酿酒酵母蛋白Sfi1p在产孢过程中功能研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| ·酿酒酵母纺锤体极体（SPB） | 第9-18页 |
| ·SPB 的结构 | 第9-11页 |
| ·SPB 的复制 | 第11页 |
| ·SPB 的蛋白组成 | 第11-16页 |
| ·SPB 的功能 | 第16-18页 |
| ·酿酒酵母纺锤体极体(SPB)蛋白组分Sfi1p | 第18-23页 |
| ·Sfi1p 的研究进展 | 第20-22页 |
| ·本课题的研究思路 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-41页 |
| ·实验材料 | 第23-29页 |
| ·质粒、菌株与引物 | 第23-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25页 |
| ·药品与试剂 | 第25-27页 |
| ·培养基 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第29-30页 |
| ·小规模提取大肠杆菌质粒法（CTAB 法） | 第30页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第30-31页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA 片段 | 第31-32页 |
| ·DNA 的连接反应 | 第32页 |
| ·PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·错误倾向PCR 反应 | 第33-34页 |
| ·定点诱变PCR 技术 | 第34-36页 |
| ·酵母菌转化方法 | 第36-37页 |
| ·从酵母中回收质粒 | 第37-38页 |
| ·PCR 法验证酵母交配型 | 第38页 |
| ·HO 质粒法构建二倍体细胞 | 第38-39页 |
| ·基因的等位置换法 | 第39-40页 |
| ·酵母高效产孢法 | 第40-41页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第41-62页 |
| ·SFI1 温度敏感突变等位基因的构建 | 第41-48页 |
| ·错误倾向PCR | 第41-43页 |
| ·酵母细胞内的质粒缺口修复及突变菌株的筛选 | 第43-45页 |
| ·SFI1 等位基因突变区域的限定 | 第45-46页 |
| ·SFI1 温度敏感突变等位基因的测序 | 第46-48页 |
| ·SFI1 基因的定点诱变 | 第48页 |
| ·SFI1 温度敏感突变等位基因的整合 | 第48-52页 |
| ·整合型质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·等位置换法整合等位基因 | 第49-51页 |
| ·菌株温度敏感表型的验证 | 第51-52页 |
| ·SFI1 温度敏感突变菌株中微管与细胞核的观察 | 第52-57页 |
| ·观察条件 | 第52页 |
| ·统计观察结果 | 第52-54页 |
| ·单个arrest 细胞的观察结果 | 第54-57页 |
| ·Sfi1p 蛋白突变对产孢过程影响的初步研究 | 第57-62页 |
| ·二倍体菌株的构建 | 第57页 |
| ·产孢条件 | 第57-58页 |
| ·产孢效率分析 | 第58-59页 |
| ·孢子组成分析 | 第59-62页 |
| 结论与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
