中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第1章 绪论 | 第10-19页 |
1.1 α-淀粉酶简介 | 第10页 |
1.2 α-淀粉酶产生菌株 | 第10-11页 |
1.3 α-淀粉酶的分离纯化 | 第11-15页 |
1.3.1 α-淀粉酶分离纯化的传统方法 | 第11-12页 |
1.3.2 双水相萃取分离α-淀粉酶 | 第12-15页 |
1.4 米曲霉α-淀粉酶在豆酱生产中的应用 | 第15-16页 |
1.4.1 豆酱的生产现状 | 第15页 |
1.4.2 曲霉菌在豆酱生产中的作用 | 第15-16页 |
1.4.3 酶法制酱 | 第16页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
1.5.1 研究的目的 | 第16-17页 |
1.5.2 研究的意义 | 第17页 |
1.6 本试验的技术路线 | 第17-18页 |
1.7 课题资助名称 | 第18-19页 |
第2章 材料与方法 | 第19-34页 |
2.1 试验材料 | 第19-24页 |
2.1.1 供试菌种 | 第19页 |
2.1.2 主要培养基 | 第19页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.4 主要试剂及缓冲液配制 | 第20-24页 |
2.2 α-淀粉酶粗酶液的制备 | 第24-25页 |
2.2.1 菌种的活化 | 第24页 |
2.2.2 单孢子悬液的制备 | 第24-25页 |
2.2.3 种子液的培养 | 第25页 |
2.2.4 粗酶液的制备 | 第25页 |
2.2.5 菌种的保藏 | 第25页 |
2.3 分离纯化操作的试验预处理 | 第25-26页 |
2.3.1 Sephadex G-75的溶胀 | 第25-26页 |
2.3.2 透析袋的预处理 | 第26页 |
2.3.3 层析柱的清洗 | 第26页 |
2.3.4 层析柱的再生与保存 | 第26页 |
2.4 α-淀粉酶酶活力的测 | 第26-28页 |
2.4.1 可溶性淀粉梯度液的配制 | 第26-27页 |
2.4.2 标准曲线的绘制 | 第27页 |
2.4.3 酶活力的测定方法 | 第27-28页 |
2.5 蛋白质含量的测定 | 第28页 |
2.5.1 标准曲线的绘制 | 第28页 |
2.5.2 样品中蛋白质含量的测定 | 第28页 |
2.6 α-淀粉酶的分泌类型 | 第28页 |
2.7 培养时间及接种量对粗酶液中酶量的影响 | 第28-29页 |
2.8 α-淀粉酶的分离纯化 | 第29-31页 |
2.8.1 初步分离纯化方法的选择 | 第29-31页 |
2.8.2 Sephadex G-75凝胶层析 | 第31页 |
2.9 α-淀粉酶酶学性质的研究 | 第31-34页 |
2.9.1 酶反应的最适pH和酸稳定性 | 第31-32页 |
2.9.2 酶反应的最适温度和热稳定性 | 第32页 |
2.9.3 金属离子对酶活力的影响 | 第32页 |
2.9.4 K_m及V_m的测定 | 第32页 |
2.9.5 淀粉水解产物分析 | 第32-34页 |
第3章 结果与分析 | 第34-53页 |
3.1 标准曲线的绘制 | 第34-35页 |
3.1.1 酶标准曲线的绘制 | 第34页 |
3.1.2 蛋白质标准曲线的绘制 | 第34-35页 |
3.2 α-淀粉酶分泌类型的判断 | 第35页 |
3.3 发酵培养时间及接种量对粗酶液中酶量的影响 | 第35-36页 |
3.4 α-淀粉酶的分离纯化 | 第36-48页 |
3.4.1 初步分离纯化方法的确立 | 第36-45页 |
3.4.2 Sephadex G-75凝胶层析分离纯化 | 第45-47页 |
3.4.3 氨基酸序列分析 | 第47-48页 |
3.5 α-淀粉酶的酶学性质分析 | 第48-53页 |
3.5.1 酶反应的最适pH和酸稳定性 | 第48-49页 |
3.5.2 酶反应的最适温度和热稳定性 | 第49-50页 |
3.5.3 金属离子对酶活力的影响 | 第50-51页 |
3.5.4 K_m及V_m的测定 | 第51-52页 |
3.5.5 淀粉水解产物的薄层色谱结果分析 | 第52-53页 |
第4章 讨论 | 第53-57页 |
4.1 α-淀粉酶初步分离纯化方法的比较 | 第53-54页 |
4.2 α-淀粉酶部分氨基酸序列分析结果的功能性预测 | 第54-55页 |
4.3 不同来源和性质α-淀粉酶的应用领域 | 第55页 |
4.4 米曲霉(Aspergillus oryzae)α-淀粉酶在豆酱生产中的应用 | 第55页 |
4.5 工作展望 | 第55-57页 |
第5章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
附录1 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表论文 | 第71-72页 |