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鸡蛋卵白蛋白酶解物抗氧化肽研究

第一章 前言第1-34页
 1 鸡蛋清生物活性肽研究状况第12-18页
   ·鸡蛋清的化学组成第12-17页
     ·鸡蛋的组成第12页
     ·蛋清中蛋白质组成及生物学性质第12-17页
   ·鸡蛋清生物活性肽研究第17-18页
     ·抗菌肽第17页
     ·免疫肽第17页
     ·降压肽第17-18页
     ·抗氧化肽第18页
 2 人体的氧化伤害和防御第18-24页
   ·人体内自由基产生的机制第18页
   ·自由基造成的氧化损伤第18-20页
     ·对脂类的伤害第19页
     ·对蛋白质的损害第19页
     ·对核酸的伤害第19页
     ·对糖类的伤害第19-20页
   ·机体自由基的清除第20-21页
     ·体内抗氧化酶第20页
     ·体内抗氧化剂第20-21页
   ·外源性抗氧化剂及其对自由基代谢的影响第21-24页
     ·维生素类抗氧化剂第21-22页
     ·植物提取物类抗氧化剂第22-23页
     ·微量元素类抗氧化剂第23页
     ·蛋白质、肽类、氨基酸的抗氧化活性第23-24页
 3 抗氧化肽研究进展第24-32页
   ·抗氧化肽的来源及抗氧化活性第24-27页
     ·天然抗氧化肽第24-25页
     ·人工合成抗氧化肽第25页
     ·蛋白质水解产生抗氧化肽第25-27页
   ·抗氧化能力的测定第27-30页
     ·抗脂类物质过氧化法第27-28页
     ·测定抗氧化剂清除自由基能力的方法第28-30页
   ·抗氧化肽的分离纯化与分析第30-31页
     ·抗氧化肽的分离纯化第30页
     ·抗氧化肽分析第30-31页
   ·抗氧化肽的应用前景第31-32页
 4 本研究课题的立题背景、研究意义和主要研究内容第32-34页
   ·立题背景、研究意义第32-33页
   ·主要研究内容第33-34页
     ·鸡蛋卵白蛋白的制备第33页
     ·鸡蛋卵白蛋白的酶水解研究第33页
     ·鸡蛋卵白蛋白水解产物的抗氧化性研究第33页
     ·鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽的分离纯化及分析第33-34页
第二章 鸡蛋卵白蛋白的制备第34-47页
 1 材料与仪器第34页
   ·试验材料第34页
   ·主要试剂第34页
   ·主要仪器设备第34页
 2 试验方法第34-37页
   ·蛋清的制备第34-35页
   ·卵白蛋白分离第35-36页
     ·离子柱制备第35页
     ·分离第35页
     ·柱分离条件的选择第35-36页
   ·蛋白质检测第36-37页
     ·紫外吸收法第36页
     ·反相高效液相(RP-HPLC)色谱法第36页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(SDS-PAGE)鉴定第36-37页
   ·数据统计与分析第37页
 3 结果与分析第37-45页
   ·Q-Sepharose FF 对鸡蛋卵白蛋白吸附量的影响第37-41页
     ·Q-Sepharose FF 对鸡蛋蛋清蛋白吸附量的影响第37-38页
     ·上样量对 Q-Sepharose FF 柱吸附鸡蛋卵白蛋白的影响第38-41页
   ·不同离子强度洗脱液对鸡蛋卵白蛋白洗脱效果的影响第41-42页
   ·最优柱分离条件的优化第42-45页
 4 讨论第45-46页
 5 小结第46-47页
第三章 鸡蛋卵白蛋白的酶法水解研究第47-64页
 1 材料与仪器第47页
   ·试验材料第47页
   ·试剂第47页
   ·主要仪器第47页
 2 试验方法第47-50页
   ·卵白蛋白的酶解第47-48页
     ·酶的筛选实验第47页
     ·胃蛋白酶水解鸡蛋卵白蛋白的单因素试验第47-48页
     ·最佳酶解条件的优化第48页
   ·测定方法第48-50页
     ·蛋白酶活力测定第48-49页
     ·蛋白质水解度的测定第49页
     ·总氮测定第49页
     ·氨基氮测定第49-50页
     ·酶解液清除OH的测定(脱氧核糖法)第50页
   ·数据统计与分析第50页
 3 结果与分析第50-62页
   ·不同蛋白酶对鸡蛋卵白蛋白水解度(DH)的影响第50-53页
   ·胃蛋白酶对鸡蛋卵白蛋白水解单因素试验第53-55页
     ·底物浓度对卵白蛋白水解的影响第53-54页
     ·不同酶用量对卵白蛋白水解的影响第54-55页
   ·酶解条件的优化第55-62页
     ·卵白蛋白胃蛋白酶水解物清除羟自由基试验分析与回归方程建立第56-61页
     ·卵白蛋白胃蛋白酶水解工艺条件的优化和回归模型的检验第61-62页
 4 讨论第62-63页
 5 小结第63-64页
第四章 鸡蛋卵白蛋白酶解物抗氧化活性研究第64-79页
 1 材料与仪器第64-65页
   ·材料第64页
   ·主要试剂第64页
   ·实验动物第64页
   ·主要仪器设备第64-65页
 2 试验方法第65-69页
   ·鸡蛋卵白蛋白酶解物体外抗氧化研究第65页
     ·鸡蛋卵白蛋白酶解物清除超氧阴离子作用第65页
     ·鸡蛋卵白蛋白酶解物清除羟自由基作用第65页
     ·鸡蛋卵白蛋白酶解物抗脂质过氧化作用第65页
   ·鸡蛋卵白蛋白酶解物体内抗氧化研究第65-69页
     ·动物分组及D-gal衰老小鼠模型的建立第65-66页
     ·样品采集第66页
     ·测定方法第66-69页
   ·数据统计与分析第69页
 3 结果与分析第69-76页
   ·鸡蛋卵白蛋白酶解物对自由基的清除作用第69-70页
   ·鸡蛋卵白蛋白酶解物抗脂质过氧化能力第70-71页
   ·卵白蛋白酶解物对小鼠体内SOD活性的影响第71-72页
   ·卵白蛋白酶解物对小鼠GSH-Px活性的影响第72-73页
   ·卵白蛋白酶解物对小鼠CAT活性的影响第73-74页
   ·卵白蛋白酶解物对小鼠T-AOC活性的影响第74-75页
   ·卵白蛋白酶解物对小鼠MDA活性的影响第75-76页
 4 讨论第76-78页
 5 小结第78-79页
第五章 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽的纯化与鉴定第79-89页
 1 试验材料与仪器第79页
   ·试验原料第79页
   ·主要试剂第79页
   ·主要仪器设备第79页
 2 试验方法第79-81页
   ·样品制备第79页
   ·酶解物抗氧化肽的分离第79-80页
     ·酶解物超滤分离第79-80页
     ·酶解物离子交换分离第80页
     ·酶解物RP-HPLC分离纯化第80页
   ·卵白蛋白抗氧化肽结构分析第80页
   ·抗氧化活性检测第80-81页
 3 结果与分析第81-86页
   ·酶解物抗氧化肽分离纯化第81-85页
     ·酶解物超滤分离第81页
     ·Q-Sepharose FF对酶解物离子分离第81-82页
     ·RP-HPLC分离第82-85页
   ·卵白蛋白抗氧化肽结构分析第85-86页
 4 讨论第86-88页
 5 小结第88-89页
结论第89-91页
参考文献第91-107页
附录第107-124页
 附录 1: 卵白蛋白一级结构第107-108页
 附录 2: 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽反相高效液相分离结果第108-109页
 附录 3: OPQ3-1 的肽段质谱图第109-110页
 附录 4: OPQ3-2 的肽段质谱图第110-111页
 附录 5: OPQ3-4 的肽段质谱图第111-112页
 附录 5: 查新报告第112-124页
缩略语第124-125页
致谢第125-126页
攻读博士学位期间的研究成果及获奖情况第126页

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