| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 苹果酒是苹果精深加工发展的趋势 | 第13-16页 |
| 1.1.1 苹果产业的发展现状及问题 | 第13-14页 |
| 1.1.2 苹果酒产业的兴起与发展现状 | 第14-16页 |
| 1.2 苹果酒产业现存的问题 | 第16-18页 |
| 1.2.1 专用苹果酒发酵菌种缺少 | 第16-17页 |
| 1.2.2 缺少苹果酒酿造专用苹果品种 | 第17-18页 |
| 1.3 苹果酒产业现存问题的解决途径 | 第18-23页 |
| 1.4 主要研究方法 | 第23-25页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第25-26页 |
| 1.6 研究的主要技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 苹果酒酵母BAT2基因敲除 | 第27-59页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第27-28页 |
| 2.1.2 工具酶和试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 缓冲液和其他试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第29页 |
| 2.1.5 培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.6 引物 | 第30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-40页 |
| 2.2.1 苹果酒酵母38号菌株BAT2基因克隆、测序 | 第30-31页 |
| 2.2.2 苹果酒酵母38号菌株单倍体的制备、筛选及验证 | 第31-32页 |
| 2.2.3 质粒、载体和目的片段DNA的扩增方法 | 第32-33页 |
| 2.2.4 传统基因敲除法构建BAT2基因敲除组件 | 第33-38页 |
| 2.2.5 SFH-PCR法构建BAT2基因敲除组件 | 第38-39页 |
| 2.2.6 苹果酒酵母38号菌株单倍体BAT2基因的敲除 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-58页 |
| 2.3.1 苹果酒酵母38号菌株BAT2基因克隆及测序结果与分析 | 第40-43页 |
| 2.3.2 苹果酒酵母38号菌株单倍体的筛选及验证结果与分析 | 第43-45页 |
| 2.3.3 传统基因敲除法构建BAT2基因敲除组件的结果与分析 | 第45-52页 |
| 2.3.4 短侧翼同源区PCR介导法构建基因敲除组件 | 第52-53页 |
| 2.3.5 酵母菌的转化及转化菌株的筛选、鉴定结果与分析 | 第53-58页 |
| 2.4 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 BAT2基因及亮氨酸和异亮氨酸添加量对两种氨基酸分解代谢速率的影响 | 第59-77页 |
| 3.1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 3.1.1 试剂与材料 | 第59页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第59-60页 |
| 3.1.3 方法 | 第60-62页 |
| 3.2 结果与分析 | 第62-76页 |
| 3.2.1 38号苹果酒酵母及其BAT2基因敲除酵母的生长曲线 | 第62-63页 |
| 3.2.2 不同浓度亮氨酸或异亮氨酸添加量下氨基酸消耗 | 第63-74页 |
| 3.2.3 两种菌在高浓度亮氨酸或异亮氨酸条件下的透射电镜结果 | 第74-76页 |
| 3.3 小结 | 第76-77页 |
| 第四章 BAT2基因、异亮氨酸或亮氨酸添加量对发酵产物中香气成分的影响 | 第77-126页 |
| 4.1 材料与方法 | 第77-78页 |
| 4.1.1 材料与仪器 | 第77-78页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第78页 |
| 4.2 结果与分析 | 第78-124页 |
| 4.2.1 发酵代谢物种类的鉴定 | 第78-81页 |
| 4.2.2 挥发性代谢产物GC-MS分析 | 第81-124页 |
| 4.3 小结 | 第124-126页 |
| 第五章 异亮氨酸与亮氨酸添加及BAT2基因敲除对苹果酒酵母支链转氨酶活性的影响 | 第126-133页 |
| 5.1 材料与方法 | 第126-129页 |
| 5.1.1 菌种及培养基 | 第126页 |
| 5.1.2 试剂 | 第126-127页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第127页 |
| 5.1.4 试验方法 | 第127-129页 |
| 5.2 结果与分析 | 第129-132页 |
| 5.2.1 α-酮酸异己酸与 2,4-二硝基苯肼形成的显色物质的最大吸收波长值及标准曲线 | 第129-131页 |
| 5.2.2 不同亮氨酸浓度的培养基在不同菌种发酵时支链氨基酸转氨酶活测定及比较 | 第131-132页 |
| 5.3 小结 | 第132-133页 |
| 第六章 亮氨酸和异亮氨酸添加量及BAT2基因对苹果酒酵母葡萄糖消耗量的影响 | 第133-140页 |
| 6.1 材料与方法 | 第133-135页 |
| 6.1.1 试剂及仪器 | 第133页 |
| 6.1.2 试验方法 | 第133-135页 |
| 6.2 结果与分析 | 第135-139页 |
| 6.2.1 DNS法测定葡萄糖的优化 | 第135-137页 |
| 6.2.2 发酵液葡萄糖消耗的检测结果 | 第137-139页 |
| 6.3 小结 | 第139-140页 |
| 第七章 结论与展望 | 第140-142页 |
| 7.1 结论 | 第140-141页 |
| 7.2 创新点 | 第141页 |
| 7.3 展望 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-152页 |
| 附录 | 第152-186页 |
| 致谢 | 第186-187页 |
| 作者简介 | 第187页 |
