| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第16-30页 |
| 1.1 类胡萝卜素 | 第16-23页 |
| 1.1.1 类胡萝卜素理化性质及药理作用 | 第16-17页 |
| 1.1.2 类胡萝卜素生产方法 | 第17-18页 |
| 1.1.3 类胡萝卜素合成途径 | 第18-23页 |
| 1.2 甲羟戊酸途径 | 第23-25页 |
| 1.3 carRA基因双功能酶简介 | 第25-26页 |
| 1.4 表达系统的选择 | 第26-27页 |
| 1.5 类胡萝卜素的研究现状及本课题研究意义 | 第27-30页 |
| 第二章 产β-胡萝卜素酿酒酵母重组菌的获得 | 第30-46页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-32页 |
| 2.2.1 菌种及载体 | 第30页 |
| 2.2.2 培养基 | 第30-31页 |
| 2.2.3 试剂及试剂盒 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第34-35页 |
| 2.3.2 质粒提取 | 第35页 |
| 2.3.3 PCR反应 | 第35-36页 |
| 2.3.4 连接反应 | 第36页 |
| 2.3.5 转化方法 | 第36-37页 |
| 2.3.6 β-胡萝卜素的萃取 | 第37页 |
| 2.3.7 液相检测条件 | 第37页 |
| 2.4 分析方法 | 第37-38页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第38-45页 |
| 2.5.1 基因片段的扩增和载体的提取 | 第38-39页 |
| 2.5.2 片段和载体的酶切回收结果 | 第39页 |
| 2.5.3 重组质粒的验证 | 第39-41页 |
| 2.5.4 gal1-carRA,carB-cycl,gal1-ggps-cyc1片段的获得 | 第41页 |
| 2.5.5 pyAB重组质粒的验证 | 第41-42页 |
| 2.5.6 pyGAB重组质粒的验证 | 第42-43页 |
| 2.5.7 获得产β-胡萝卜素酿酒酵母重组菌 | 第43-44页 |
| 2.5.8 β-胡萝卜素检测 | 第44-45页 |
| 2.6 本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 过表达ipi,ggps,thmgr重组菌的获得 | 第46-62页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.2.1 菌种及载体 | 第46页 |
| 3.2.2 培养基 | 第46页 |
| 3.2.3 试剂及试剂盒 | 第46-47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-50页 |
| 3.3.1 引物设计 | 第50页 |
| 3.3.2 基因组提取 | 第50页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第50-60页 |
| 3.4.1 tHMGR基因的获得 | 第50-53页 |
| 3.4.2 pYES2-tHMGR,pYES2-ipi重组质粒的获得 | 第53-55页 |
| 3.4.3 prG重组载体的获得 | 第55-56页 |
| 3.4.4 prGI重组载体的获得 | 第56-58页 |
| 3.4.5 prGIT重组载体的获得 | 第58-59页 |
| 3.4.6 获得酿酒酵母重组菌 | 第59-60页 |
| 3.5 本章小结 | 第60-62页 |
| 第四章 重组菌的发酵 | 第62-68页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 实验材料 | 第62页 |
| 4.2.1 菌种 | 第62页 |
| 4.2.2 培养基 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第62-66页 |
| 4.4.1 pyGAB重组菌发酵结果 | 第63-64页 |
| 4.4.2 pyAB/prG重组菌发酵结果 | 第64-65页 |
| 4.4.3 pyAB/prGI重组菌发酵结果 | 第65页 |
| 4.4.4 pyAB/prGIT重组菌发酵结果 | 第65-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 第五章 carRA双功能结构拆分的研究 | 第68-78页 |
| 5.1 引言 | 第68页 |
| 5.2 实验材料 | 第68页 |
| 5.2.1 菌种及载体 | 第68页 |
| 5.2.2 培养基 | 第68页 |
| 5.3 实验方法 | 第68-70页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第70-76页 |
| 5.4.1 基因片段的扩增 | 第70-71页 |
| 5.4.2 pYES2-carRA-A,pYES2-carRA-A-mt重组载体的验证 | 第71-72页 |
| 5.4.3 获得基因,启动子片段 | 第72-73页 |
| 5.4.4 pyBRA-A,pyBRA-A-mt重组载体的获得 | 第73-74页 |
| 5.4.5 转化 | 第74-76页 |
| 5.5 本章小结 | 第76-78页 |
| 第六章 创新点、结论及展望 | 第78-80页 |
| 6.1 创新点 | 第78页 |
| 6.2 结论及展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 附录 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第90-92页 |
| 作者和导师简介 | 第92-93页 |
| 附件 | 第93-94页 |
