| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第16-24页 |
| 1.1 我国食品铅污染现状 | 第16页 |
| 1.2 食品中铅污染的来源 | 第16-17页 |
| 1.2.1 环境中的铅对食品原材料的污染 | 第16-17页 |
| 1.2.2 食品加工过程出现的铅污染 | 第17页 |
| 1.2.3 食品包装及盛放过程中出现的铅污染 | 第17页 |
| 1.3 铅的神经毒性及其可能机制 | 第17-18页 |
| 1.3.1 铅的神经毒性 | 第17-18页 |
| 1.3.2 铅神经毒性的可能机制 | 第18页 |
| 1.4 细胞自噬 | 第18-21页 |
| 1.4.1 自噬的分类及过程 | 第19页 |
| 1.4.2 自噬的研究方法 | 第19-21页 |
| 1.4.3 自噬与溶酶体的关系 | 第21页 |
| 1.4.4 自噬溶酶体通路与神经退行性疾病的关系 | 第21页 |
| 1.5 课题研究的背景、意义和主要内容 | 第21-24页 |
| 1.5.1 课题研究的背景和意义 | 第21-22页 |
| 1.5.2 课题研究的主要内容 | 第22页 |
| 1.5.3 实验路线图 | 第22-24页 |
| 第二章 铅暴露对细胞自噬溶酶体通路的影响 | 第24-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.2 主要药品与试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 主要抗体 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞存活率测定 | 第25-26页 |
| 2.2.3 WesternBlot(蛋白质免疫印迹法) | 第26-29页 |
| 2.2.4 Lipofectamine3000脂质体转染实验 | 第29-30页 |
| 2.2.5 GFP-LC3单荧光融合蛋白示踪 | 第30页 |
| 2.2.6 免疫细胞化学 | 第30-31页 |
| 2.3 数据分析 | 第31-32页 |
| 2.4 实验结果 | 第32-37页 |
| 2.4.1 不同浓度铅暴露对细胞存活率的影响 | 第32页 |
| 2.4.2 不同浓度铅暴露对细胞LC3-II蛋白的影响 | 第32-33页 |
| 2.4.3 铅暴露对细胞内自噬体的影响 | 第33-34页 |
| 2.4.4 铅暴露对细胞自噬流的影响 | 第34-36页 |
| 2.4.5 不同时间铅暴露对细胞自噬流的影响 | 第36页 |
| 2.4.6 去铅继续培养对铅暴露致细胞自噬流损伤的影响 | 第36-37页 |
| 2.5 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 铅暴露损伤自噬溶酶体通路的可能机理研究 | 第39-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第39页 |
| 3.1.2 主要药品与试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 主要抗体 | 第39页 |
| 3.1.4 所需引物 | 第39-40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-48页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 3.2.2 WesternBlot(蛋白质免疫印迹法) | 第40页 |
| 3.2.3 菌种培养方法 | 第40页 |
| 3.2.4 质粒提取方法 | 第40-41页 |
| 3.2.5 DNA切胶回收方法 | 第41-42页 |
| 3.2.6 质粒DNA转化方法 | 第42页 |
| 3.2.7 shRNA-ATG5质粒构建 | 第42-44页 |
| 3.2.8 Lipofectamine3000脂质体转染实验 | 第44页 |
| 3.2.9 GFP-LC3与LAMP1荧光共定位实验 | 第44-45页 |
| 3.2.10 细胞中RNA的提取 | 第45-46页 |
| 3.2.11 RNA反转录 | 第46页 |
| 3.2.12 荧光定量PCR | 第46-47页 |
| 3.2.13 LysoTrackerRed染色 | 第47页 |
| 3.2.14 LysoSensorGreenDND-189染色 | 第47-48页 |
| 3.3 数据分析 | 第48页 |
| 3.4 实验结果 | 第48-53页 |
| 3.4.1 铅暴露对细胞自噬起始相关蛋白Beclin1的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.2 铅暴露对细胞自噬体形成过程的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.3 铅暴露对细胞自噬体与溶酶体融合过程的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.4 铅暴露对细胞中Stx17,Vamp8和Snap-29的mRNA水平的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.5 铅暴露对细胞中溶酶体的影响 | 第52-53页 |
| 3.5 讨论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 硕士期间的学术活动及研究成果 | 第62-63页 |
