摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 含硫化合物 | 第11-13页 |
1.1.1 含硫化合物的发展趋势 | 第11页 |
1.1.2 含硫化合物来源 | 第11页 |
1.1.3 含硫化合物结构特点 | 第11-12页 |
1.1.4 含硫化合物主要种类 | 第12-13页 |
1.1.4.1 异硫氰酸苄酯(BITC) | 第12页 |
1.1.4.2 二烯丙基二硫醚(DADS) | 第12-13页 |
1.1.4.3 异硫氰酸苯乙酯(PEITC) | 第13页 |
1.2 产肠毒素大肠杆菌(ENTEROTOXIGENICESCHERICHIACOLIETEC)概述 | 第13-17页 |
1.2.1 生物学特性 | 第13页 |
1.2.2 致病机理 | 第13-16页 |
1.2.2.1 不耐热肠毒素(heat-labileenterotoxin,LT) | 第13-14页 |
1.2.2.2 耐热肠毒素(Heat-stableenterotoxin,ST) | 第14-15页 |
1.2.2.3 定值因子 | 第15页 |
1.2.2.4 鞭毛 | 第15-16页 |
1.2.3 外源物质对致病性产肠毒素大肠杆菌的抑制作用 | 第16-17页 |
1.2.3.1 海洋微生物溶菌酶 | 第16页 |
1.2.3.2 乳酸链球菌素 | 第16页 |
1.2.3.3 二氢杨梅素 | 第16页 |
1.2.3.4 中草药 | 第16-17页 |
1.3 群体感应概述 | 第17页 |
1.3.1 LuxS/AI-2型感应系统 | 第17页 |
1.3.2 SdiA | 第17页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 含硫化合物的抑菌活性研究 | 第19-26页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第19-20页 |
2.1.1 实验菌株 | 第19页 |
2.1.2 实验样品 | 第19页 |
2.1.3 培养基 | 第19页 |
2.1.4 试剂及药品 | 第19-20页 |
2.1.5 仪器设备 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 供试菌的活化 | 第20-21页 |
2.2.2 样品处理 | 第21页 |
2.2.3 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第21页 |
2.2.4 生长曲线的测定 | 第21-22页 |
2.3 结果与讨论 | 第22-25页 |
2.3.1 BITC对产肠毒素大肠杆菌最小抑制浓度测定结果 | 第22页 |
2.3.2 PEITC对产肠毒素大肠杆菌最低抑制浓度测定结果 | 第22页 |
2.3.3 DADS对产肠毒素大肠杆菌最小抑制浓度测定结果 | 第22-23页 |
2.3.4 BITC对产肠毒素大肠杆菌生长的影响 | 第23-24页 |
2.3.5 PEITC对产肠毒素大肠杆菌生长曲线的影响 | 第24页 |
2.3.6 DADS对产肠毒素大肠杆菌生长的影响 | 第24-25页 |
2.3.7 讨论 | 第25页 |
2.4 本章小结 | 第25-26页 |
第三章 含硫化合物对菌体毒力基因表达的影响 | 第26-36页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第26-28页 |
3.1.1 实验菌株 | 第26页 |
3.1.2 实验样品 | 第26页 |
3.1.3 培养基的配置 | 第26页 |
3.1.4 实验试剂与药品 | 第26-27页 |
3.1.5 仪器设备 | 第27-28页 |
3.2 实验方法 | 第28-30页 |
3.2.1 菌株活化 | 第28页 |
3.2.2 样品制备 | 第28页 |
3.2.3 细菌总RNA提取与检测 | 第28页 |
3.2.4 除杂与cDNA合成 | 第28-29页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR | 第29页 |
3.2.5.1 引物特异性验证 | 第29页 |
3.2.5.2 含硫化合物对ETEC的毒力基因(st、lt)表达的影响 | 第29页 |
3.2.6 统计分析 | 第29-30页 |
3.3 结果与讨论 | 第30-35页 |
3.3.1 RNA的提取与检测 | 第30-31页 |
3.3.2 引物特异性检测 | 第31页 |
3.3.3 含硫化合物对ETEC毒力基因表达的影响 | 第31-34页 |
3.3.3.1 BITC对耐热毒素和不耐热毒素表达的影响 | 第31-32页 |
3.3.3.2 DADS对耐热肠毒素和不耐热肠毒素表达的影响 | 第32-33页 |
3.3.3.3 PEITC对耐热肠毒素和不耐热肠毒素表达的影响 | 第33-34页 |
3.3.4 讨论 | 第34-35页 |
3.4 本章小结 | 第35-36页 |
第四章 含硫化合物对菌体群体感应基因表达的影响 | 第36-42页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第36-37页 |
4.1.1 实验菌株 | 第36页 |
4.1.2 实验样品 | 第36页 |
4.1.3 培养基的配置 | 第36页 |
4.1.4 实验试剂与药品 | 第36-37页 |
4.1.5 仪器设备 | 第37页 |
4.2 实验方法 | 第37-38页 |
4.2.1 菌株活化 | 第37页 |
4.2.2 样品制备 | 第37页 |
4.2.3 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌群体感应信号分子的影响 | 第37-38页 |
4.2.4 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌群体感应基因表达的影响 | 第38页 |
4.2.5 统计分析 | 第38页 |
4.3 结果与讨论 | 第38-41页 |
4.3.1 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌信号分子表达的影响 | 第38页 |
4.3.1.1 BITC对信号分子AI-2相对活性表达的影响 | 第38页 |
4.3.1.2 DADS对信号分子AI-2相对活性表达的影响 | 第38页 |
4.3.2 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌群体感应基因的影响 | 第38-40页 |
4.3.2.1 BITC对LuxS和SdiA表达的影响 | 第38-40页 |
4.3.2.2 DADS对LuxS和SdiA表达的影响 | 第40页 |
4.3.3 讨论 | 第40-41页 |
4.4 本章小结 | 第41-42页 |
第五章 含硫化合物对菌体生物特性的影响 | 第42-48页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第42-43页 |
5.1.1 实验菌株 | 第42页 |
5.1.2 实验样品 | 第42页 |
5.1.3 试剂与药品 | 第42-43页 |
5.2 实验方法 | 第43-44页 |
5.2.1 菌株活化 | 第43页 |
5.2.2 样品处理 | 第43页 |
5.2.3 总ATP和胞外ATP的测定 | 第43-44页 |
5.2.3.1 总ATP的测定 | 第43页 |
5.2.3.2 胞外ATP测定 | 第43-44页 |
5.2.4 扫描电镜(SEM) | 第44页 |
5.2.5 统计分析 | 第44页 |
5.3 结果与讨论 | 第44-47页 |
5.3.1 总ATP和胞外ATP测定 | 第44-45页 |
5.3.2 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌菌体形态的影响 | 第45页 |
5.3.3 讨论 | 第45-47页 |
5.4 本章小结 | 第47-48页 |
第六章 结论与展望 | 第48-50页 |
结论 | 第48页 |
展望 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56页 |