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刺参自溶过程中体壁糖蛋白的变化及机理研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-21页
    1.1 微纤维第10-13页
        1.1.1 Ⅵ型胶原微纤维第10-11页
        1.1.2 含原纤蛋白的微纤维第11-13页
    1.2 海参第13-15页
        1.2.1 海参简介第13-14页
        1.2.2 海参的自溶现象第14-15页
    1.3 海参的体壁结构第15-17页
        1.3.1 海参体壁胶原纤维第15页
        1.3.2 海参体壁微纤维第15-17页
    1.4 刺参内源性蛋白酶研究进展第17-19页
        1.4.1 刺参体壁内源酶研究进展第17-18页
        1.4.2 刺参内脏内源酶研究进展第18-19页
    1.5 本论文的研究内容与意义第19-21页
第二章 刺参自溶前后体壁真皮胶原结缔组织微观结构变化第21-39页
    2.1 实验材料第21-23页
        2.1.1 实验原料第21页
        2.1.2 实验仪第21-22页
        2.1.3 实验试剂第22-23页
        2.1.4 试剂配制第23页
    2.2 实验方法第23-27页
        2.2.1 刺参的预处理第23页
        2.2.2 石蜡切片制作及染色第23-25页
            2.2.2.1 石蜡切片制作第23-24页
            2.2.2.2 阿利新蓝-过碘酸雪夫染色法第24页
            2.2.2.3 V-G染色法第24-25页
        2.2.3 自溶不同时间刺参体壁总糖溶出率的测定第25页
        2.2.4 刺参体壁胶原原纤维(CCF)的制备第25-26页
        2.2.5 刺参体壁酶溶型胶原蛋白(PSC)的提取第26页
        2.2.6 扫描电镜样品前处理第26-27页
        2.2.7 SDS-PAGE电泳第27页
        2.2.8 红外光谱分析第27页
        2.2.9 紫外光谱分析第27页
        2.2.10 统计学分析方法第27页
    2.3 结果与讨论第27-39页
        2.3.1 刺参自溶前后体壁真皮组织微观结构变化第27-31页
            2.3.1.1 V-G染色第27-29页
            2.3.1.2 AB-PAS染色第29-31页
        2.3.2 自溶海参上清液总糖溶出量第31-32页
        2.3.3 自溶不同时间海参上清液电泳第32-33页
        2.3.4 自溶不同时间粗胶原纤维的扫描电镜观察第33-34页
        2.3.5 自溶不同时间粗胶原纤维及胶原蛋白的红外分析第34-36页
        2.3.6 自溶不同时间胶原蛋白的紫外分析第36-37页
        2.3.7 自溶不同时间胶原蛋白的电泳分析第37-39页
第三章 蛋白酶对海参微纤维网络结构的降解作用第39-58页
    3.1 实验材料第39-40页
        3.1.1 实验原料第39页
        3.1.2 实验仪器第39页
        3.1.3 实验试剂第39页
        3.1.4 试剂配制第39-40页
    3.2 实验方法第40-45页
        3.2.1 刺参的预处理第40页
        3.2.2 刺参体壁微纤维的提取第40页
        3.2.3 透射电镜样品前处理第40-41页
        3.2.4 刺参内源性蛋白酶的提取第41页
            3.2.4.1 海参肠除脂第41页
            3.2.4.2 提取内源性半胱氨酸蛋白酶第41页
            3.2.4.3 提取内源性基质金属蛋白酶第41页
        3.2.5 蛋白酶的活力测定第41-42页
        3.2.6 制备刺参体壁微纤维与蛋白酶反应的样品第42页
        3.2.7 糖胺聚糖含量的测定第42-43页
        3.2.8 氨基酸组成分析第43-44页
        3.2.9 单糖组成分析第44页
            3.2.9.1 标准多糖的酸解第44页
            3.2.9.2 样品的酸降解第44页
            3.2.9.3 PMP柱前衍生化第44页
        3.2.10 分子量分布分析第44-45页
        3.2.11 红外光谱分析第45页
        3.2.12 统计学分析方法第45页
    3.3 结果与讨论第45-58页
        3.3.1 微纤维网络结构的透射电镜观察第45-46页
        3.3.2 微纤维网络结构单糖分析第46-47页
        3.3.3 微纤维网络结构氨基酸分析第47-48页
        3.3.4 微纤维网络红外分析第48-49页
        3.3.5 内源性半胱氨酸及基质金属蛋白酶的制备第49-51页
        3.3.6 微纤维网络酶解上清液糖胺聚糖含量的测定第51-52页
        3.3.7 微纤维网络酶解上清液单糖分析第52-53页
        3.3.8 微纤维网络酶解上清氨基酸分析第53-56页
        3.3.9 微纤维网络酶解上清分子量分析第56页
        3.3.10 微纤维网络酶解沉淀红外分析第56-58页
第四章 结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
附录第68页

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