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乳酸菌表面蛋白对免疫细胞体外激活及其过敏缓解效应研究

摘要第2-4页
Abstract第4-6页
符号说明第10-13页
1 绪论第13-22页
    1.0 乳酸菌概述第13页
    1.1 乳酸菌的益生作用第13-15页
        1.1.1 预防与治疗腹泻第13-14页
        1.1.2 抑制病原菌黏附第14页
        1.1.3 乳酸菌抗过敏作用第14-15页
        1.1.4 乳酸菌免疫调节与肿瘤抑制第15页
    1.2 乳酸菌表面蛋白及其作用第15-16页
    1.3 乳酸菌与免疫细胞相互作用第16-19页
        1.3.1 小鼠骨髓源树突状细胞DC2.4第16-17页
        1.3.2 小肠上皮细胞IEC-6第17页
        1.3.3 巨噬细胞第17页
        1.3.4 脾淋巴细胞第17-18页
        1.3.5 肥大细胞第18-19页
    1.4 乳酸菌黏附性评价方法第19-20页
        1.4.1 直接测定法第20页
        1.4.2 间接评价法第20页
    1.5 免疫调节信号通路第20-21页
        1.5.1 依赖于Toll样受体的NF-κB通路第20-21页
        1.5.2 MAPK信号通路第21页
    1.6 本课题研究意义及主要内容第21-22页
2 材料与方法第22-38页
    2.1 材料第22-26页
        2.1.1 实验动物第22页
        2.1.2 菌株与细胞第22页
        2.1.3 主要试剂第22-24页
        2.1.4 主要溶液的配制第24-25页
        2.1.5 主要仪器第25-26页
    2.2 方法第26-38页
        2.2.1 乳酸菌菌株的复苏与培养第26页
        2.2.2 乳酸菌菌株的分子鉴定第26-28页
        2.2.3 乳酸菌菌株表面蛋白的提取第28页
        2.2.4 菌株表面蛋白的SDS-PAGE电泳分析第28-29页
        2.2.5 肠上皮细胞系IEC-6培养与传代第29-30页
        2.2.6 树突状细胞DC2.4的培养与传代第30页
        2.2.7 小鼠巨噬细胞制备第30-31页
        2.2.8 小鼠脾细胞制备第31页
        2.2.9 乳酸菌诱生IL-10和IL-12细胞因子效应第31-32页
        2.2.10 乳酸菌表面蛋白的粘附抑制试验第32页
        2.2.11 乳酸菌与细胞粘附作用的显微观察第32-33页
        2.2.12 乳酸菌表面蛋白的细胞诱导增殖试验第33页
        2.2.13 小鼠致敏血清制备第33-34页
        2.2.14 致敏血清对小鼠腹腔肥大细胞的免疫介导第34页
        2.2.15 小鼠腹腔肥大细胞的分离第34-35页
        2.2.16 乳酸菌表面蛋白诱导肥大细胞增殖试验第35-36页
        2.2.17 乳酸菌表面蛋白抑制肥大细胞脱颗粒试验第36页
        2.2.18 乳酸菌表面蛋白对抑制肥大细胞组胺释放试验第36-37页
        2.2.19 数据统计学处理第37-38页
3 结果与分析第38-63页
    3.1 乳酸菌菌株的培养与形态观察第38-39页
    3.2 乳酸菌菌株的16S rDNA-PCR扩增及测序结果第39-40页
    3.3 表面蛋白的提取优化结果第40页
    3.4 表面蛋白的SDS-PAGE分析第40-41页
    3.5 乳酸菌诱生IL-10和IL-12细胞因子效应第41-42页
    3.6 乳酸菌对免疫细胞的粘附形态观察第42-50页
    3.7 乳酸菌表面蛋白对菌株粘附能力的影响第50-51页
    3.8 乳酸菌表面蛋白对免疫细胞增殖的影响第51-52页
    3.9 不同剂量乳酸菌表面蛋白对IEC-6的诱导增殖效应第52-53页
    3.10 不同剂量乳酸菌表面蛋白对MC的诱导增殖效应第53-54页
    3.11 不同剂量乳酸菌表面蛋白对SC的诱导增殖效应第54-55页
    3.12 致敏小鼠血清中ova-IgE含量测定结果第55-56页
    3.13 小鼠致敏肥大细胞的分离第56页
    3.14 表面蛋白对肥大细胞的活性影响第56-57页
    3.15 肥大细胞脱颗粒模型的建立第57-59页
    3.16 乳酸菌表面蛋白对肥大细胞的脱颗粒率影响第59-60页
    3.17 乳酸菌表面蛋白对肥大细胞组胺释放的影响第60-63页
4 讨论第63-65页
5 参考文献第65-73页
6 致谢第73-74页

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