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产胞内PHA的芽孢杆菌的发酵工艺及基因组学研究

摘要第5-6页
abstract第6-7页
第一章 绪论第11-20页
    1.1 聚羟基脂肪酸酯(PHA)的概述第11-12页
        1.1.1 PHA简介及分类第11页
        1.1.2 PHA的理化性质第11-12页
    1.2 PHA合成菌的筛选方法第12页
    1.3 PHA的分离与纯化第12-14页
    1.4 PHA合成菌的检测方法第14-15页
    1.5 PHA的工业生产状况及合成研究第15-18页
        1.5.1 PHA的工业生产状况第15-16页
        1.5.2 化学合成法第16-17页
        1.5.3 生物合成法第17-18页
        1.5.4 基因工程技术应用于PHA合成第18页
    1.6 PHA的应用第18-19页
    1.7 研究目的及意义第19-20页
        1.7.1 研究目的第19页
        1.7.2 研究意义第19-20页
第二章 芽孢杆菌产PHA菌株的筛选鉴定及检测第20-29页
    2.1 引言第20页
    2.2 实验试剂与仪器第20-21页
        2.2.1 实验试剂第20页
        2.2.2 实验仪器第20-21页
        2.2.3 样品来源第21页
        2.2.4 培养基第21页
    2.3 实验方法第21-23页
        2.3.1 高效产PHA菌株的筛选第21-22页
        2.3.2 荧光显微镜观察胞内PHA的合成情况第22页
        2.3.3 发酵及PHA的分离纯化第22页
        2.3.4 菌种鉴定第22-23页
        2.3.5 红外光谱分析第23页
        2.3.6 气质联用色谱法(GC-MS)分析PHA单体组成与含量第23页
        2.3.7 核磁共振法分析PHA的结构第23页
    2.4 结果与讨论第23-28页
        2.4.1 尼罗红琼脂平板法筛选高效产PHA的菌株第23-24页
        2.4.2 菌种鉴定第24-26页
        2.4.3 聚合物的红外光谱分析第26页
        2.4.4 PHA单体的组成分析第26-27页
        2.4.5 PHA结构分析第27-28页
    2.5 小结第28-29页
第三章 芽孢杆菌产PHA发酵条件的优化及其性能表征第29-41页
    3.1 引言第29页
    3.2 实验试剂与仪器第29-30页
        3.2.1 实验试剂第29页
        3.2.2 实验仪器第29页
        3.2.3 菌种第29-30页
        3.2.4 培养基第30页
    3.3 实验方法第30-31页
        3.3.1 单因素实验第30页
        3.3.2 响应面实验优化发酵条件第30-31页
        3.3.3 凝胶渗透色谱测定PHA分子量第31页
        3.3.4 差示扫描量热分析(DSC)和热重分析(TGA)第31页
        3.3.5 样品机械性能的测定第31页
    3.4 结果与讨论第31-40页
        3.4.1 单因素实验第31-36页
        3.4.2 响应面分析法优化发酵培养基第36-39页
        3.4.3 聚合物物化性能和热性能结果分析第39-40页
    3.5 小结第40-41页
第四章 芽孢杆菌基因组学及基因工程研究第41-50页
    4.1 引言第41页
    4.2 材料第41-42页
        4.2.1 主要试剂与仪器第41页
        4.2.2 所用菌株及质粒第41页
        4.2.3 所用引物第41-42页
    4.3 实验方法第42-45页
        4.3.1 基因组DNA提取第42页
        4.3.2 全基因组测序第42页
        4.3.3 基因组测序数据的生物信息分析第42-43页
        4.3.4 基因工程技术应用于PHA的合成第43-44页
        4.3.5 重组质粒的构建与鉴定第44-45页
        4.3.6 PHA的提取和纯化第45页
        4.3.7 利用NMR进行表征PHA第45页
    4.4 结果与讨论第45-49页
        4.4.1 Bacillussp.PJC48基因组的提取第45页
        4.4.2 Bacillussp.PJC48的基因组测序数据的生物信息学分析第45-46页
        4.4.3 Bacillussp.PJC48基因组测序数据的组装第46页
        4.4.4 查找rRNA/tRNA的结果分析第46-47页
        4.4.5 Bacillussp.PJC48基因组分预测第47页
        4.4.6 Bacillussp.PJC48基因组的提交第47页
        4.4.7 重组质粒的构建结果分析第47-48页
        4.4.8 Bacillus sp. PJC48 合成 PHA 能力的分析第48-49页
        4.4.9 PHA的结构表征第49页
    4.5 小结第49-50页
第五章 产胞内PHA芽孢杆菌诱变育种第50-56页
    5.1 引言第50页
    5.2 材料第50页
        5.2.1 菌种第50页
        5.2.2 仪器第50页
        5.2.3 培养基第50页
    5.3 方法第50-51页
        5.3.1 出发菌株Bacillussp.PJC48生长曲线的测定第50页
        5.3.2 菌悬液的制备第50页
        5.3.3 紫外线(UV)诱变处理第50-51页
        5.3.4 甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理第51页
        5.3.5 致死率的测定第51页
        5.3.6 诱变菌种的筛选第51页
    5.4 结果与分析第51-55页
        5.4.1 Bacillussp.PJC48的生长曲线第51-52页
        5.4.2 诱变计量第52-53页
        5.4.3 菌体干重及PHA产率测定第53-54页
        5.4.4 菌株遗传稳定性实验第54-55页
    5.5 小结第55-56页
第六章 结论与展望第56-58页
    6.1 结论第56页
    6.2 展望第56-58页
参考文献第58-65页
致谢第65-66页
作者简介第66-67页
附件第67页

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