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中国传统发酵食品中Enterolysin及HelveticinJ基因多样性及抑菌活性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-15页
引言第15-26页
   ·细菌素简介第15-21页
     ·细菌素的定义第15-16页
     ·细菌素与抗生素的区别第16-17页
     ·细菌素的分类第17-20页
     ·细菌素在食品中的应用第20-21页
   ·III 类乳酸菌细菌素第21页
   ·大肠杆菌表达系统第21-23页
     ·重组蛋白的表达量第21-22页
     ·重组蛋白的表达活性第22页
     ·乳酸茵细菌素在大肠杆菌中表达的概况第22-23页
   ·宏基因组第23-24页
     ·宏基因组与宏基因组学概念第23页
     ·宏基因组研究方法第23-24页
     ·宏基因组技术在乳酸菌抑菌研究中的应用第24页
   ·研究目的和意义第24-25页
   ·研究内容第25-26页
第一章 中国传统发酵食品中 Helveticin J 和 Enterolysin 多样性的分析第26-43页
   ·引言第26页
   ·材料与设备第26-29页
     ·菌株与质粒第26-27页
     ·实验主要试剂第27-28页
     ·实验仪器第28-29页
     ·培养基、溶液的配制及灭菌方法第29页
   ·实验方法第29-32页
     ·引物设计第29-30页
     ·传统发酵食品中总 DNA 提取第30页
     ·Helveticin J 及 Enterolysin 基因扩增第30-31页
     ·克隆载体构建第31-32页
     ·系统发育分析第32页
   ·实验结果第32-41页
     ·Helveticin J 及 Enterolysin 基因扩增及克隆载体构建第32-37页
     ·传统发酵食品中 Helveticin J 多样性分析第37-41页
     ·传统发酵食品中 Enterolysin 多样性分析第41页
   ·总结第41-43页
第二章 臭豆腐样品中 Enterolysin 全长序列的获得及表达载体的构建第43-62页
   ·引言第43页
   ·材料与设备第43-46页
     ·菌株与质粒第43-45页
     ·实验主要试剂第45页
     ·实验仪器第45页
     ·培养基、溶液的配制及灭菌方法第45-46页
   ·实验方法第46-57页
     ·Genome walking第46-50页
     ·DEF5 全长基因扩增第50-52页
     ·表达载体构建(pET-28a-DFE5)第52-53页
     ·诱导表达第53页
     ·SDS-PAGE 电泳第53-55页
     ·抑菌活性检测实验第55-57页
   ·结果与讨论第57-61页
     ·DFE5 基因 5’ 和 3’ 端侧翼序列克隆第57-58页
     ·DFE5 全长基因扩增第58页
     ·表达载体构建(BL21(DE3)-pET-28a-DFE5)第58-59页
     ·抑菌活性检测实验第59-61页
   ·本章小结第61-62页
第三章 乳扇样品中 Helveticin J 全长序列的获得及表达载体的构建第62-72页
   ·引言第62页
   ·材料与设备第62-63页
     ·菌株与质粒第62页
     ·实验主要试剂第62页
     ·实验仪器第62页
     ·培养基、溶液的配制及灭菌方法第62-63页
   ·实验方法第63-67页
     ·Genome walking第63-64页
     ·RS9 全长基因扩增第64-65页
     ·表达载体构建(pET-28a-RS9)第65-66页
     ·诱导表达第66页
     ·SDS-PAGE 电泳第66页
     ·抑菌活性检测实验第66-67页
   ·结果与讨论第67-70页
     ·RS9 基因 5’ 和 3’ 端侧翼序列克隆第67-68页
     ·RS9 全长基因扩增第68页
     ·表达载体构建(BL21(DE3)-pET-28a-RS9)第68-69页
     ·抑菌活性检测实验第69-70页
   ·本章小结第70-72页
第四章 羊乳饼样品中 Enterolysin 全长序列的获得及表达载体的构建第72-82页
   ·引言第72页
   ·材料与设备第72-73页
     ·菌株与质粒第72页
     ·实验主要试剂第72页
     ·实验仪器第72页
     ·培养基、溶液的配制及灭菌方法第72-73页
   ·实验方法第73-76页
     ·Genome walking第73-74页
     ·GCE11 全长基因扩增第74-75页
     ·表达载体构建(pET-28a- GCE11)第75-76页
     ·诱导表达第76页
     ·SDS-PAGE 电泳第76页
     ·抑菌活性检测实验第76页
   ·结果与讨论第76-80页
     ·GCE11 基因 5’ 和 3’ 端侧翼序列克隆第76-78页
     ·GCE11 全长基因扩增第78页
     ·表达载体构建(BL21(DE3)-pET-28a-GCE11)第78-79页
     ·抑菌活性检测实验第79-80页
   ·本章小结第80-82页
第五章 酒酿样品中 Helveticin J 全长序列的获得及表达载体的构建第82-92页
   ·引言第82页
   ·材料与设备第82-83页
     ·菌株与质粒第82页
     ·实验主要试剂第82页
     ·实验仪器第82页
     ·培养基、溶液的配制及灭菌方法第82-83页
   ·实验方法第83-86页
     ·Genome walking第83-84页
     ·RW21 全长基因扩增第84-85页
     ·表达载体构建(pET-28a-RW21)第85-86页
     ·诱导表达第86页
     ·SDS-PAGE 电泳第86页
     ·抑菌活性检测实验第86页
   ·结果与讨论第86-91页
     ·RW21 基因 5’ 和 3’ 端侧翼序列克隆第86-88页
     ·RW21 全长基因扩增第88页
     ·表达载体构建(BL21(DE3)-pET-28a-RW21)第88-89页
     ·抑菌活性检测实验第89-91页
   ·本章小结第91-92页
全文总结第92-94页
科研期间的文章和会议第94-95页
致谢第95-96页
参考文献第96-99页

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