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淡水水产品中单增李斯特菌双重PCR检测及基因分型

目录第1-8页
摘要第8-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词第11-12页
第1章 文献综述第12-27页
   ·单增李斯特菌快速检测方法研究进展第12-19页
     ·传统的分离培养与鉴定方法第12-13页
     ·免疫学检测方法第13-15页
     ·分子生物学检测方法第15-19页
       ·核酸探针检测技术第15页
       ·PCR检测技术第15-19页
         ·定性PCR技术第15-17页
         ·巢氏和半巢氏PCR技术第17页
         ·反转录PCR技术第17-18页
         ·实时定量荧光PCR技术第18-19页
         ·免疫-PCR检测技术第19页
   ·单增李斯特菌基因分型研究进展第19-27页
     ·LMO传统分型方法第20-21页
       ·血清学分型第20页
       ·噬菌体分型第20-21页
       ·多区带酶分型(MEE)第21页
     ·LMO分子生物学分型第21-27页
       ·RAPD分型第21-22页
       ·RFLP分型第22页
       ·AFLP分型第22-23页
       ·SSCP分型第23页
       ·MLST分型第23-24页
       ·PFGE分型第24-25页
       ·RT分型第25页
       ·基因芯片技术第25-27页
第2章 淡水水产品中单增李斯特菌快速检测方法研究第27-41页
   ·材料与方法第27-33页
     ·标准菌株第27页
     ·分离菌株第27页
     ·主要试剂及培养基与缓冲液第27-28页
       ·主要试剂第27-28页
       ·BP和NB培养基第28页
       ·琼脂糖凝胶电泳第28页
       ·其他试剂第28页
     ·模板的制备第28-29页
     ·引物设计第29页
     ·PCR扩增第29-30页
     ·DNA检测限度实验第30页
     ·特异性实验第30页
     ·敏感性实验第30-32页
     ·干扰实验第32页
     ·与SN0184-93方法和mini-VIDAS方法的比较第32-33页
   ·结果与分析第33-39页
     ·双重PCR扩增条件的确定第33页
     ·不同提取模板方法的扩增结果第33-34页
     ·DNA限度实验结果第34-35页
     ·特异性实验结果第35-36页
     ·敏感性实验结果第36-37页
     ·干扰实验结果第37-38页
     ·与SN0184-93方法和mini-VIDAS方法比较的结果第38-39页
   ·讨论第39-41页
第3章 湖北省水产品中单增李斯特菌基因分型的研究第41-52页
   ·材料和方法第41-47页
     ·标准菌株第41页
     ·分离株第41-42页
     ·主要生化试剂及培养基与缓冲液第42-43页
       ·主要生化试剂第42页
       ·LB液体和固体培养基第42页
       ·BP和NB培养基第42-43页
       ·质粒提取缓冲液第43页
       ·琼脂糖凝胶电泳第43页
       ·其他试剂第43页
     ·主要仪器第43页
     ·模板提取第43-44页
     ·PCR引物第44-45页
     ·PCR扩增第45页
     ·PCR产物鉴定第45页
     ·PCR反应特异性试验第45页
     ·PCR产物回收第45-46页
     ·回收产物克隆到PMD-18T载体第46页
     ·PCR产物测序第46-47页
     ·LMO扩增产物序列分析第47页
     ·进化树的构建第47页
   ·结果与分析第47-50页
     ·PCR扩增结果第47-48页
     ·特异性实验结果第48页
     ·LMO分离株间断序列315bp片段与566bp片段序列对比分析第48-49页
     ·PCR扩增产物315bp片段分析结果第49-50页
       ·突变与插入第49页
       ·315bp片段序列变化与样品种类的关系第49页
       ·315bp片段序列变化与样品来源地的关系第49-50页
     ·进化树的构建第50页
   ·讨论第50-52页
第4章 小结第52-53页
   ·淡水水产品中单增李斯特菌快速检测方法研究第52页
   ·湖北省水产品中单增李斯特菌基因分型的研究第52-53页
参考文献第53-65页
致谢第65-66页
附录第66-67页
 课题信息:第66-67页
 个人简历:第67页
 硕士研究生阶段主要研究成果:第67页

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