| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-33页 |
| ·核黄素生物合成途径及关键酶 | 第16-18页 |
| ·关键酶的催化机制 | 第18-19页 |
| ·LS 的催化机制 | 第18页 |
| ·RS 的催化机制 | 第18-19页 |
| ·关键酶的晶体结构 | 第19-20页 |
| ·LS 的晶体结构 | 第19-20页 |
| ·RS 的晶体结构 | 第20页 |
| ·核黄素生物合成关键酶抑制剂的筛选模式 | 第20-22页 |
| ·底物参与反应的高通量筛选法 | 第20-21页 |
| ·以酶亲和力特性为基础的无底物参与的高通量筛选法 | 第21-22页 |
| ·高通量筛选法的优缺点 | 第22页 |
| ·近十年国内外核黄素生物合成关键酶抑制剂的研究进展 | 第22-27页 |
| ·ARAP 结构类似物 | 第22-24页 |
| ·LS 反应中间体类似物 | 第24-25页 |
| ·lumazine 类似物 | 第25-26页 |
| ·无结构相似性化合物 | 第26-27页 |
| ·论文选题意义及主要内容 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 第二章 核黄素生物合成抑制剂产生菌的活体筛选 | 第33-48页 |
| ·前言 | 第33-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-40页 |
| ·土样来源 | 第34-35页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·主要药品与试剂 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·假丝酵母的斜面培养 | 第37页 |
| ·假丝酵母的种子培养 | 第37-38页 |
| ·假丝酵母的发酵培养 | 第38页 |
| ·假丝酵母菌体的收集与洗涤 | 第38页 |
| ·核黄素标准溶液的配制 | 第38页 |
| ·土壤稀释液的制备 | 第38页 |
| ·土壤微生物的分离 | 第38页 |
| ·核黄素生物合成抑制剂产生菌的初筛方法 | 第38-39页 |
| ·24 孔板琼脂移块法 | 第38-39页 |
| ·平板琼脂移块法 | 第39页 |
| ·核黄素生物合成抑制剂产生菌的复筛方法 | 第39-40页 |
| ·发酵液预处理 | 第39页 |
| ·管碟法 | 第39页 |
| ·摇瓶发酵法 | 第39-40页 |
| ·发酵液菌体浓度和核黄素含量测定方法 | 第40页 |
| ·核黄素含量荧光测定法 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-46页 |
| ·假丝酵母利用外源核黄素能力的研究 | 第40-42页 |
| ·核黄素生物合成抑制剂产生菌的初筛 | 第42-43页 |
| ·核黄素生物合成抑制剂产生菌的复筛 | 第43-46页 |
| ·管碟法复筛 | 第43-44页 |
| ·摇瓶发酵复筛核黄素合成抑制剂产生菌 | 第44-46页 |
| ·本章小结 | 第46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 第三章 核黄素体外酶合成反应体系的构建 | 第48-60页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·菌株 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·主要药品与试剂 | 第49页 |
| ·假丝酵母培养基 | 第49-50页 |
| ·假丝酵母的培养 | 第50页 |
| ·假丝酵母粗酶液的提取 | 第50页 |
| ·菌体的收集和洗涤 | 第50页 |
| ·菌体的破碎 | 第50页 |
| ·荧光法检测核黄素浓度标准曲线绘制 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-58页 |
| ·荧光法检测核黄素浓度标准曲线绘制 | 第51页 |
| ·核黄素体外酶合成反应体系的构建 | 第51-54页 |
| ·反应体系中底物浓度的确定 | 第51-52页 |
| ·假丝酵母粗酶液的提取 | 第52页 |
| ·反应体系的构建 | 第52-54页 |
| ·体外酶反应条件的研究 | 第54-56页 |
| ·反应时间对体外酶合成核黄素的影响 | 第54页 |
| ·反应温度对体外酶合成核黄素的影响 | 第54-55页 |
| ·粗酶液储存时间对体外酶合成核黄素的影响 | 第55-56页 |
| ·菌株Q210 活性产物对酵母粗酶液体外合成核黄素的影响 | 第56-58页 |
| ·活性物质对核黄素的影响 | 第56-57页 |
| ·活性物质对酵母粗酶液体外合成核黄素的影响 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 第四章 菌株Q210 的分类鉴定 | 第60-75页 |
| ·前言 | 第60页 |
| ·材料与方法 | 第60-68页 |
| ·菌株 | 第60-61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·主要药品与试剂 | 第61-62页 |
| ·培养基 | 第62-64页 |
| ·菌株Q210 的斜面培养 | 第64页 |
| ·菌株Q210 的种子培养 | 第64页 |
| ·16S rDNA 鉴定 | 第64-66页 |
| ·传统鉴定 | 第66-68页 |
| ·形态观察 | 第66-67页 |
| ·生理生化鉴定 | 第67-68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-73页 |
| ·菌株Q210 16S rDNA 测序结果 | 第68-69页 |
| ·16S rDNA 序列对比及系统进化树的构建 | 第69-70页 |
| ·菌株Q210 的传统鉴定 | 第70-73页 |
| ·形态观察 | 第70-73页 |
| ·生理生化性状 | 第73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 第五章 菌株Q210 活性产物理化性质的研究 | 第75-86页 |
| ·前言 | 第75页 |
| ·材料与方法 | 第75-79页 |
| ·菌种 | 第75-76页 |
| ·主要仪器 | 第76页 |
| ·主要药品 | 第76页 |
| ·主要试剂 | 第76-77页 |
| ·培养基 | 第77页 |
| ·假丝酵母的培养 | 第77页 |
| ·菌株Q210 的种子培养 | 第77页 |
| ·菌株Q210 的发酵培养 | 第77-78页 |
| ·发酵上清滤液的制备 | 第78页 |
| ·菌体破碎上清滤液的制备 | 第78页 |
| ·活性物质测定方法 | 第78页 |
| ·管碟法 | 第78页 |
| ·摇瓶发酵法 | 第78页 |
| ·体外酶反应检测法 | 第78页 |
| ·发酵液菌体浓度和核黄素含量测定方法 | 第78-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-84页 |
| ·活性物质存在位置的研究 | 第79页 |
| ·活性物质的极性试验 | 第79-80页 |
| ·活性物质的热稳定性试验 | 第80-81页 |
| ·活性物质的酸碱稳定性试验 | 第81-82页 |
| ·活性物质对蛋白酶K 的敏感性试验 | 第82-83页 |
| ·冰箱储存时间对活性物质稳定性的影响 | 第83页 |
| ·活性物质的硫酸铵盐析 | 第83-84页 |
| ·本章小结 | 第84页 |
| 参考文献 | 第84-86页 |
| 第六章 菌株Q210 发酵条件的研究 | 第86-94页 |
| ·前言 | 第86-87页 |
| ·材料与方法 | 第87-89页 |
| ·菌种来源 | 第87页 |
| ·主要仪器 | 第87页 |
| ·主要药品与试剂 | 第87页 |
| ·培养基 | 第87-88页 |
| ·假丝酵母的种子培养 | 第88-89页 |
| ·菌株Q210 的种子培养 | 第89页 |
| ·菌株Q210 的发酵培养 | 第89页 |
| ·活性物质的体外酶反应检测法 | 第89页 |
| ·结果与分析 | 第89-93页 |
| ·Q210 发酵培养基的研究 | 第89-91页 |
| ·培养基对菌株Q210 生长情况及菌落形态的影响 | 第89-90页 |
| ·培养基对Q210 活性产物合成的影响 | 第90-91页 |
| ·发酵时间对 Q210 活性产物合成的影响 | 第91页 |
| ·Q210 菌株发酵条件的正交试验结果 | 第91-93页 |
| ·正交试验验证结果 | 第93页 |
| ·本章小结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-95页 |
| 第七章 总结与展望 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第98页 |