| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 反式脂肪酸的来源 | 第12-14页 |
| 1.2.1 油脂的工业氢化 | 第13页 |
| 1.2.2 油脂的精炼及高温加热处理 | 第13页 |
| 1.2.3 反刍动物脂肪及其乳制品 | 第13-14页 |
| 1.3 反式脂肪酸的危害 | 第14-17页 |
| 1.3.1 加工来源反式脂肪酸与心血管疾病 | 第14页 |
| 1.3.2 加工来源反式脂肪酸与糖尿病 | 第14-15页 |
| 1.3.3 加工来源反式脂肪酸与阿尔茨海默病(AD) | 第15页 |
| 1.3.4 加工来源反式脂肪酸与婴儿和孕妇健康 | 第15页 |
| 1.3.5 加工来源反式脂肪酸与肥胖 | 第15页 |
| 1.3.6 反刍动物来源反式脂肪酸与癌症 | 第15-16页 |
| 1.3.7 反刍动物来源反式脂肪酸与免疫系统 | 第16页 |
| 1.3.8 反式脂肪酸与脂代谢 | 第16-17页 |
| 1.4 膳食脂肪的消化、吸收与转运 | 第17-18页 |
| 1.4.1 脂类的消化 | 第17页 |
| 1.4.2 脂肪酸的吸收 | 第17页 |
| 1.4.3 血脂的转运 | 第17-18页 |
| 1.5 脂代谢 | 第18-20页 |
| 1.5.1 脂代谢指标 | 第18页 |
| 1.5.2 肝脏功能性指标 | 第18-19页 |
| 1.5.3 肝脏脂代谢机制 | 第19-20页 |
| 1.5.3.1 PPARs | 第19-20页 |
| 1.5.3.2 SREBPs | 第20页 |
| 1.6 选题意义 | 第20页 |
| 1.7 研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 试剂配制 | 第25-28页 |
| 2.2.1 磷酸盐缓冲溶液(PBS) | 第26页 |
| 2.2.2 生理盐水 | 第26页 |
| 2.2.3 氯仿-甲醇溶液 | 第26页 |
| 2.2.4 氢氧化钠-甲醇溶液 | 第26页 |
| 2.2.5 乙二胺四乙酸(EDTA)溶液 | 第26页 |
| 2.2.6 苏木精-伊红(HE)染色液 | 第26页 |
| 2.2.7 DNA 酶 | 第26-27页 |
| 2.2.8 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第27-28页 |
| 2.2.8.1 30%丙烯酰胺溶液 | 第27页 |
| 2.2.8.2 1.5 mol/L Tris-HCl (pH 8.8) | 第27页 |
| 2.2.8.3 1.0 mol/L Tris-HCl (pH 6.8) | 第27页 |
| 2.2.8.4 10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液 | 第27页 |
| 2.2.8.5 10%过硫酸胺(APS) | 第27页 |
| 2.2.8.6 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 | 第27页 |
| 2.2.8.7 1O×电泳缓冲液 | 第27页 |
| 2.2.8.8 10×转移缓冲液 | 第27-28页 |
| 2.2.8.9 PBST缓冲液 | 第28页 |
| 2.2.8.10 封闭液(5%脱脂乳粉) | 第28页 |
| 2.2.8.11 显影液 | 第28页 |
| 2.2.8.12 定影液 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-40页 |
| 2.3.1 饲料配制 | 第28-29页 |
| 2.3.2 实验动物分组与饲喂 | 第29页 |
| 2.3.3 实验动物处理及样品保存 | 第29页 |
| 2.3.4 GC-MS法测定小鼠肝脏和血液及饲料脂肪酸组成 | 第29-30页 |
| 2.3.4.1 小鼠肝脏脂肪酸提取及甲酯化 | 第29-30页 |
| 2.3.4.2 小鼠血浆、红细胞及饲料油脂脂肪酸提取及甲酯化 | 第30页 |
| 2.3.4.3 气相色谱质谱联用仪(GC-MS)检测条件 | 第30页 |
| 2.3.5 肝脏和血浆中总胆固醇(TC)含量测定 | 第30-31页 |
| 2.3.6 肝脏和血浆中甘油三酯(TG)含量测定 | 第31页 |
| 2.3.7 小鼠肝脏功能性酶活力测定 | 第31-33页 |
| 2.3.7.1 血液谷丙转氨酶(ALT)酶活测定 | 第31-32页 |
| 2.3.7.2 血浆天冬氨酸转移酶(AST)酶活测定 | 第32-33页 |
| 2.3.8 小鼠肝脏组织苏木精-伊红(HE)染色 | 第33页 |
| 2.3.9 实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR) | 第33-36页 |
| 2.3.9.1 RNA提取 | 第33-34页 |
| 2.3.9.2 反转录 | 第34页 |
| 2.3.9.3 荧光定量PCR检测 | 第34-36页 |
| 2.3.10 蛋白免疫印迹法(Western Blot) | 第36-39页 |
| 2.3.10.1 肝脏组织总蛋白提取 | 第36页 |
| 2.3.10.2 BCA法检测蛋白浓度 | 第36-37页 |
| 2.3.10.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.3.10.4 转膜 | 第38页 |
| 2.3.10.5 封闭 | 第38页 |
| 2.3.10.6 一抗孵育 | 第38页 |
| 2.3.10.7 一抗洗脱 | 第38页 |
| 2.3.10.8 二抗孵育 | 第38页 |
| 2.3.10.9 二抗洗脱 | 第38页 |
| 2.3.10.10 ECL显影 | 第38-39页 |
| 2.3.11 统计分析 | 第39-40页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第40-56页 |
| 3.1 脂肪酸组成测定与分析 | 第40-47页 |
| 3.1.1 饲料中油脂脂肪酸组成 | 第40页 |
| 3.1.2 小鼠肝脏脂肪酸组成 | 第40-45页 |
| 3.1.2.1 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏反油酸含量的影响 | 第41页 |
| 3.1.2.2 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏反异油酸含量的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.2.3 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏亚油酸含量的影响 | 第42-43页 |
| 3.1.2.4 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏α-亚麻酸含量的影响 | 第43页 |
| 3.1.2.5 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏花生四烯酸(ARA)含量的影响 | 第43-44页 |
| 3.1.2.6 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏DHA含量的影响 | 第44-45页 |
| 3.1.3 小鼠血浆和红细胞脂肪酸组成 | 第45-47页 |
| 3.1.3.1 小鼠血浆和红细胞中脂肪酸组成(6周龄) | 第45-46页 |
| 3.1.3.2 小鼠血浆和红细胞中脂肪酸组成(8周龄) | 第46-47页 |
| 3.2 小鼠脂代谢及肝脏功能分析 | 第47-50页 |
| 3.2.1 小鼠肝脏组织学分析 | 第47-48页 |
| 3.2.2 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏甘油三酯(TG)含量的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.3 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏总胆固醇(TC)含量的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.4 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏功能的影响 | 第50页 |
| 3.3 氢化大豆油和牦牛酥油影响小鼠肝脏脂代谢的机制初探 | 第50-55页 |
| 3.3.1 实时荧光定量PCR分析小鼠肝脏PPAR-α和PPAR-γ mRNA表达变化 | 第50-54页 |
| 3.3.1.1 RNA电泳结果 | 第50-51页 |
| 3.3.1.2 RNA浓度以及OD值 | 第51-52页 |
| 3.3.1.3 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏PPAR-α mRNA表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.1.4 氢化大豆油和牦牛酥油摄入对小鼠肝脏PPAR-γ mRNA表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.2 不同食用油脂摄入对小鼠肝脏PPAR-γ蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 论文发表情况 | 第62页 |
