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对虾中隐蔽态T-2毒素危害特征与免疫毒性分子标记识别

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 绪论第13-19页
    1.1 T-2 的一般性质第13页
    1.2 T-2 的毒效应第13-15页
        1.2.1 生产性能下降第13-14页
        1.2.2 消化系统和肝脏损伤第14页
        1.2.3 免疫系统毒性第14-15页
        1.2.4 血液系统损伤第15页
    1.3 T-2 在水产动物中蓄积的危害第15-17页
        1.3.1 对虾中T-2 的蓄积规律第15-16页
        1.3.2 T-2 隐蔽态残留物形成的可能机制第16页
        1.3.3 隐蔽态残留物的潜在危害不容忽视第16-17页
    1.4 本课题研究内容与意义第17-19页
        1.4.1 研究内容第17页
        1.4.2 意义第17-19页
2 T-2 对凡纳滨对虾生长性能和器官组织显微结构的影响第19-30页
    2.1 材料与仪器第19-20页
        2.1.1 材料第19页
        2.1.2 材料和试剂第19-20页
        2.1.3 仪器与设备第20页
    2.2 实验方法第20-21页
        2.2.1 T-2 毒素染毒对虾第20页
        2.2.2 对虾生长特性的测定第20页
        2.2.3 对虾消化酶的测定第20-21页
        2.2.4 组织病理学分析第21页
        2.2.5 数据分析第21页
    2.3 结果第21-28页
        2.3.1 T-2 对凡纳滨对虾生长指标的影响第21页
        2.3.2 T-2 对对虾消化酶的影响第21-25页
        2.3.3 T-2 对凡纳滨对虾显微结构的影响第25-28页
    2.4 分析与讨论第28-29页
        2.4.1 T-2 对对虾生长特性影响第28页
        2.4.2 T-2 对对虾消化酶的影响第28-29页
        2.4.3 T-2 对对虾显微结构的影响第29页
    2.5 结论第29-30页
3 T-2 对凡纳滨对虾非特异性免疫性能的影响第30-41页
    3.1 材料与仪器第30-31页
        3.1.1 材料第30页
        3.1.2 试剂第30-31页
        3.1.3 仪器第31页
    3.2 实验方法第31-33页
        3.2.1 血淋巴提取第31页
        3.2.2 血清中蛋白含量测定第31页
        3.2.3 全血细胞计数第31页
        3.2.4 溶血活力的测定第31-32页
        3.2.5 溶菌活力测定第32页
        3.2.6 凝集活力测定第32页
        3.2.7 血清抗菌活力第32页
        3.2.8 血清中磷酸酶测定第32页
        3.2.9 肝胰腺中ACP、AKP、ATPase测定第32-33页
    3.3 数据处理第33页
    3.4 结果第33-38页
        3.4.1 T-2 对凡纳滨对虾血清蛋白的影响第33页
        3.4.2 T-2 对凡纳滨对虾血细胞总数、溶菌酶和溶血活力的影响第33-34页
        3.4.3 T-2 对凡纳滨对虾血清凝集活力的影响第34页
        3.4.4 T-2 对凡纳滨对虾血清抗菌活力的影响第34-35页
        3.4.5 T-2 对凡纳滨对虾血清和肝胰腺磷酸酶的影响第35页
        3.4.6 T-2 对凡纳滨对虾肝胰腺ATP酶的影响第35-36页
        3.4.7 T-2 剂量与凡纳滨对虾非特异性指标之间的剂量-效应关系分析第36-38页
    3.5 讨论第38-40页
        3.5.1 T-2 对凡纳滨对虾血清蛋白的影响第38页
        3.5.2 T-2 对凡纳滨对虾血细胞总数、溶菌酶和溶血活力的影响第38页
        3.5.3 T-2 对凡纳滨对虾血清凝集活力的影响第38-39页
        3.5.4 T-2 对凡纳滨对虾血清抗菌活力的影响第39页
        3.5.5 T-2 对凡纳滨对虾血清和肝胰腺磷酸酶的影响第39页
        3.5.6 T-2 对凡纳滨对虾肝胰腺ATP酶的影响第39页
        3.5.7 剂量与非特异性免疫指标之间的剂量-效应关系分析第39-40页
    3.6 结论第40-41页
4 对虾中T-2 毒素残留物对小鼠的毒性效应分析第41-55页
    4.1 材料与仪器第41-42页
        4.1.1 材料第41页
        4.1.2 试剂第41-42页
        4.1.3 仪器与设备第42页
    4.2 实验方法第42-43页
        4.2.1 分组和给药方式第42页
        4.2.2 小鼠形态观察和增长率测定第42页
        4.2.3 器官指数测定第42页
        4.2.4 小鼠血常规分析第42页
        4.2.5 小鼠精子畸形试验第42-43页
        4.2.6 小鼠骨髓微核试验第43页
        4.2.7 小鼠血清生化指标的测定第43页
        4.2.8 统计学分析第43页
    4.3 结果第43-52页
        4.3.1 小鼠形态观察和体重增长率测定第43-44页
        4.3.2 器官系数测定第44页
        4.3.3 小鼠血常规分析第44-49页
        4.3.4 小鼠精子畸形试验第49-51页
        4.3.5 小鼠骨髓微核试验第51-52页
        4.3.6 小鼠血清生化指标的测定第52页
    4.4 讨论第52-54页
        4.4.1 染毒对虾对小鼠体重增长率的影响第52-53页
        4.4.2 染毒对虾对小鼠器官指数测定第53页
        4.4.3 染毒对虾对小鼠血常规的影响第53页
        4.4.4 染毒对虾对小鼠的遗传毒性分析第53-54页
        4.4.5 小鼠血清生化指标的测定第54页
    4.5 结论第54-55页
5 对虾中隐蔽态T-2 残留物的解离及其MTT试验分析第55-64页
    5.1 材料与试剂第55-56页
        5.1.1 材料第55页
        5.1.2 试剂第55-56页
        5.1.3 仪器设备第56页
    5.2 实验方法第56-57页
        5.2.1 凡纳滨对虾染毒第56页
        5.2.2 样品前处理第56-57页
        5.2.3 MTT试验第57页
        5.2.4 LC-MS/MS检测第57页
    5.3 结果第57-61页
        5.3.1 急性染毒对虾体内残留T-2 的MTT试验第57-58页
        5.3.2 对虾体内m T-2s残留物解离方法的选择第58-59页
        5.3.3 蓄积毒性对虾体内m T-2s残留物的MTT试验第59-60页
        5.3.4 LC-MS/MS检测蓄积毒性对虾体内m T-2s的含量第60-61页
    5.4 讨论第61-63页
    5.5 结论第63-64页
6 对虾中MT-2S介导JAK/STAT通路的免疫毒性分子标记识别第64-78页
    6.1 材料与试剂第64-65页
        6.1.1 材料第64页
        6.1.2 试剂第64-65页
        6.1.3 仪器设备第65页
    6.2 实验方法第65-67页
        6.2.1 对虾中m T-2s提取第65页
        6.2.2 药物处理细胞第65页
        6.2.3 RNA提取第65-66页
        6.2.4 总RNA质量检测第66页
        6.2.5 合成c DNA第66页
        6.2.6 实时荧光实时定量PCR第66-67页
        6.2.7 数据处理第67页
    6.3 结果第67-76页
        6.3.1 细胞总RNA的质量鉴定第68页
        6.3.2 T-2 毒素及m T-2s对RAW 264.7 细胞炎性细胞因子m RNA水平的影响第68-70页
        6.3.3 T-2 毒素及m T-2s对RAW 264.7 负反馈调节蛋白SOCS m RNA水平的影响第70-72页
        6.3.4 T-2 毒素及m T-2s对JAK/STAT信号通路关键分子的m RNA水平的影响第72-76页
    6.4 讨论第76-77页
    6.5 结论第77-78页
7 总结与展望第78-80页
    7.1 总结第78-79页
    7.2 不足之处与展望第79-80页
参考文献第80-90页
附录第90-94页
致谢第94-95页
作者简介第95-96页
导师简介第96页

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