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共轭亚油酸高转化量菌株筛选及其酶学性质研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
英文缩略表第16-17页
第一章 绪论第17-38页
   ·CLA结构与功能第17-25页
     ·CLA结构第17-18页
     ·CLA的天然分布第18页
     ·CLA的生成机理第18-20页
     ·影响CLA含量的因素第20-23页
     ·CLA的生理功能第23-24页
     ·CLA的代谢与安全第24-25页
   ·CLA的化学合成方法第25-28页
     ·异构化法第25-27页
     ·蓖麻醇酸甲酯脱水作用第27页
     ·溴化/脱溴化氢法第27-28页
   ·生物合成法生产CLA第28-31页
     ·生物合成法生成CLA的反应机制第28-29页
     ·瘤胃微生物生成CLA的研究第29页
     ·丙酸杆菌生成CLA的研究第29-30页
     ·乳酸菌生成CLA的研究第30-31页
   ·亚油酸异构酶的研究现状第31-33页
   ·酶的制备技术及酶促反应研究第33页
   ·CLA的检测方法第33-35页
     ·紫外分光光度法第34页
     ·气相色谱法第34页
     ·银离子高效液相色谱法第34-35页
     ·气-质联用法第35页
   ·存在的问题及对策第35-36页
   ·实验内容和设计第36-38页
第二章 CLA检测方法的确立第38-46页
   ·前言第38页
   ·材料与方法第38-40页
     ·主要仪器和试剂第38-39页
     ·CLA标准液的制备第39页
     ·脂肪酸甲酯的制备第39页
     ·气相色谱检测条件第39页
     ·紫外可见分光光度法检测条件第39页
     ·样品的准备、脂肪酸的提取与分析第39-40页
     ·数据分析第40页
   ·结果与讨论第40-45页
     ·UV法对CLA的测定第40-41页
     ·GC法对CLA的测定第41-42页
     ·线性与非线性拟合曲线的建立第42-43页
     ·拟合方程的验证第43-45页
   ·结论第45-46页
第三章 CLA高转化量丙酸杆菌的筛选及反应条件研究第46-58页
   ·前言第46页
   ·材料与方法第46-48页
     ·主要仪器和试剂第46-47页
     ·菌种第47页
     ·培养基的制备第47页
     ·发酵方法第47页
     ·脂肪酸的提取及测定方法第47页
     ·菌液生物量的测定方法第47页
     ·计算方法第47-48页
     ·数据分析第48页
   ·结果与讨论第48-56页
     ·发酵液中CLA的组成第48-49页
     ·不同培养基质中葵花籽油浓度对CLA生成的影响第49-51页
     ·不同基质中培养时间对CLA生成的影响第51-53页
     ·不同基质中葵花籽油浓度对费氏丙酸杆菌生长的影响第53-55页
     ·氧气对CLA生成的影响第55-56页
   ·结论第56-58页
第四章 CLA高转化量乳酸菌的筛选鉴定及反应条件研究第58-69页
   ·前言第58-59页
   ·材料与方法第59-60页
     ·主要仪器和试剂第59页
     ·菌种第59页
     ·培养基的制备第59页
     ·菌株的纯化培养第59-60页
     ·CLA的测定方法第60页
     ·具有CLA转化能力的乳酸菌的筛选第60页
     ·乳酸菌的鉴定及其生化特征的观察第60页
     ·数据分析第60页
   ·结果与讨论第60-68页
     ·具有CLA转化能力乳酸菌的筛选第60-61页
     ·具有CLA转化能力乳酸菌的鉴定第61-64页
     ·SY发酵液中CLA的组成第64-65页
     ·葵花籽油对CLA生成的影响第65-66页
     ·培养时间对CLA生成的影响第66-67页
     ·氧气对CLA生成的影响第67-68页
   ·结论第68-69页
第五章 亚油酸异构酶的分离纯化第69-84页
   ·前言第69-70页
     ·蛋白质分离纯化方法第69-70页
     ·亚油酸异构酶分离纯化方法第70页
   ·材料与方法第70-73页
     ·菌种第70页
     ·主要仪器与试剂第70-71页
     ·菌体细胞的培养与收集第71页
     ·菌体细胞的破碎第71页
     ·菌体细胞破碎效果观察第71-72页
     ·硫酸铵分级沉淀第72页
     ·盐析及浓缩处理第72页
     ·DEAE-Sepharose FF离子交换层析第72页
     ·Sephacryl S-200HR凝胶过滤层析第72页
     ·酶活的测定第72-73页
     ·蛋白质含量的测定第73页
     ·SDS-PAGE鉴定酶纯度第73页
   ·结果与讨论第73-83页
     ·菌体细胞破碎方法第73-75页
     ·硫酸铵分级沉淀第75-76页
     ·离子交换层析第76-78页
     ·凝胶过滤层析第78-80页
     ·离子交换层析与凝胶过滤层析顺序对不同来源酶分离效果的影响第80-82页
     ·SDS-PAGE鉴定酶的纯度第82-83页
   ·结论第83-84页
第六章 不同来源亚油酸异构酶酶学性质比较第84-98页
   ·前言第84-85页
     ·电喷雾质谱技术(ESI-MS)第84页
     ·肽质量指纹技术(PMF)第84-85页
   ·材料与方法第85-87页
     ·实验材料第85页
     ·主要仪器与试剂第85页
     ·蛋白质的定量方法第85-86页
     ·酶活力的测定第86页
     ·最适pH值第86页
     ·最适温度第86页
     ·酶动力学参数的测定第86页
     ·分子量的测定第86页
     ·酶蛋白肽质量指纹图谱的测定第86-87页
     ·数据分析第87页
   ·结果与讨论第87-97页
     ·pH值对酶活力的影响第87-88页
     ·温度对酶活力的影响第88-89页
     ·亚油酸异构酶的动力学参数第89-90页
     ·亚油酸异构酶分子量的测定第90-91页
     ·亚油酸异构酶的肽指纹图谱第91-97页
   ·结论第97-98页
第七章 亚油酸异构酶在不同反应基质中催化反应的研究第98-108页
   ·前言第98-99页
   ·材料与方法第99-100页
     ·实验材料第99页
     ·主要仪器与试剂第99页
     ·酶催化反应第99页
     ·蛋白质含量的测定第99页
     ·实验设计与数据分析第99-100页
   ·结果与讨论第100-106页
     ·不同反应条件对酶法催化生成CLA的研究第100-101页
     ·超临界状态下温度对CLA生成的影响第101页
     ·超临界状态下压力对CLA生成的影响第101-102页
     ·超临界状态下反应时间对CLA生成的影响第102-103页
     ·超临界状态下CLA生成条件的优化第103-104页
     ·单因素效应分析第104-105页
     ·两因素间的交互效应分析第105-106页
   ·结论第106-108页
第八章 全文结论与工作展望第108-112页
   ·本文实验研究总结第108-110页
   ·论文的创新点第110-111页
   ·工作展望第111-112页
参考文献第112-121页
致谢第121-122页
作者简历第122页
研究生在读期间发表的文章第122页

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