摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第7-8页 |
1 绪论 | 第8-15页 |
1.1 多不饱和脂肪酸简介 | 第8-9页 |
1.1.1 多不饱和脂肪酸功能 | 第8页 |
1.1.2 多不饱和脂肪酸来源 | 第8-9页 |
1.2 高山被孢霉脂质合成研究背景 | 第9-12页 |
1.2.1 高山被孢霉脂质合成研究现状 | 第9-11页 |
1.2.2 高山被孢霉分子改造研究进展 | 第11-12页 |
1.3 四氢生物蝶呤与脂质合成的关系 | 第12-14页 |
1.3.1 高等生物中四氢生物蝶呤的生理功能 | 第12页 |
1.3.2 高山被孢霉BH_4合成途径 | 第12-13页 |
1.3.3 BH_4在脂质合成中的潜在作用 | 第13-14页 |
1.4 立题依据与主要研究内容 | 第14-15页 |
1.4.1 立题依据 | 第14页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第14-15页 |
2 材料与方法 | 第15-25页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 菌株及载体 | 第15页 |
2.1.2 实验仪器 | 第15页 |
2.1.3 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第16页 |
2.1.5 主要培养基配制 | 第16-17页 |
2.1.6 PCR及RT-qPCR引物序列 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-25页 |
2.2.1 菌株培养和保藏方法 | 第18-19页 |
2.2.2 转录组数据的比对分析 | 第19页 |
2.2.3 BH_4合成抑制剂对高山被孢霉脂肪酸合成的影响 | 第19页 |
2.2.4 脂肪酸提取及分析 | 第19页 |
2.2.5 目的基因的克隆 | 第19-20页 |
2.2.6 二元表达载体的构建 | 第20-22页 |
2.2.7 根癌农杆菌介导转化高山被孢霉 | 第22页 |
2.2.8 过表达重组菌株的筛选和鉴定 | 第22页 |
2.2.9 基因表达水平分析 | 第22页 |
2.2.10 生物蝶呤、叶酸及酪氨酸的提取及检测 | 第22-23页 |
2.2.11 NO、ROS及NADPH水平分析 | 第23-25页 |
3 结果与讨论 | 第25-40页 |
3.1 BH_4与高山被孢霉脂质合成的关系 | 第25-30页 |
3.1.1 BH_4合成限速酶基因在脂质积累过程中调控规律 | 第25页 |
3.1.2 BH_4合成抑制剂对高山被孢霉脂质积累的影响 | 第25-26页 |
3.1.3 过表达BH_4合成限速酶基因对高山被孢霉脂质积累的影响 | 第26-30页 |
3.2 过表达GTPCH基因对高山被孢霉BH_4水平的影响 | 第30-32页 |
3.2.1 过表达GTPCH基因对BH_4水平的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 过表达GTPCH基因对叶酸水平的影响 | 第31-32页 |
3.3 BH_4对高山被孢霉脂质合成代谢通路的影响 | 第32-40页 |
3.3.1 BH_4对苯丙氨酸代谢的调控 | 第32-34页 |
3.3.2 BH_4对一氧化氮合成途径的调控 | 第34-37页 |
3.3.3 BH_4对高山被孢霉脂质合成还原力的影响 | 第37-40页 |
主要结论与展望 | 第40-42页 |
主要结论 | 第40页 |
展望 | 第40-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-51页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |