中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
目录 | 第8-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 综述 弯曲菌检测技术研究进展 | 第11-20页 |
1 传统的检测方法 | 第11-13页 |
·基于生化反应的常规检测方法 | 第11-12页 |
·MPN法 | 第12-13页 |
·平板菌落计数法 | 第13页 |
·螺旋接种法 | 第13页 |
2 免疫学检测方法 | 第13-14页 |
3 分子生物学检测方法 | 第14-18页 |
·核酸探针检测技术 | 第14页 |
·NASBA技术 | 第14-15页 |
·DNA环介导恒温扩增技术 | 第15页 |
·PCR技术 | 第15-18页 |
·常规PCR方法 | 第15页 |
·多重PCR方法 | 第15页 |
·PCR-ELISA方法 | 第15-16页 |
·巢式PCR方法 | 第16页 |
·磁捕获-PCR方法 | 第16页 |
·荧光定量PCR方法 | 第16-18页 |
4 展望 | 第18-20页 |
第二章 弯曲菌real-time PCR技术的建立及多种定量检测方法的比较 | 第20-44页 |
1 材料 | 第20-22页 |
·仪器与试剂 | 第20-21页 |
·菌株 | 第21页 |
·分子生物学软件 | 第21页 |
·鸡肉淋洗样品采集与处理 | 第21页 |
·鸡肉擦拭样品采集与处理 | 第21-22页 |
·鸡肛拭样品采集与处理 | 第22页 |
2 方法 | 第22-30页 |
·弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第22-25页 |
·引物、探针的设计与合成 | 第22页 |
·荧光定量PCR反应体系 | 第22页 |
·标准曲线的制备 | 第22-23页 |
·特异性试验 | 第23页 |
·灵敏性试验 | 第23页 |
·重复性试验 | 第23页 |
·模板DNA制备 | 第23-25页 |
·模拟样品弯曲菌DNA回收效率试验 | 第25页 |
·选择性CCDA平板菌落计数法 | 第25-26页 |
·选择性CCDA平板定量检测方法 | 第25-26页 |
·选择性CCDA平板定量检测方法的优化 | 第26页 |
·Karmali平板菌落计数法 | 第26-27页 |
·试剂和选择性培养基Karmali的配制 | 第26-27页 |
·可疑弯曲菌菌落形态 | 第27页 |
·弯曲菌鉴定 | 第27-29页 |
·平板菌落计数法弯曲菌鉴定 | 第27-28页 |
·国标方法鉴定弯曲菌 | 第28-29页 |
·real-time PCR法、选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测整鸡淋洗样品中弯曲菌的比较 | 第29页 |
·real-time PCR法与选择性CCDA平板菌落计数法检测鸡肉擦拭和肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第29-30页 |
·选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测鸡肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第30页 |
3 结果 | 第30-39页 |
·弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第30-34页 |
·实时荧光定量PCR标准曲线的制备 | 第30-31页 |
·实时荧光定量PCR的特异性试验 | 第31页 |
·实时荧光定量PCR的灵敏度试验 | 第31-32页 |
·实时荧光定量PCR的重复性试验 | 第32页 |
·DNA模板的制备 | 第32-33页 |
·模拟样品弯曲菌DNA回收效率试验 | 第33-34页 |
·弯曲菌选择性CCDA平板定量检测方法的优化 | 第34-35页 |
·不同浓度抗生素CCDA培养基分离禽肉中弯曲菌的效果比较 | 第34-35页 |
·弯曲菌定量检测方法计数的吻合度 | 第35页 |
·real-time PCR法、选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测整鸡淋洗样品中弯曲菌的比较 | 第35-36页 |
·real-time PCR法与选择性CCDA平板菌落计数法检测鸡肉擦拭和肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第36-38页 |
·选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测鸡肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
致谢 | 第47-48页 |