| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1. 引言 | 第9-10页 |
| 2. 标准物质的简介 | 第10-12页 |
| 2.1 标准物质的基本要求 | 第10页 |
| 2.2 标准物质的作用 | 第10-11页 |
| 2.3 标准物质的制备方法 | 第11页 |
| 2.4 标准物质的发展状况及进展 | 第11-12页 |
| 3. 粘质沙雷氏菌的概述 | 第12-13页 |
| 3.1 粘质沙雷氏菌的简介 | 第12页 |
| 3.2 粘质沙雷氏菌作为标准菌株的重要性 | 第12-13页 |
| 4. 噬菌体的概述 | 第13-14页 |
| 4.1 噬菌体ΦX174的简介 | 第13页 |
| 4.2 噬菌体的研究意义 | 第13-14页 |
| 5. 微生物检测方法 | 第14-16页 |
| 5.1 传统的微生物计数方法 | 第14-15页 |
| 5.1.1 空斑法 | 第14页 |
| 5.1.2 最大可能数法 | 第14-15页 |
| 5.1.3 透射电镜法 | 第15页 |
| 5.2 新型微生物计数方法 | 第15-16页 |
| 5.2.1. 荧光显微镜方法 | 第15页 |
| 5.2.2. 流式细胞计数术 | 第15-16页 |
| 6. 本课题立题意义 | 第16-17页 |
| 第二章 粘质沙雷氏菌定量测量新方法研究 | 第17-32页 |
| 1. 引言 | 第17页 |
| 2. 材料和方法 | 第17-19页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第17页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第17-18页 |
| 2.3 方法 | 第18-19页 |
| 2.3.1 1μm标准校准微球样品的制备 | 第18页 |
| 2.3.2 粘质沙雷氏菌细菌样品的制备与染色 | 第18页 |
| 2.3.3 荧光显微镜观察 | 第18页 |
| 2.3.4 粘质沙雷氏菌死活菌不同体积的线性关系 | 第18-19页 |
| 2.3.5 流式细胞仪与平板培养法对比测定结果 | 第19页 |
| 3. 结果与分析 | 第19-31页 |
| 3.1 粘质沙雷氏菌细菌样品制备与染色结果 | 第19-21页 |
| 3.2 CCD图像与滤膜面积计算 | 第21-23页 |
| 3.3 CCD图像计数结果 | 第23-25页 |
| 3.4 粘质沙雷氏菌CCD图像计数结果 | 第25-27页 |
| 3.5 死活粘质沙雷氏菌不同体积的线性关系 | 第27-29页 |
| 3.6 粘质沙雷氏菌流式计数与平板计数法对比测定结果 | 第29-31页 |
| 3.6.1 流式细胞仪计数结果 | 第29页 |
| 3.6.2 营养琼脂平板典型菌落确认和计数 | 第29-31页 |
| 4. 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 响应面法优化粘质沙雷氏菌冷冻干燥保护剂配方 | 第32-42页 |
| 1. 引言 | 第32页 |
| 2. 材料和方法 | 第32-34页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第32页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第32页 |
| 2.3 工艺流程 | 第32-33页 |
| 2.4 测定方法 | 第33页 |
| 2.4.1 活菌计数 | 第33页 |
| 2.4.2 存活率计算 | 第33页 |
| 2.5 粘质沙雷氏菌试验设计 | 第33-34页 |
| 2.5.1 粘质沙雷氏菌单因素试验 | 第33页 |
| 2.5.2 Plackett-Burman试验 | 第33-34页 |
| 2.5.3 Box-Behnken试验确定及显著因素水平 | 第34页 |
| 3. 结果与分析 | 第34-41页 |
| 3.1 粘质沙雷氏菌标准物质单因素试验结果 | 第34页 |
| 3.2 Plackett-Burman试验及响应值 | 第34-35页 |
| 3.3 Plackett-Burman试验方差分析 | 第35-36页 |
| 3.4 Box-Behnken试验及响应值 | 第36-40页 |
| 3.4.1 Box-Behnken试验 | 第36-39页 |
| 3.4.2 响应面和等高线分析 | 第39-40页 |
| 3.5 处理条件的优化与验证试验 | 第40-41页 |
| 3.6 不同保藏期限细胞存活率的测定 | 第41页 |
| 4. 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 粘质沙雷氏菌标准物质的研制 | 第42-51页 |
| 1. 材料和方法 | 第42-46页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第42页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第42页 |
| 1.3 方法 | 第42-43页 |
| 1.3.1 菌种的复活、鉴定 | 第42页 |
| 1.3.2 粘质沙雷氏菌标准物质的生长曲线测定 | 第42-43页 |
| 1.4 粘质沙雷氏菌制备方法 | 第43-44页 |
| 1.4.1 粘质沙雷氏菌保存的工艺路线 | 第43页 |
| 1.4.2 冷冻干燥 | 第43页 |
| 1.4.3 活菌数测定 | 第43-44页 |
| 1.4.4 冻干存活率的测定 | 第44页 |
| 1.5 粘质沙雷氏菌试验验证 | 第44-46页 |
| 1.5.1 粘质沙雷氏菌标准物质的均匀性检验 | 第44-45页 |
| 1.5.2 粘质沙雷氏菌标准物质的稳定性考察 | 第45-46页 |
| 1.6 粘质沙雷氏菌标准物质的定值 | 第46页 |
| 2. 结果与分析 | 第46-50页 |
| 2.1 粘质沙雷氏菌标准物质的生长曲线测定 | 第46页 |
| 2.2 粘质沙雷氏菌标准物质菌种的鉴定和冻干存活率的测定 | 第46-47页 |
| 2.3 粘质沙雷氏菌标准物质的均匀性检验 | 第47-48页 |
| 2.4 粘质沙雷氏菌标准物质的稳定性考察 | 第48-50页 |
| 2.4.1 粘质沙雷氏菌标准物质的短期稳定性考察 | 第48-49页 |
| 2.4.2 粘质沙雷氏菌标准物质的长期稳定性考察 | 第49-50页 |
| 2.5 粘质沙雷氏菌标准物质的定值 | 第50页 |
| 3. 本章小结 | 第50-51页 |
| 第五章 噬菌体ΦX174标准物质的研制 | 第51-62页 |
| 1. 引言 | 第51页 |
| 2. 材料和方法 | 第51-54页 |
| 2.1 病毒株及宿主 | 第51页 |
| 2.2 培养基成分及试剂 | 第51页 |
| 2.3 仪器与设备 | 第51页 |
| 2.4 工艺流程 | 第51-52页 |
| 2.5 测定方法 | 第52页 |
| 2.5.1 噬菌体效价的测定 | 第52页 |
| 2.5.2 存活率计算 | 第52页 |
| 2.5.3 宿主细菌13706的生长曲线测定 | 第52页 |
| 2.6 噬菌体ΦX174标准物质保护剂单因素试验 | 第52-53页 |
| 2.7 噬菌体ΦX174冻干验证试验 | 第53页 |
| 2.7.1 噬菌体ΦX174标准物质的均匀性检验 | 第53页 |
| 2.7.2 噬菌体ΦX174标准物质的稳定性考察 | 第53页 |
| 2.8 不同贮藏温度对噬菌体ΦX174存活率的测定 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-61页 |
| 3.1 噬菌体ΦX174标准物质的单因素结果 | 第54页 |
| 3.2 宿主13706的生长曲线 | 第54-55页 |
| 3.3 噬菌体ΦX174标准物质与宿主细菌的最佳体积搭配比例 | 第55-56页 |
| 3.4 噬菌体ΦX174标准物质冻干存活率的测定 | 第56-58页 |
| 3.5 噬菌体ΦX174验证试验 | 第58-60页 |
| 3.5.1 噬菌体ΦX174标准物质的均匀性检验 | 第58页 |
| 3.5.2 噬菌体ΦX174标准物质的稳定性考察 | 第58-60页 |
| 3.5.3 噬菌体ΦX174标准物质的定值 | 第60页 |
| 3.6不同贮藏温度噬菌体ΦX174存活率的测定 | 第60-61页 |
| 4. 本章小结 | 第61-62页 |
| 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| Abstract | 第70-71页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 | 第74页 |
