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弯曲菌real-time PCR技术的建立及多种定量检测方法的比较

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-10页
符号说明第10-11页
第一章 综述 弯曲菌检测技术研究进展第11-20页
 1 传统的检测方法第11-13页
   ·基于生化反应的常规检测方法第11-12页
   ·MPN法第12-13页
   ·平板菌落计数法第13页
   ·螺旋接种法第13页
 2 免疫学检测方法第13-14页
 3 分子生物学检测方法第14-18页
   ·核酸探针检测技术第14页
   ·NASBA技术第14-15页
   ·DNA环介导恒温扩增技术第15页
   ·PCR技术第15-18页
     ·常规PCR方法第15页
     ·多重PCR方法第15页
     ·PCR-ELISA方法第15-16页
     ·巢式PCR方法第16页
     ·磁捕获-PCR方法第16页
     ·荧光定量PCR方法第16-18页
 4 展望第18-20页
第二章 弯曲菌real-time PCR技术的建立及多种定量检测方法的比较第20-44页
 1 材料第20-22页
   ·仪器与试剂第20-21页
   ·菌株第21页
   ·分子生物学软件第21页
   ·鸡肉淋洗样品采集与处理第21页
   ·鸡肉擦拭样品采集与处理第21-22页
   ·鸡肛拭样品采集与处理第22页
 2 方法第22-30页
   ·弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立第22-25页
     ·引物、探针的设计与合成第22页
     ·荧光定量PCR反应体系第22页
     ·标准曲线的制备第22-23页
     ·特异性试验第23页
     ·灵敏性试验第23页
     ·重复性试验第23页
     ·模板DNA制备第23-25页
     ·模拟样品弯曲菌DNA回收效率试验第25页
   ·选择性CCDA平板菌落计数法第25-26页
     ·选择性CCDA平板定量检测方法第25-26页
     ·选择性CCDA平板定量检测方法的优化第26页
   ·Karmali平板菌落计数法第26-27页
     ·试剂和选择性培养基Karmali的配制第26-27页
     ·可疑弯曲菌菌落形态第27页
   ·弯曲菌鉴定第27-29页
     ·平板菌落计数法弯曲菌鉴定第27-28页
     ·国标方法鉴定弯曲菌第28-29页
   ·real-time PCR法、选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测整鸡淋洗样品中弯曲菌的比较第29页
   ·real-time PCR法与选择性CCDA平板菌落计数法检测鸡肉擦拭和肛拭样品中弯曲菌的比较第29-30页
   ·选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测鸡肛拭样品中弯曲菌的比较第30页
 3 结果第30-39页
   ·弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立第30-34页
     ·实时荧光定量PCR标准曲线的制备第30-31页
     ·实时荧光定量PCR的特异性试验第31页
     ·实时荧光定量PCR的灵敏度试验第31-32页
     ·实时荧光定量PCR的重复性试验第32页
     ·DNA模板的制备第32-33页
     ·模拟样品弯曲菌DNA回收效率试验第33-34页
   ·弯曲菌选择性CCDA平板定量检测方法的优化第34-35页
     ·不同浓度抗生素CCDA培养基分离禽肉中弯曲菌的效果比较第34-35页
     ·弯曲菌定量检测方法计数的吻合度第35页
   ·real-time PCR法、选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测整鸡淋洗样品中弯曲菌的比较第35-36页
   ·real-time PCR法与选择性CCDA平板菌落计数法检测鸡肉擦拭和肛拭样品中弯曲菌的比较第36-38页
   ·选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测鸡肛拭样品中弯曲菌的比较第38-39页
 4 讨论第39-44页
参考文献第44-47页
致谢第47-48页

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