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蝉拟青霉发酵产胞外多糖的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第10-17页
    1.1 蝉花简介第10页
        1.1.1 蝉花的形态特征第10页
        1.1.2 蝉花的应用历史及现状第10页
    1.2 蝉花的生物活性物质第10-12页
        1.2.1 多糖类第10-11页
        1.2.2 核苷类物质第11页
        1.2.3 虫草酸第11页
        1.2.4 多球壳菌素第11-12页
        1.2.5 麦角甾醇及其过氧化物第12页
        1.2.6 酶类第12页
    1.3 蝉花的药理作用第12-13页
        1.3.1 治疗肾病、改善肾功能的作用第12页
        1.3.2 抗肿瘤作用第12-13页
        1.3.3 免疫调节作用第13页
        1.3.4 降低血压、血脂作用第13页
        1.3.5 镇静催眠作用第13页
    1.4 蝉拟青霉的发酵研究第13-14页
    1.5 蝉拟青霉多糖的研究概况第14-16页
        1.5.1 蝉拟青霉多糖的液体发酵第14页
        1.5.2 蝉拟青霉多糖的提取第14-15页
        1.5.3 蝉拟青霉多糖的分离纯化第15页
        1.5.4 蝉拟青霉多糖结构的初级分析第15-16页
    1.6 研究目的及意义第16页
    1.7 主要研究内容第16-17页
第二章 材料与方法第17-28页
    2.1 实验材料第17-18页
        2.1.1 实验菌株第17页
        2.1.2 主要材料及试剂第17页
        2.1.3 培养基及主要溶液第17-18页
        2.1.4 主要实验仪器第18页
    2.2 菌体培养方法第18页
    2.3 液体发酵培养基及培养条件优化第18-20页
        2.3.1 生物量及多糖含量测定第18-19页
        2.3.2 碳源对蝉拟青霉发酵的影响第19页
        2.3.3 氮源对蝉拟青霉发酵的影响第19页
        2.3.4 无机盐对蝉拟青霉发酵多糖的影响第19页
        2.3.5 正交实验第19-20页
        2.3.6 温度对蝉拟青霉发酵多糖的影响第20页
        2.3.7 转速对蝉拟青霉发酵多糖的影响第20页
        2.3.8 接种量对蝉拟青霉发酵多糖的影响第20页
        2.3.9 装液量对蝉拟青霉发酵多糖的影响第20页
    2.4 小型发酵罐实验第20-21页
        2.4.1 分析方法第20-21页
        2.4.2 分批发酵中不同初糖浓度对蝉拟青霉发酵的影响第21页
        2.4.3 补料分批发酵对蝉拟青霉发酵的影响第21页
    2.5 多糖的分离纯化第21-22页
        2.5.1 蝉拟青霉胞外粗多糖的提取第21页
        2.5.2 Sevag法除蛋白第21-22页
        2.5.3 DEAE阴离子交换层析第22页
        2.5.4 SephacrylS-300HR凝胶过滤层析第22页
        2.5.5 紫外光谱分析第22页
    2.6 多糖的组分及性质分析第22-24页
        2.6.1 单糖组成分析第22-23页
        2.6.2 多糖分子量测定第23页
        2.6.3 总糖含量测定第23页
        2.6.4 糖醛酸含量测定第23-24页
        2.6.5 蛋白质含量测定第24页
    2.7 多糖的初步结构分析第24-25页
        2.7.1 红外光谱分析第24-25页
        2.7.2 甲基化分析第25页
    2.8 多糖失水率测定及抗氧化能力测定第25-26页
        2.8.1 多糖失水率测定第25页
        2.8.2 供试品溶液的制备第25-26页
        2.8.3 DPPH自由基的清除能力测定第26页
        2.8.4 ·OH自由基的清除能力测定第26页
        2.8.5 还原力的测定第26页
    2.9 胞内虫草酸的测定第26-28页
        2.9.1 溶剂配置方法第26页
        2.9.2 标准曲线的制备:第26-27页
        2.9.3 样品测定第27-28页
第三章 结果与分析第28-45页
    3.1 蝉拟青霉液体发酵培养基及培养条件的优化第28-34页
        3.1.1 碳源筛选实验第28-29页
        3.1.2 氮源筛选实验第29页
        3.1.3 无机盐浓度对胞外多糖产量和生物量的影响第29-30页
        3.1.4 正交试验结果第30-31页
        3.1.5 温度对蝉拟青霉发酵的影响第31-32页
        3.1.6 转速对蝉拟青霉发酵的影响第32页
        3.1.7 接种量对蝉拟青霉发酵的影响第32-33页
        3.1.8 装液量对蝉拟青霉发酵的影响第33-34页
    3.2 小型发酵罐扩大培养第34-37页
        3.2.1 蝉拟青霉菌体的生长曲线第34页
        3.2.2 不同初糖浓度对菌体生物量的影响第34-35页
        3.2.3 不同初糖浓度对胞外多糖含量的影响第35页
        3.2.4 不同初糖浓度的残糖变化第35-36页
        3.2.5 补料分批发酵第36-37页
    3.3 胞外多糖的分离纯化第37-38页
        3.3.1 DEAE阴离子交换层析第37页
        3.3.2 凝胶过滤层析第37-38页
        3.3.3 紫外光谱分析第38页
    3.4 多糖的组分分析第38-40页
        3.4.1 单糖组成分析第38-40页
        3.4.2 分子量及组分分析第40页
    3.5 多糖初步结构分析第40-42页
        3.5.1 红外光谱分析第40-41页
        3.5.2 甲基化分析第41-42页
    3.6 失水率测定及抗氧化能力测定第42-44页
        3.6.1 失水率测定第42页
        3.6.2 DPPH自由基清除能力测定第42-43页
        3.6.3 ·OH自由基的清除能力测定第43页
        3.6.4 还原力的测定第43-44页
    3.7 胞内虫草酸含量检测第44-45页
主要结论与展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-51页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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