| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第11-12页 |
| 1.1.1 课题背景 | 第11-12页 |
| 1.1.2 研究目的和意义 | 第12页 |
| 1.2 乳酸菌抗菌肽的检测方法 | 第12-14页 |
| 1.2.1 琼脂扩散法 | 第13页 |
| 1.2.2 快速筛选产乳酸菌抗菌肽的方法 | 第13-14页 |
| 1.2.3 其他方法 | 第14页 |
| 1.3 乳酸菌抗菌肽提取取纯化方法的研究 | 第14-17页 |
| 1.3.1 抗菌肽粗提方法的研究 | 第15-16页 |
| 1.3.2 抗菌肽的中度纯化方法研究 | 第16页 |
| 1.3.3 高效液相色谱法精度纯化抗菌肽 | 第16-17页 |
| 1.4 乳酸菌抗菌肽抑菌活性的影响因素 | 第17-18页 |
| 1.5 本课题主要研究内容 | 第18-22页 |
| 1.5.1 实验方案与技术路线 | 第18-19页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第19-22页 |
| 第2章 材料和方法 | 第22-39页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第22-24页 |
| 2.1.1 菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.2 产抗菌肽乳酸菌的筛选 | 第24-25页 |
| 2.2.1 牛津杯琼脂扩散法筛选产抗菌肽乳酸菌 | 第24-25页 |
| 2.2.2 有机酸的排除实验 | 第25页 |
| 2.2.3 过氧化氢作用的排除实验 | 第25页 |
| 2.2.4 蛋白类抑菌物质的确定 | 第25页 |
| 2.3 产抗菌肽乳酸菌的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3.1 形态学观察 | 第25-26页 |
| 2.3.2 产抗菌肽乳酸菌的分子生物学 16S rDNA 鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 产抗菌肽乳酸菌的 API 生理生化鉴定 | 第27页 |
| 2.4 乳酸菌抗菌肽的分离纯化 | 第27-36页 |
| 2.4.1 抗菌肽抗菌活力测定 | 第27-29页 |
| 2.4.2 硫酸铵沉淀法和细胞吸附解析法粗提取抗菌肽 | 第29-30页 |
| 2.4.3 阳离子交换层析纯化抗菌肽 | 第30-31页 |
| 2.4.4 HiTrap Phenyl FF 疏水层析柱纯化抗菌肽 | 第31-32页 |
| 2.4.5 Superdex Peptide 10/300 GL 凝胶过滤层析纯化抗菌肽 | 第32-33页 |
| 2.4.6 高效液相色谱(HPLC)纯化抗菌肽 | 第33页 |
| 2.4.7 Tricine SDS-PAGE 初步判定抗菌肽的分子量 | 第33-35页 |
| 2.4.8 抗菌肽鉴定 | 第35-36页 |
| 2.5 抗菌肽 Lac-B23 特性的研究 | 第36-38页 |
| 2.5.1 菌株 Q 厌 L 生长曲线的测定 | 第36页 |
| 2.5.2 不同温度对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第36页 |
| 2.5.3 不同 pH 值对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第36-37页 |
| 2.5.4 不同蛋白酶对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第37页 |
| 2.5.5 金属离子对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第37页 |
| 2.5.6 Lac-B23 在脱脂乳中抑菌活性的变化 | 第37页 |
| 2.5.7 乙醇对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第37-38页 |
| 2.5.8 NaCl 对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第38页 |
| 2.6 数据统计与分析 | 第38-39页 |
| 第3章 产抗菌肽乳酸菌的筛选及鉴定 | 第39-47页 |
| 3.1 产抗菌肽乳酸菌的筛选 | 第39-42页 |
| 3.1.1 有机酸排除实验 | 第39-40页 |
| 3.1.2 过氧化氢排除实验 | 第40-41页 |
| 3.1.3 蛋白类物质的确定实验 | 第41-42页 |
| 3.2 产抗菌肽乳酸菌的鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2.1 形态学观察 | 第42页 |
| 3.2.2 产抗菌肽乳酸菌的分子生物学鉴定 | 第42-44页 |
| 3.3 产抗菌肽乳酸菌系统发育树的构建 | 第44页 |
| 3.4 产抗菌肽乳酸菌的 API 生理生化鉴定 | 第44-45页 |
| 3.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 第4章 乳酸菌抗菌肽的分离纯化 | 第47-64页 |
| 4.1 Pierce BCA Protein Assay Kit 法绘制的蛋白标准曲线 | 第47-48页 |
| 4.2 硫酸铵沉淀和细胞吸附解析法粗纯乳酸菌抗菌肽 | 第48-50页 |
| 4.2.1 硫酸铵沉淀法 | 第48-49页 |
| 4.2.2 细胞吸附解析法 | 第49-50页 |
| 4.3 阳离子交换柱层析法纯化乳酸菌抗菌肽 | 第50-57页 |
| 4.3.1 SP Sepherose Fast Flow 纯化 Lac-B23 | 第50-52页 |
| 4.3.2 不同纯化方式的效价比较 | 第52-55页 |
| 4.3.3 Tricine SDS-PAGE | 第55-57页 |
| 4.4 HiTrap Phenyl FF 疏水柱层析纯化抗菌肽 | 第57-58页 |
| 4.5 Superdex Peptide 10/300 GL 凝胶过滤纯化抗菌肽 | 第58-59页 |
| 4.6 高效液相色谱(HPLC)检测抗菌肽 | 第59-61页 |
| 4.7 抗菌肽鉴定（LC-MS） | 第61-62页 |
| 4.8 本章小结 | 第62-64页 |
| 第5章 乳酸菌抗菌肽的抗菌特性研究 | 第64-72页 |
| 5.1 植物乳杆菌的生长曲线及其抑菌活性的变化 | 第64-65页 |
| 5.2 热稳定性 | 第65页 |
| 5.3 酸碱稳定性 | 第65-66页 |
| 5.4 蛋白酶稳定性 | 第66-67页 |
| 5.5 金属离子对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第67-68页 |
| 5.6 Lac-B23 在脱脂乳中抑菌活性的变化 | 第68-69页 |
| 5.7 乙醇对 Lac-B23 抑菌活性的影响 | 第69页 |
| 5.8 不同浓度 NaCl 对 Lac-B23 的影响 | 第69-70页 |
| 5.9 本章小结 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
