| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-14页 |
| ·核黄素概述 | 第8-9页 |
| ·核黄素理化性质 | 第8页 |
| ·核黄素的应用 | 第8-9页 |
| ·核黄素的生产 | 第9-10页 |
| ·核黄素的化学合成 | 第9页 |
| ·核黄素的生物合成 | 第9-10页 |
| ·生物法生产核黄素的国内外研究现状 | 第10-12页 |
| ·国外研究现状 | 第10-11页 |
| ·国内研究现状 | 第11-12页 |
| ·本课题立题背景和研究目的 | 第12-13页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第14-21页 |
| ·实验材料 | 第14-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·菌株与质粒 | 第14-15页 |
| ·引物 | 第15页 |
| ·培养基及培养条件 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-21页 |
| ·大肠杆菌E. coli JM109 感受态细胞的制备及转化 | 第16页 |
| ·枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1 染色体组的提取 | 第16页 |
| ·枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1 感受态细胞的制备及转化 | 第16-17页 |
| ·枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1 抗性实验 | 第17页 |
| ·重组抗性质粒pMA5-sat的构建及功能验证 | 第17页 |
| ·重组质粒pMA5-sat-zwf的构建 | 第17-18页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf的构建 | 第18页 |
| ·葡萄糖6磷酸脱氢酶SDS-PAGE和细胞蛋白浓度测定 | 第18页 |
| ·重组菌酶活测定 | 第18页 |
| ·核黄素含量的测定 | 第18页 |
| ·发酵液中葡萄糖和主要副产物含量的测定 | 第18页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf产核黄素摇瓶发酵优化 | 第18-20页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf发酵罐发酵及多级转速优化 | 第20-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-43页 |
| ·重组抗性质粒的构建及功能验证 | 第21-24页 |
| ·核黄素生产菌抗性实验 | 第21页 |
| ·链丝菌素乙酰基转移酶基因（sat）的克隆与分析 | 第21-22页 |
| ·抗性质粒pMA5-sat的构建 | 第22-23页 |
| ·抗性质粒pMA5-sat的功能验证 | 第23-24页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf的构建与表达 | 第24-27页 |
| ·葡萄糖6磷酸脱氢酶基因（zwf）的克隆与分析 | 第24页 |
| ·重组质粒pMA5-sat-zwf的构建 | 第24-26页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf的构建 | 第26页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf蛋白表达与SDS-PAGE分析 | 第26-27页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf的ZWF酶活测定 | 第27页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf的摇瓶发酵产核黄素分析 | 第27页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf发酵产核黄素培养基与培养条件优化 | 第27-39页 |
| ·核黄素标准曲线 | 第27-28页 |
| ·种子生长曲线和最佳种龄的确定 | 第28页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf发酵产核黄素培养基成分单因素优化 | 第28-34页 |
| ·正交实验设计优化培养基组分 | 第34-35页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf产核黄素发酵条件优化 | 第35-37页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf发酵罐产核黄素研究 | 第37-39页 |
| ·重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf发酵罐溶氧水平优化 | 第39-43页 |
| ·不同搅拌转速对重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf发酵产核黄素的影响 | 第39-41页 |
| ·多阶段转速调控提高重组菌B. subtilis RF1/pMA5-sat-zwf核黄素产量 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43页 |
| 展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录I：核苷酸序列 | 第51-52页 |
| 附录II：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
