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工业生物质弃物(棕榈壳/木糖母液)高值转化酿酒酵母菌株的构建及生产工艺初探

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表(Abbreviation)第11-12页
第一章 前言第12-24页
    1.1 木质纤维素原料综合利用的意义及现状第12-13页
    1.2 木质纤维素的组成及利用第13页
    1.3 棕榈果壳简介第13-14页
    1.4 木糖代谢途径第14-15页
    1.5 木质纤维素原料乙醇生产工艺第15-18页
    1.6 木糖醇的生产方法第18页
    1.7 木糖母液简介第18-19页
    1.8 酿酒酵母对木糖母液中的糖的利用第19-21页
    1.9 Cre/LoxP位点特异性重组酿酒酵母工业菌株遗传操作体系第21-22页
    1.10 本文研究内容第22-24页
第二章 材料与方法第24-35页
    2.1 实验材料与仪器第24-27页
        2.1.1 菌株与质粒第24-25页
        2.1.2 引物及DNA序列测定第25-26页
        2.1.3 分子克隆工具酶与试剂盒第26页
        2.1.4 培养基第26页
        2.1.5 实验仪器第26-27页
    2.2 实验方法第27-35页
        2.2.1 棕榈壳原料的处理方法第27页
        2.2.2 棕榈壳预处理液组成成分测定方法第27-28页
        2.2.3 发酵液组分分析第28页
        2.2.4 棕榈壳木质纤维素成分分析方法第28-29页
        2.2.5 纤维素酶酶活测定方法第29-30页
        2.2.6 木聚糖酶酶活测定第30页
        2.2.7 分批发酵实验方法第30-31页
        2.2.8 菌株保藏第31页
        2.2.9 菌株对木糖母液耐受性的测定方法第31页
        2.2.10 酵母完整细胞转化法第31-32页
        2.2.11 酵母染色体提取第32页
        2.2.12 大肠杆菌转化第32页
        2.2.13 大肠杆菌质粒小量提取第32页
        2.2.14 标记基因Kan MX的丢失第32-33页
        2.2.15 利用半乳糖生长实验第33页
        2.2.16 细胞总蛋白提取第33页
        2.2.17 木糖还原酶(XR)酶活测定第33-34页
        2.2.18 木糖醇分批发酵第34页
        2.2.19 木糖醇生产的发酵罐培养第34页
        2.2.20 木糖醇发酵罐生产的不同的补料策略第34页
        2.2.21 细胞干重的测定第34-35页
第三章 利用棕榈壳原料发酵产乙醇的工艺条件研究第35-52页
    3.1 不同预处理方式下原料组分分析第35-37页
    3.2 对棕榈壳水解液高耐受菌株的选择第37-38页
    3.3 带有XR,XDH木糖代谢途径工业酿酒酵母的构建第38-39页
    3.4 底物浓度对棕榈壳预处理原料酶解的影响第39页
    3.5 纤维素酶浓度对棕榈壳预处理物料酶解的影响第39-40页
    3.6 原料酶解过程中pH的变化及其对酶解效率的影响第40-41页
    3.7 发酵方式(SHF,SSF与semi-SSF)对乙醇生产的影响第41-43页
    3.8 半同步糖化发酵中不同参数对乙醇发酵的影响第43-47页
    3.9 不同预处理方法原料乙醇发酵结果比较第47-49页
    3.10 补料分批发酵对棕榈壳转化乙醇的影响第49-51页
    本章小结第51-52页
第四章 木糖母液的高值化利用研究第52-69页
    4.1 不同工业菌株对木母液的耐受性分析第52-55页
    4.2 缺失基因GAL1重组菌株的构建第55-58页
        4.2.1 酵母基因组中GAL1基因敲除第55-56页
        4.2.2 筛选标记基因KanMX4的丢失第56-57页
        4.2.3 GAL1基因敲除验证第57-58页
    4.3 GAL1基因敲除菌株的糖利用特征第58-60页
        4.3.1 GAL1基因敲除影响酵母菌株在半乳糖平板上的生长第58页
        4.3.2 敲除GAL1基因阻断了菌株对半乳糖的利用第58-60页
    4.4 木糖醇生产菌株的构建第60-61页
    4.5 重组菌株发酵产木糖醇工艺优化第61-68页
        4.5.1 重组菌株分批发酵产木糖醇的研究第61-63页
        4.5.2 流加葡萄糖工艺发酵产木糖醇第63-68页
    本章小结第68-69页
全文总结及展望第69-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-78页
学位论文评阅及答辩情况表第78页

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