| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 大肠杆菌O157:H7的概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 大肠杆菌O157:H7的生理生化指标 | 第10-11页 |
| 1.1.2 大肠杆菌O157:H7的分布情况 | 第11-12页 |
| 1.1.3 大肠杆菌O157:H7的灭活 | 第12-13页 |
| 1.2 大肠杆菌O157:H7检测及分离方法 | 第13-18页 |
| 1.2.1 富集及分离方法 | 第13-15页 |
| 1.2.2 检测技术 | 第15-18页 |
| 1.3 大肠杆菌O157:H7在猪肉中的分离及鉴定 | 第18-19页 |
| 1.4 本文研究内容及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条的研制及优化 | 第20-34页 |
| 摘要 | 第20-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂和仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.3 实验相关试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 胶体金的制备及表征 | 第22页 |
| 2.2.2 胶体金标记大肠杆菌O157:H7单抗 | 第22-23页 |
| 2.2.3 组装大肠杆菌O157:H7试纸条 | 第23页 |
| 2.2.4 大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条评价 | 第23-24页 |
| 2.2.5 大肠杆菌O157:H7免疫磁珠捕获大体积菌液的研究 | 第24页 |
| 2.2.6 免疫磁珠捕获结合胶体金免疫层析试纸条灵敏度测定 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-32页 |
| 2.3.1 胶体金粒径表征 | 第25-26页 |
| 2.3.2 胶体金标记时封闭条件的选择 | 第26-27页 |
| 2.3.3 选择最佳粒径的胶体金用于标记抗体，并制备大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条 | 第27-28页 |
| 2.3.4 大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条评价结果 | 第28-32页 |
| 2.3.5 磁珠捕获大体系结果研究 | 第32页 |
| 2.4 结论 | 第32-34页 |
| 第三章 检测猪肉中的大肠杆菌O157:H7 | 第34-47页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第34-35页 |
| 3.1.2 实验器材和设备 | 第35页 |
| 3.1.3 实验相关试剂的配制 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 猪肉样品的获取 | 第36-37页 |
| 3.2.2 选择性前增菌 | 第37-38页 |
| 3.2.3 大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条检测 | 第38页 |
| 3.2.4 科玛嘉显色平板划线分离确定 | 第38页 |
| 3.2.5 分离的单菌落富集培养 | 第38页 |
| 3.2.6 对分离出来的不同菌株进行API20E生理生化鉴定试验 | 第38-39页 |
| 3.2.7 对分离出来的单菌落杂菌液体培养富集 | 第39页 |
| 3.2.8 对培养基的配方进行调配，以使其成为一套适用于胶体金试纸条检测的前增菌培养基 | 第39页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第39-46页 |
| 3.3.1 国标法确定猪肉样品性质 | 第39-40页 |
| 3.3.2 mEC肉汤前增菌实验 | 第40-41页 |
| 3.3.3 分离出能导致大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条显色的杂菌 | 第41页 |
| 3.3.4 菌种鉴定 | 第41-44页 |
| 3.3.5 改良麦康凯肉汤(CT-SMC)前增菌实验 | 第44-45页 |
| 3.3.6 对改进了的大肠杆菌O157:H7前增菌方法进行评价 | 第45-46页 |
| 3.4 结论 | 第46-47页 |
| 第四章 使用两种胶体金叠加信号模式提高大肠杆菌O157:H7免疫层析试纸条的灵敏度 | 第47-63页 |
| 摘要 | 第47页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第47页 |
| 4.1.2 实验器材和设备 | 第47-48页 |
| 4.1.3 实验相关试剂的配制 | 第48页 |
| 4.2 实验内容 | 第48-51页 |
| 4.2.1 制备不同粒径的胶体金 | 第48页 |
| 4.2.2 标记胶体金 | 第48-49页 |
| 4.2.3 组装试纸条 | 第49页 |
| 4.2.4 四种不同模式的试纸条上的反应 | 第49-51页 |
| 4.2.5 信号放大胶体金试纸条的性能评价 | 第51页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第51-62页 |
| 4.3.1 不同粒径胶体金的制备 | 第51-53页 |
| 4.3.2 传统的两种大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条灵敏度研究 | 第53页 |
| 4.3.3 直接法和间接法的放大信号的大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条灵敏度研究 | 第53-57页 |
| 4.3.4 细化这两种最佳信号放大试纸条在增强灵敏度上的能力 | 第57-60页 |
| 4.3.5 对直接法及间接法放大信号的大肠杆菌O157:H7胶体金试纸条的特异性进行评价 | 第60-61页 |
| 4.3.6 对牛奶样品中的试纸条灵敏度进行评价 | 第61-62页 |
| 4.4 结论 | 第62-63页 |
| 第五章 结论和展望 | 第63-65页 |
| 5.1 结论 | 第63页 |
| 5.1.1 大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条的优化及免疫磁珠捕获大体系菌液的研究 | 第63页 |
| 5.1.2 猪肉中的大肠杆菌O157:H7的检测 | 第63页 |
| 5.1.3 放大信号的大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析试纸条的建立 | 第63页 |
| 5.2 展望 | 第63-65页 |
| 5.2.1 高亲和性且高灵敏度的大肠杆菌O157:H7单抗的制备 | 第63-64页 |
| 5.2.2 大肠杆菌O157:H7核酸试纸条的建立 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录1 菌种目录 | 第74-75页 |
| 附录2 仪器设备 | 第75-76页 |
| 附录3 试剂药品 | 第76-77页 |
| 个人介绍 | 第77页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第77页 |
