| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩写符号 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 糖蛋白的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1 糖蛋白的简介 | 第12页 |
| 1.2 糖蛋白的结构 | 第12-15页 |
| 1.2.1 N-连接糖基化 | 第13-14页 |
| 1.2.2 O-连接糖基化 | 第14-15页 |
| 2 蛋白寡糖链的结构分析方法 | 第15-22页 |
| 2.1 糖链的化学衍生 | 第15-16页 |
| 2.2 糖链的检测方法 | 第16-19页 |
| 2.2.1 气相色谱(GC) | 第16-17页 |
| 2.2.2 高效液相色谱相色谱(HPLC) | 第17页 |
| 2.2.3 质谱(MS) | 第17-18页 |
| 2.2.4 核磁共振(NMR) | 第18页 |
| 2.2.5 毛细管电泳技术(CE) | 第18-19页 |
| 2.3 蛋白寡糖链的释放 | 第19-22页 |
| 2.3.1 酶解释放法 | 第19-21页 |
| 2.3.2 化学裂解法 | 第21-22页 |
| 3 本研究的意义及内容 | 第22-24页 |
| 第二章 基于PNGase H~+的N-链寡糖结构分析方法的优化及其应用 | 第24-48页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| 1.1 菌种与底物 | 第24页 |
| 1.1.1 菌种 | 第24页 |
| 1.1.2 底物 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第24-25页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.1 基于PNGase H~+的N-链寡糖结构分析方法的优化 | 第25-32页 |
| 2.1.1 重组PNGase H~+基因在大肠杆菌中的表达及其纯化 | 第25-26页 |
| 2.1.2 基于PNGase H~+的N-糖链结构分析方法的优化 | 第26-29页 |
| 2.1.3 优化后的基于PNGase H~+的N-糖链结构分析方法可行性验证 | 第29-31页 |
| 2.1.4 N-糖链在优化后的快速分析方法缓冲液中的稳定性验证 | 第31页 |
| 2.1.5 N-糖链快速分析方法在定量分析中的一致性验证 | 第31-32页 |
| 2.2 N-糖链快速分析方法在蔬菜、水果与食用菌中的应用 | 第32-33页 |
| 2.2.1 反应体系 | 第32页 |
| 2.2.2 2-AB荧光标记 | 第32页 |
| 2.2.3 高效液相色谱检测 | 第32页 |
| 2.2.4 MALDI-ToF-MS结构分析 | 第32-33页 |
| 3 结果分析 | 第33-44页 |
| 3.1 基于PNGase H~+的N-糖链结构分析方法的优化 | 第33-38页 |
| 3.1.1 基于PNGase H~+的N-糖链结构分析方法最适反应溶液的优化 | 第33页 |
| 3.1.2 基于重组PNGase H~+的N-糖链结构分析方法反应时间的优化 | 第33-35页 |
| 3.1.3 N-糖链快速分析方法的可行性验证 | 第35-36页 |
| 3.1.4 N-连接糖链在快速分析方法的缓冲液中的稳定性验证 | 第36-37页 |
| 3.1.5 N-糖链快速分析方法在定量分析中的一致性验证 | 第37-38页 |
| 3.2 N-糖链快速分析方法在蔬菜、水果与食用菌中的应用 | 第38-44页 |
| 3.2.1 蔬菜中N-糖链的结构分析 | 第38-40页 |
| 3.2.2 水果中N-糖链的结构分析 | 第40-42页 |
| 3.2.3 食用菌中的N-链寡糖结构分析 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 小结 | 第46-48页 |
| 第三章 O-糖链结构分析方法的优化及其应用 | 第48-56页 |
| 1 实验材料、仪器与试剂 | 第48页 |
| 1.1 材料 | 第48页 |
| 1.2 仪器 | 第48页 |
| 1.3 试剂 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-51页 |
| 2.1 非还原性β-消除法的优化 | 第49-50页 |
| 2.1.1 实验设计 | 第49页 |
| 2.1.2 反应体系 | 第49-50页 |
| 2.1.3 2-AB标记 | 第50页 |
| 2.1.4 高效液相色谱检测 | 第50页 |
| 2.2 优化后的β-消除法及其在人乳和牛乳O-糖链结构分析中的应用 | 第50-51页 |
| 2.2.1 人乳和牛乳的预处理 | 第50-51页 |
| 2.2.2 反应体系 | 第51页 |
| 2.2.3 2-AB标记 | 第51页 |
| 2.2.4 高效液相色谱检测 | 第51页 |
| 3 结果分析 | 第51-54页 |
| 3.1 非还原性β-消除法的优化 | 第51-54页 |
| 3.1.1 未优化前的非还原性β-消除法 | 第51-52页 |
| 3.1.2 优化非还原性β-消除法 | 第52-54页 |
| 3.2 优化后的β-消除法在人乳和牛乳O-糖链结构分析中的应用 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 5 小结 | 第55-56页 |
| 全文结论 | 第56-58页 |
| 创新点 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读硕士学位论文发表情况 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
