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豆酱米曲霉α-淀粉酶的分离纯化与酶学性质分析

中文摘要第2-4页
Abstract第4-5页
第1章 绪论第10-19页
    1.1 α-淀粉酶简介第10页
    1.2 α-淀粉酶产生菌株第10-11页
    1.3 α-淀粉酶的分离纯化第11-15页
        1.3.1 α-淀粉酶分离纯化的传统方法第11-12页
        1.3.2 双水相萃取分离α-淀粉酶第12-15页
    1.4 米曲霉α-淀粉酶在豆酱生产中的应用第15-16页
        1.4.1 豆酱的生产现状第15页
        1.4.2 曲霉菌在豆酱生产中的作用第15-16页
        1.4.3 酶法制酱第16页
    1.5 本研究的目的与意义第16-17页
        1.5.1 研究的目的第16-17页
        1.5.2 研究的意义第17页
    1.6 本试验的技术路线第17-18页
    1.7 课题资助名称第18-19页
第2章 材料与方法第19-34页
    2.1 试验材料第19-24页
        2.1.1 供试菌种第19页
        2.1.2 主要培养基第19页
        2.1.3 主要仪器设备第19-20页
        2.1.4 主要试剂及缓冲液配制第20-24页
    2.2 α-淀粉酶粗酶液的制备第24-25页
        2.2.1 菌种的活化第24页
        2.2.2 单孢子悬液的制备第24-25页
        2.2.3 种子液的培养第25页
        2.2.4 粗酶液的制备第25页
        2.2.5 菌种的保藏第25页
    2.3 分离纯化操作的试验预处理第25-26页
        2.3.1 Sephadex G-75的溶胀第25-26页
        2.3.2 透析袋的预处理第26页
        2.3.3 层析柱的清洗第26页
        2.3.4 层析柱的再生与保存第26页
    2.4 α-淀粉酶酶活力的测第26-28页
        2.4.1 可溶性淀粉梯度液的配制第26-27页
        2.4.2 标准曲线的绘制第27页
        2.4.3 酶活力的测定方法第27-28页
    2.5 蛋白质含量的测定第28页
        2.5.1 标准曲线的绘制第28页
        2.5.2 样品中蛋白质含量的测定第28页
    2.6 α-淀粉酶的分泌类型第28页
    2.7 培养时间及接种量对粗酶液中酶量的影响第28-29页
    2.8 α-淀粉酶的分离纯化第29-31页
        2.8.1 初步分离纯化方法的选择第29-31页
        2.8.2 Sephadex G-75凝胶层析第31页
    2.9 α-淀粉酶酶学性质的研究第31-34页
        2.9.1 酶反应的最适pH和酸稳定性第31-32页
        2.9.2 酶反应的最适温度和热稳定性第32页
        2.9.3 金属离子对酶活力的影响第32页
        2.9.4 K_m及V_m的测定第32页
        2.9.5 淀粉水解产物分析第32-34页
第3章 结果与分析第34-53页
    3.1 标准曲线的绘制第34-35页
        3.1.1 酶标准曲线的绘制第34页
        3.1.2 蛋白质标准曲线的绘制第34-35页
    3.2 α-淀粉酶分泌类型的判断第35页
    3.3 发酵培养时间及接种量对粗酶液中酶量的影响第35-36页
    3.4 α-淀粉酶的分离纯化第36-48页
        3.4.1 初步分离纯化方法的确立第36-45页
        3.4.2 Sephadex G-75凝胶层析分离纯化第45-47页
        3.4.3 氨基酸序列分析第47-48页
    3.5 α-淀粉酶的酶学性质分析第48-53页
        3.5.1 酶反应的最适pH和酸稳定性第48-49页
        3.5.2 酶反应的最适温度和热稳定性第49-50页
        3.5.3 金属离子对酶活力的影响第50-51页
        3.5.4 K_m及V_m的测定第51-52页
        3.5.5 淀粉水解产物的薄层色谱结果分析第52-53页
第4章 讨论第53-57页
    4.1 α-淀粉酶初步分离纯化方法的比较第53-54页
    4.2 α-淀粉酶部分氨基酸序列分析结果的功能性预测第54-55页
    4.3 不同来源和性质α-淀粉酶的应用领域第55页
    4.4 米曲霉(Aspergillus oryzae)α-淀粉酶在豆酱生产中的应用第55页
    4.5 工作展望第55-57页
第5章 结论第57-58页
参考文献第58-68页
附录1第68-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表论文第71-72页

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