| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第9-17页 |
| 1 大肠杆菌概况 | 第9-10页 |
| 1.1 大肠杆菌 | 第9页 |
| 1.2 产肠毒素性大肠杆菌 | 第9页 |
| 1.3 ETEC菌毛 | 第9页 |
| 1.4 E.coli K88菌的特性和危害 | 第9-10页 |
| 2 大肠杆菌的检测方法 | 第10-12页 |
| 2.1 传统检测方法 | 第10页 |
| 2.2 快速检测方法 | 第10-12页 |
| 2.2.1 PCR技术 | 第10-11页 |
| 2.2.2 ELISA法 | 第11页 |
| 2.2.3 免疫磁珠法 | 第11页 |
| 2.2.4 生物传感器 | 第11页 |
| 2.2.5 基因芯片技术 | 第11-12页 |
| 3 纳米金及其特性 | 第12-13页 |
| 3.1 纳米金 | 第12页 |
| 3.2 纳米金在食品检测中的应用 | 第12-13页 |
| 3.2.1 利用纳米金的聚集状态引起的颜色变化进行检测 | 第12-13页 |
| 3.2.2 利用纳米金作为免疫标记物的检测技术 | 第13页 |
| 4 适配体技术 | 第13-14页 |
| 4.1 适配体 | 第13-14页 |
| 4.2 适配体在快速检测中的应用 | 第14页 |
| 5 可视化银染技术 | 第14-15页 |
| 6 课题来源和研究内容及意义 | 第15-17页 |
| 6.1 课题来源 | 第15页 |
| 6.2 研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 6.3 检测原理及内容 | 第16-17页 |
| 第二章 纳米金及纳米金-巯基化适配体探针的制备 | 第17-28页 |
| 1 材料和仪器 | 第17-18页 |
| 1.1 主要材料与试剂 | 第17-18页 |
| 1.2 实验仪器 | 第18页 |
| 1.3 缓冲液 | 第18页 |
| 2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.1 纳米金的制备 | 第18页 |
| 2.1.1 玻璃器皿的洗涤 | 第18页 |
| 2.1.2 柠檬酸三钠还原法制备纳米金 | 第18页 |
| 2.2 制备纳米金条件的优化 | 第18-19页 |
| 2.2.1 加热方式对纳米金制备的影响 | 第18-19页 |
| 2.2.2 搅拌速度对纳米金制备的影响 | 第19页 |
| 2.2.3 加入还原剂后加热时间对纳米金制备的影响 | 第19页 |
| 2.3 纳米金贮存稳定性评价 | 第19页 |
| 2.4 纳米金的表征 | 第19页 |
| 2.4.1 肉眼观察 | 第19页 |
| 2.4.2 紫外可见光光谱扫描 | 第19页 |
| 2.4.3 电镜观察 | 第19页 |
| 2.5 纳米金-巯基化适配体的制备 | 第19-20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-26页 |
| 3.1 制备纳米金条件的优化 | 第20-21页 |
| 3.1.1 加热方式对纳米金制备的影响 | 第20页 |
| 3.1.2 搅拌速度对纳米金制备的影响 | 第20-21页 |
| 3.1.3 加热时间对纳米金制备的影响 | 第21页 |
| 3.2 纳米金贮存稳定性评价 | 第21-22页 |
| 3.3 纳米金的表征 | 第22-23页 |
| 3.4 纳米金修饰巯基化适配体制备过程的优化 | 第23-26页 |
| 4 本章小结 | 第26-28页 |
| 第三章 E.coli K88可视化检测方法的建立 | 第28-39页 |
| 1 材料与仪器 | 第28-30页 |
| 1.1 菌株 | 第28页 |
| 1.2 主要材料与试剂 | 第28-29页 |
| 1.3 实验仪器 | 第29页 |
| 1.4 主要试剂及培养基的配制 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.1 菌株的培养与计数 | 第30页 |
| 2.2 酶标板标记亲和素 | 第30页 |
| 2.3 适配体识别E. coli K88 | 第30-31页 |
| 2.4 银增强及其吸光值的检测 | 第31页 |
| 2.4.1 银增强溶液的配制 | 第31页 |
| 2.4.2 吸光值的检测 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-38页 |
| 3.1 链霉亲和素浓度的优化 | 第31-32页 |
| 3.2 Aptamer 2 浓度的优化 | 第32-33页 |
| 3.3 Aptamer 1 浓度的优化 | 第33-34页 |
| 3.4 适配体识别E. coli K88的最佳温度和时间 | 第34-35页 |
| 3.5 银染时间的影响 | 第35-36页 |
| 3.6 检测方法特异性的评价 | 第36-37页 |
| 3.7 定量检测分析 | 第37-38页 |
| 4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 E.coli K88可视化检测方法在食品中的初步应用 | 第39-49页 |
| 1 材料 | 第39-41页 |
| 1.1 实验原料 | 第39页 |
| 1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
| 1.3 实验仪器 | 第40页 |
| 1.4 缓冲溶液及培养基的配制 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-42页 |
| 2.1 E. coli K88人工接种模拟污染食品样品的制备 | 第41-42页 |
| 2.1.1 E. coli K88的培养及计数 | 第41页 |
| 2.1.2 E. coli K88人工模拟污染牛奶样品的制备 | 第41页 |
| 2.1.3 E. coli K88人工模拟污染猪肉样品的制备 | 第41页 |
| 2.1.4 E. coli K88人工模拟污染蔬菜样品的制备 | 第41-42页 |
| 2.2 E. coli K88人工接种模拟污染食品样品的检测 | 第42页 |
| 2.2.1 酶标板标记亲和素 | 第42页 |
| 2.2.2 适配体识别E. coli K88 | 第42页 |
| 2.2.3 银增强显色及其吸光度的检测 | 第42页 |
| 2.2.4 数据分析 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-48页 |
| 3.1 E. coli K88人工接种模拟污染牛奶样品的检测结果 | 第42-44页 |
| 3.2 E. coli K88人工接种模拟污染猪肉样品的检测结果 | 第44-46页 |
| 3.3 E. coli K88人工接种模拟污染蔬菜样品的检测结果 | 第46-48页 |
| 4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 总结与展望 | 第49-51页 |
| 1 总结 | 第49-50页 |
| 2 展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
