第一章 前言 | 第1-34页 |
1 鸡蛋清生物活性肽研究状况 | 第12-18页 |
·鸡蛋清的化学组成 | 第12-17页 |
·鸡蛋的组成 | 第12页 |
·蛋清中蛋白质组成及生物学性质 | 第12-17页 |
·鸡蛋清生物活性肽研究 | 第17-18页 |
·抗菌肽 | 第17页 |
·免疫肽 | 第17页 |
·降压肽 | 第17-18页 |
·抗氧化肽 | 第18页 |
2 人体的氧化伤害和防御 | 第18-24页 |
·人体内自由基产生的机制 | 第18页 |
·自由基造成的氧化损伤 | 第18-20页 |
·对脂类的伤害 | 第19页 |
·对蛋白质的损害 | 第19页 |
·对核酸的伤害 | 第19页 |
·对糖类的伤害 | 第19-20页 |
·机体自由基的清除 | 第20-21页 |
·体内抗氧化酶 | 第20页 |
·体内抗氧化剂 | 第20-21页 |
·外源性抗氧化剂及其对自由基代谢的影响 | 第21-24页 |
·维生素类抗氧化剂 | 第21-22页 |
·植物提取物类抗氧化剂 | 第22-23页 |
·微量元素类抗氧化剂 | 第23页 |
·蛋白质、肽类、氨基酸的抗氧化活性 | 第23-24页 |
3 抗氧化肽研究进展 | 第24-32页 |
·抗氧化肽的来源及抗氧化活性 | 第24-27页 |
·天然抗氧化肽 | 第24-25页 |
·人工合成抗氧化肽 | 第25页 |
·蛋白质水解产生抗氧化肽 | 第25-27页 |
·抗氧化能力的测定 | 第27-30页 |
·抗脂类物质过氧化法 | 第27-28页 |
·测定抗氧化剂清除自由基能力的方法 | 第28-30页 |
·抗氧化肽的分离纯化与分析 | 第30-31页 |
·抗氧化肽的分离纯化 | 第30页 |
·抗氧化肽分析 | 第30-31页 |
·抗氧化肽的应用前景 | 第31-32页 |
4 本研究课题的立题背景、研究意义和主要研究内容 | 第32-34页 |
·立题背景、研究意义 | 第32-33页 |
·主要研究内容 | 第33-34页 |
·鸡蛋卵白蛋白的制备 | 第33页 |
·鸡蛋卵白蛋白的酶水解研究 | 第33页 |
·鸡蛋卵白蛋白水解产物的抗氧化性研究 | 第33页 |
·鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽的分离纯化及分析 | 第33-34页 |
第二章 鸡蛋卵白蛋白的制备 | 第34-47页 |
1 材料与仪器 | 第34页 |
·试验材料 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34页 |
2 试验方法 | 第34-37页 |
·蛋清的制备 | 第34-35页 |
·卵白蛋白分离 | 第35-36页 |
·离子柱制备 | 第35页 |
·分离 | 第35页 |
·柱分离条件的选择 | 第35-36页 |
·蛋白质检测 | 第36-37页 |
·紫外吸收法 | 第36页 |
·反相高效液相(RP-HPLC)色谱法 | 第36页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(SDS-PAGE)鉴定 | 第36-37页 |
·数据统计与分析 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-45页 |
·Q-Sepharose FF 对鸡蛋卵白蛋白吸附量的影响 | 第37-41页 |
·Q-Sepharose FF 对鸡蛋蛋清蛋白吸附量的影响 | 第37-38页 |
·上样量对 Q-Sepharose FF 柱吸附鸡蛋卵白蛋白的影响 | 第38-41页 |
·不同离子强度洗脱液对鸡蛋卵白蛋白洗脱效果的影响 | 第41-42页 |
·最优柱分离条件的优化 | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
5 小结 | 第46-47页 |
第三章 鸡蛋卵白蛋白的酶法水解研究 | 第47-64页 |
1 材料与仪器 | 第47页 |
·试验材料 | 第47页 |
·试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
2 试验方法 | 第47-50页 |
·卵白蛋白的酶解 | 第47-48页 |
·酶的筛选实验 | 第47页 |
·胃蛋白酶水解鸡蛋卵白蛋白的单因素试验 | 第47-48页 |
·最佳酶解条件的优化 | 第48页 |
·测定方法 | 第48-50页 |
·蛋白酶活力测定 | 第48-49页 |
·蛋白质水解度的测定 | 第49页 |
·总氮测定 | 第49页 |
·氨基氮测定 | 第49-50页 |
·酶解液清除OH的测定(脱氧核糖法) | 第50页 |
·数据统计与分析 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-62页 |
·不同蛋白酶对鸡蛋卵白蛋白水解度(DH)的影响 | 第50-53页 |
·胃蛋白酶对鸡蛋卵白蛋白水解单因素试验 | 第53-55页 |
·底物浓度对卵白蛋白水解的影响 | 第53-54页 |
·不同酶用量对卵白蛋白水解的影响 | 第54-55页 |
·酶解条件的优化 | 第55-62页 |
·卵白蛋白胃蛋白酶水解物清除羟自由基试验分析与回归方程建立 | 第56-61页 |
·卵白蛋白胃蛋白酶水解工艺条件的优化和回归模型的检验 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-63页 |
5 小结 | 第63-64页 |
第四章 鸡蛋卵白蛋白酶解物抗氧化活性研究 | 第64-79页 |
1 材料与仪器 | 第64-65页 |
·材料 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
·实验动物 | 第64页 |
·主要仪器设备 | 第64-65页 |
2 试验方法 | 第65-69页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物体外抗氧化研究 | 第65页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物清除超氧阴离子作用 | 第65页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物清除羟自由基作用 | 第65页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物抗脂质过氧化作用 | 第65页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物体内抗氧化研究 | 第65-69页 |
·动物分组及D-gal衰老小鼠模型的建立 | 第65-66页 |
·样品采集 | 第66页 |
·测定方法 | 第66-69页 |
·数据统计与分析 | 第69页 |
3 结果与分析 | 第69-76页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物对自由基的清除作用 | 第69-70页 |
·鸡蛋卵白蛋白酶解物抗脂质过氧化能力 | 第70-71页 |
·卵白蛋白酶解物对小鼠体内SOD活性的影响 | 第71-72页 |
·卵白蛋白酶解物对小鼠GSH-Px活性的影响 | 第72-73页 |
·卵白蛋白酶解物对小鼠CAT活性的影响 | 第73-74页 |
·卵白蛋白酶解物对小鼠T-AOC活性的影响 | 第74-75页 |
·卵白蛋白酶解物对小鼠MDA活性的影响 | 第75-76页 |
4 讨论 | 第76-78页 |
5 小结 | 第78-79页 |
第五章 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽的纯化与鉴定 | 第79-89页 |
1 试验材料与仪器 | 第79页 |
·试验原料 | 第79页 |
·主要试剂 | 第79页 |
·主要仪器设备 | 第79页 |
2 试验方法 | 第79-81页 |
·样品制备 | 第79页 |
·酶解物抗氧化肽的分离 | 第79-80页 |
·酶解物超滤分离 | 第79-80页 |
·酶解物离子交换分离 | 第80页 |
·酶解物RP-HPLC分离纯化 | 第80页 |
·卵白蛋白抗氧化肽结构分析 | 第80页 |
·抗氧化活性检测 | 第80-81页 |
3 结果与分析 | 第81-86页 |
·酶解物抗氧化肽分离纯化 | 第81-85页 |
·酶解物超滤分离 | 第81页 |
·Q-Sepharose FF对酶解物离子分离 | 第81-82页 |
·RP-HPLC分离 | 第82-85页 |
·卵白蛋白抗氧化肽结构分析 | 第85-86页 |
4 讨论 | 第86-88页 |
5 小结 | 第88-89页 |
结论 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-107页 |
附录 | 第107-124页 |
附录 1: 卵白蛋白一级结构 | 第107-108页 |
附录 2: 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽反相高效液相分离结果 | 第108-109页 |
附录 3: OPQ3-1 的肽段质谱图 | 第109-110页 |
附录 4: OPQ3-2 的肽段质谱图 | 第110-111页 |
附录 5: OPQ3-4 的肽段质谱图 | 第111-112页 |
附录 5: 查新报告 | 第112-124页 |
缩略语 | 第124-125页 |
致谢 | 第125-126页 |
攻读博士学位期间的研究成果及获奖情况 | 第126页 |