态细胞的制备与转化 | 第64-66页 |
| ·目的基因的敲除 | 第66-67页 |
| ·菌落（液）PCR | 第67-68页 |
| ·胞内蛋白的提取 | 第68页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳[147] | 第68-70页 |
| ·木聚糖的酸水解[148] | 第70页 |
| ·实验结果与讨论 | 第70-101页 |
| ·lpp 敲除对大肠杆菌蛋白分泌水平的影响 | 第70-76页 |
| ·dsbA 过表达对木聚糖酶分泌及酶活水平的影响 | 第76-82页 |
| ·木聚糖酶表达水平优化对蛋白表达分泌及菌体生长的影响 | 第82-88页 |
| ·blc 编码蛋白表面展示木糖苷酶对菌体生长及木聚糖水解利用的影响 | 第88-96页 |
| ·abf2 过表达对木聚糖水解利用及菌体生长的影响 | 第96-101页 |
| ·本章小结 | 第101-103页 |
| 第四章 以木聚糖为底物进行琥珀酸的 CBP 生产 | 第103-119页 |
| ·实验材料 | 第103-106页 |
| ·菌种与质粒 | 第103页 |
| ·实验仪器 | 第103-104页 |
| ·实验药品与试剂 | 第104页 |
| ·培养基 | 第104-105页 |
| ·溶液 | 第105-106页 |
| ·实验方法 | 第106-107页 |
| ·大肠杆菌的琥珀酸发酵 | 第106页 |
| ·发酵液 HPLC 分析 | 第106-107页 |
| ·实验结果与讨论 | 第107-118页 |
| ·菌株 Z6373 的构建 | 第107-114页 |
| ·以木聚糖为底物琥珀酸的发酵 | 第114-118页 |
| ·本章小结 | 第118-119页 |
| 第五章 结论与展望 | 第119-122页 |
| ·结论及创新点 | 第119-120页 |
| ·主要结论 | 第119-120页 |
| ·创新点 | 第120页 |
| ·展望 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-134页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第134-135页 |
| 附录 木聚糖酶优化后编码序列 | 第135-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
