| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 α-淀粉酶简介 | 第9-12页 |
| 1.1.1 α-淀粉酶特性 | 第9-10页 |
| 1.1.2 α-淀粉酶的应用 | 第10-11页 |
| 1.1.3 α-淀粉酶分子改造 | 第11-12页 |
| 1.2 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶(DPE)简介 | 第12-13页 |
| 1.2.1 稀少糖简介 | 第12页 |
| 1.2.2 D-阿洛酮糖与DPE | 第12-13页 |
| 1.3 B.subtilis表达系统 | 第13-14页 |
| 1.4 微生物发酵优化 | 第14-15页 |
| 1.5 总结与展望 | 第15页 |
| 1.6 本课题主要研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-34页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第16-22页 |
| 2.1.1 引物、菌种与质粒 | 第16-18页 |
| 2.1.2 培养基与试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.3 主要溶液 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.2.1 重组质粒构建方法 | 第22-25页 |
| 2.2.2 AmyL编码基因定点突变 | 第25-27页 |
| 2.2.3 基因敲除方法 | 第27-28页 |
| 2.2.4 菌株培养方法 | 第28-29页 |
| 2.2.5 分析方法 | 第29-32页 |
| 2.2.6 α-淀粉酶摇瓶发酵条件优化 | 第32页 |
| 2.2.7 α-淀粉酶发酵罐发酵条件优化 | 第32-33页 |
| 2.2.8 RDPE发酵条件优化 | 第33-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-52页 |
| 3.1 α-淀粉酶基因定点突变 | 第34-36页 |
| 3.1.1 提高酶活突变 | 第34页 |
| 3.1.2 改善酶学性质突变 | 第34-36页 |
| 3.2 α-淀粉酶摇瓶发酵条件优化 | 第36-40页 |
| 3.2.1 碳源优化 | 第36-37页 |
| 3.2.2 氮源优化 | 第37-38页 |
| 3.2.3 金属离子及添加剂对发酵的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.4 初始pH值及温度对发酵的影响 | 第39-40页 |
| 3.3 α-淀粉酶发酵罐发酵条件优化 | 第40-44页 |
| 3.3.1 溶氧对发酵的影响 | 第40-42页 |
| 3.3.2 pH对发酵的影响 | 第42页 |
| 3.3.3 补料对发酵的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.4 菌株1A751L以及1A751S发酵罐发酵 | 第43-44页 |
| 3.4 α-淀粉酶小结 | 第44-45页 |
| 3.5 RDPE发酵条件优化 | 第45-49页 |
| 3.5.1 溶氧对发酵的影响 | 第45-46页 |
| 3.5.2 pH对发酵的影响 | 第46-48页 |
| 3.5.3 基于pH值控制的分段式发酵 | 第48-49页 |
| 3.6 RDPE小结 | 第49页 |
| 3.7 B.subtilis底盘细胞改造 | 第49-52页 |
| 3.7.1 基因敲除 | 第50页 |
| 3.7.2 基因敲除后对菌株生长状况的影响 | 第50-51页 |
| 3.7.3 底盘细胞改造小结 | 第51-52页 |
| 4 结论 | 第52-53页 |
| 5 展望 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-61页 |
| 7 论文发表情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62页 |