摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-21页 |
1.1 微纤维 | 第10-13页 |
1.1.1 Ⅵ型胶原微纤维 | 第10-11页 |
1.1.2 含原纤蛋白的微纤维 | 第11-13页 |
1.2 海参 | 第13-15页 |
1.2.1 海参简介 | 第13-14页 |
1.2.2 海参的自溶现象 | 第14-15页 |
1.3 海参的体壁结构 | 第15-17页 |
1.3.1 海参体壁胶原纤维 | 第15页 |
1.3.2 海参体壁微纤维 | 第15-17页 |
1.4 刺参内源性蛋白酶研究进展 | 第17-19页 |
1.4.1 刺参体壁内源酶研究进展 | 第17-18页 |
1.4.2 刺参内脏内源酶研究进展 | 第18-19页 |
1.5 本论文的研究内容与意义 | 第19-21页 |
第二章 刺参自溶前后体壁真皮胶原结缔组织微观结构变化 | 第21-39页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验原料 | 第21页 |
2.1.2 实验仪 | 第21-22页 |
2.1.3 实验试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 试剂配制 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 刺参的预处理 | 第23页 |
2.2.2 石蜡切片制作及染色 | 第23-25页 |
2.2.2.1 石蜡切片制作 | 第23-24页 |
2.2.2.2 阿利新蓝-过碘酸雪夫染色法 | 第24页 |
2.2.2.3 V-G染色法 | 第24-25页 |
2.2.3 自溶不同时间刺参体壁总糖溶出率的测定 | 第25页 |
2.2.4 刺参体壁胶原原纤维(CCF)的制备 | 第25-26页 |
2.2.5 刺参体壁酶溶型胶原蛋白(PSC)的提取 | 第26页 |
2.2.6 扫描电镜样品前处理 | 第26-27页 |
2.2.7 SDS-PAGE电泳 | 第27页 |
2.2.8 红外光谱分析 | 第27页 |
2.2.9 紫外光谱分析 | 第27页 |
2.2.10 统计学分析方法 | 第27页 |
2.3 结果与讨论 | 第27-39页 |
2.3.1 刺参自溶前后体壁真皮组织微观结构变化 | 第27-31页 |
2.3.1.1 V-G染色 | 第27-29页 |
2.3.1.2 AB-PAS染色 | 第29-31页 |
2.3.2 自溶海参上清液总糖溶出量 | 第31-32页 |
2.3.3 自溶不同时间海参上清液电泳 | 第32-33页 |
2.3.4 自溶不同时间粗胶原纤维的扫描电镜观察 | 第33-34页 |
2.3.5 自溶不同时间粗胶原纤维及胶原蛋白的红外分析 | 第34-36页 |
2.3.6 自溶不同时间胶原蛋白的紫外分析 | 第36-37页 |
2.3.7 自溶不同时间胶原蛋白的电泳分析 | 第37-39页 |
第三章 蛋白酶对海参微纤维网络结构的降解作用 | 第39-58页 |
3.1 实验材料 | 第39-40页 |
3.1.1 实验原料 | 第39页 |
3.1.2 实验仪器 | 第39页 |
3.1.3 实验试剂 | 第39页 |
3.1.4 试剂配制 | 第39-40页 |
3.2 实验方法 | 第40-45页 |
3.2.1 刺参的预处理 | 第40页 |
3.2.2 刺参体壁微纤维的提取 | 第40页 |
3.2.3 透射电镜样品前处理 | 第40-41页 |
3.2.4 刺参内源性蛋白酶的提取 | 第41页 |
3.2.4.1 海参肠除脂 | 第41页 |
3.2.4.2 提取内源性半胱氨酸蛋白酶 | 第41页 |
3.2.4.3 提取内源性基质金属蛋白酶 | 第41页 |
3.2.5 蛋白酶的活力测定 | 第41-42页 |
3.2.6 制备刺参体壁微纤维与蛋白酶反应的样品 | 第42页 |
3.2.7 糖胺聚糖含量的测定 | 第42-43页 |
3.2.8 氨基酸组成分析 | 第43-44页 |
3.2.9 单糖组成分析 | 第44页 |
3.2.9.1 标准多糖的酸解 | 第44页 |
3.2.9.2 样品的酸降解 | 第44页 |
3.2.9.3 PMP柱前衍生化 | 第44页 |
3.2.10 分子量分布分析 | 第44-45页 |
3.2.11 红外光谱分析 | 第45页 |
3.2.12 统计学分析方法 | 第45页 |
3.3 结果与讨论 | 第45-58页 |
3.3.1 微纤维网络结构的透射电镜观察 | 第45-46页 |
3.3.2 微纤维网络结构单糖分析 | 第46-47页 |
3.3.3 微纤维网络结构氨基酸分析 | 第47-48页 |
3.3.4 微纤维网络红外分析 | 第48-49页 |
3.3.5 内源性半胱氨酸及基质金属蛋白酶的制备 | 第49-51页 |
3.3.6 微纤维网络酶解上清液糖胺聚糖含量的测定 | 第51-52页 |
3.3.7 微纤维网络酶解上清液单糖分析 | 第52-53页 |
3.3.8 微纤维网络酶解上清氨基酸分析 | 第53-56页 |
3.3.9 微纤维网络酶解上清分子量分析 | 第56页 |
3.3.10 微纤维网络酶解沉淀红外分析 | 第56-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68页 |