| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·Γ-PGA的结构和性质 | 第10-12页 |
| ·γ-PGA的结构 | 第10页 |
| ·γ-PGA的性质 | 第10-12页 |
| ·Γ-PGA的制备 | 第12页 |
| ·化学法合成 | 第12页 |
| ·提取法合成 | 第12页 |
| ·微生物发酵合成法 | 第12页 |
| ·Γ-PGA相关基因 | 第12-14页 |
| ·γ-PGA合成酶相关基因 | 第12-14页 |
| ·γ-PGA水解酶相关基因 | 第14页 |
| ·Γ-PGA可能的合成机理 | 第14-18页 |
| ·底物谷氨酸的来源 | 第14-15页 |
| ·γ-PGA的聚合机制 | 第15-16页 |
| ·γ-PGA合成酶组分的功能 | 第16-17页 |
| ·γ-PGA的合成调控 | 第17-18页 |
| ·Γ-PGA的应用 | 第18-20页 |
| ·医药应用 | 第18-19页 |
| ·化妆用品与日用品 | 第19页 |
| ·农业应用 | 第19-20页 |
| ·其他应用 | 第20页 |
| ·本论文的研究内容及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-28页 |
| ·仪器与试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂及标准品 | 第22-23页 |
| ·培养基和培养条件 | 第23-24页 |
| ·主要培养基 | 第23页 |
| ·培养方法 | 第23-24页 |
| ·分析测定方法 | 第24-28页 |
| ·pH则定 | 第24页 |
| ·菌体量测定 | 第24页 |
| ·γ-PGA粗品的制备 | 第24-25页 |
| ·γ-PGA产量的测定方法 | 第25-26页 |
| ·FDNB法的建立 | 第26-28页 |
| 第三章 γ-PGA酸水解定量检测方法的改进 | 第28-40页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·菌种 | 第28-29页 |
| ·培养基和培养条件 | 第29页 |
| ·酸水解法的修正 | 第29-31页 |
| ·SBA与HPLC测定结果的相关性 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-38页 |
| ·初始酸水解法检B.SUBTILISZJUTZY转化生产Γ-PGA的产量结果 | 第31-32页 |
| ·改进醇沉后酸水解法检测BSUBTLISZJUTZY转化生产Γ-PGA的产量结果 | 第32-34页 |
| ·中和步骤中NAOH 添加量对酸水解法检测结果的影响 | 第34-36页 |
| ·改进前后酸水解法测定结果的对比 | 第36-37页 |
| ·SBA与HPLC测定Γ-PGA产量结果的相关性 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-40页 |
| 第四章 BACILLUS SUBTILISZJUTZY发酵产Γ-PGA 过程分子量分布研究 | 第40-53页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-47页 |
| ·菌种及培养基 | 第40-42页 |
| ·主要药品 | 第42-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·培养方法 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-52页 |
| ·发酵产γ-PGA 过程中不同时间点其产量及分子量分布的变化情况 | 第47-50页 |
| ·发酵产γ-PGA 过程中不同碳源对其产量及分子量分布的影响 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第五章 BACILLUS SUBTILISZJUTZYr对Γ-PGA的水解及水解酶基因YWTD 的克隆 | 第53-66页 |
| ·前言 | 第53-54页 |
| ·材料与方法 | 第54-59页 |
| ·菌种与质粒 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54页 |
| ·DNA操作工具酶和试剂盒 | 第54-55页 |
| ·抗生素 | 第55页 |
| ·PCR引物 | 第55页 |
| ·Bacillus subtilis ZJUTZY对γ-PGA的水解作用 | 第55页 |
| ·Bacillus subtilis ZJUTZY基因组的提取 | 第55-56页 |
| ·PCR反应扩增水解酶基因ywtD | 第56-57页 |
| ·DNA的检测 | 第57页 |
| ·琼脂糖电泳后所需DNA 片段的回收 | 第57页 |
| ·PCR 反应产物片断与pMD19-T vector的连接 | 第57-58页 |
| ·E.coli DH 5α感受态细胞的制备 | 第58页 |
| ·转化E.coli DH 5α感受态细胞 | 第58-59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-64页 |
| ·Bacillus subtilis ZJUTZY对γ-PGA的水解作用 | 第59-60页 |
| ·ywtD | 第60-64页 |
| ·PCR引物的设计 | 第60-62页 |
| ·ywtD部分基因片段的克隆 | 第62-63页 |
| ·ywtD部分基因片段的鉴定 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第六章 结论与展望 | 第66-68页 |
| ·论文的主要研究结论 | 第66-67页 |
| ·展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第75页 |
