| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·大肠杆菌表达单链抗体片段的研究 | 第7-8页 |
| ·细菌的活着但不可培养状态研究进展 | 第8页 |
| ·大肠杆菌细胞自溶现象及机制的研究进展 | 第8-11页 |
| ·大肠杆菌工程菌细胞自溶现象 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌细胞自溶机制研究 | 第9-11页 |
| ·本论文研究意义和主要研究内容 | 第11-13页 |
| ·本论文的研究意义 | 第11-12页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-19页 |
| ·实验材料与试剂 | 第13-14页 |
| ·菌种与培养基 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13页 |
| ·主要仪器 | 第13-14页 |
| ·批次发酵标准操作 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-19页 |
| ·E. coli细胞自溶程度的定义 | 第14-15页 |
| ·两水平因素实验设计筛选影响摇瓶培养中细胞自溶的最显著因素 | 第15页 |
| ·OD600和细胞干重测定 | 第15页 |
| ·VBNC细胞数目的测定 | 第15-16页 |
| ·Real-Time RT-PCR检测基因mRNA表达水平 | 第16-18页 |
| ·酶联免疫分析法检测发酵液和菌体中可溶性ScFv含量 | 第18-19页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第19-38页 |
| ·VBNC细胞计数方法的建立 | 第19-21页 |
| ·不同CTC浓度对活细胞染色结果的影响 | 第19页 |
| ·不同CTC染色时间对活细胞染色结果的影响 | 第19-20页 |
| ·VBNC细胞计数方法 | 第20-21页 |
| ·筛选摇瓶中影响表达ScFv的E. coli工程菌细胞自溶的最显著过程参数 | 第21-24页 |
| ·五因素两水平因素实验设计及结果 | 第21-22页 |
| ·自溶程度结果的显著性分析 | 第22-23页 |
| ·自溶程度模型的方差分析结果 | 第23页 |
| ·小结 | 第23-24页 |
| ·生物反应器中E. coli工程菌ScFv的表达与细胞自溶的关联性分析 | 第24-30页 |
| ·ScFv的表达对E. coli工程菌自溶时间及自溶程度的影响 | 第24-25页 |
| ·ScFv的表达对E. coli工程菌细胞活性的影响 | 第25页 |
| ·ScFv的表达对热胁迫应激相关基因表达的影响 | 第25-26页 |
| ·ScFv的表达对酸胁迫应激相关基因表达的影响 | 第26-27页 |
| ·ScFv的表达对氧胁迫应激相关基因表达的影响 | 第27-28页 |
| ·ScFv的表达对自溶途径相关基因表达的影响 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| ·生物反应器中高温胁迫与表达ScFv的E. coli工程菌发酵过程中细胞自溶的关联性分析 | 第30-37页 |
| ·诱导前和诱导后的高温胁迫处理对工程菌细胞生长及自溶的影响 | 第30页 |
| ·诱导前和诱导后的高温胁迫处理对表达ScFv的大肠杆菌细胞活性的影响 | 第30-33页 |
| ·诱导前和诱导后的高温胁迫处理对表达ScFv的E. coli细胞外源蛋白表达分泌的影响 | 第33-35页 |
| ·诱导前和诱导后高温胁迫处理对表达ScFv E. coli细胞中相关基因表达的影响 | 第35-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |
