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含硫香料对产肠毒素大肠杆菌毒力基因的表达及抑制机理的研究

摘要第4-5页
abstract第5页
第一章 绪论第11-19页
    1.1 含硫化合物第11-13页
        1.1.1 含硫化合物的发展趋势第11页
        1.1.2 含硫化合物来源第11页
        1.1.3 含硫化合物结构特点第11-12页
        1.1.4 含硫化合物主要种类第12-13页
            1.1.4.1 异硫氰酸苄酯(BITC)第12页
            1.1.4.2 二烯丙基二硫醚(DADS)第12-13页
            1.1.4.3 异硫氰酸苯乙酯(PEITC)第13页
    1.2 产肠毒素大肠杆菌(ENTEROTOXIGENICESCHERICHIACOLIETEC)概述第13-17页
        1.2.1 生物学特性第13页
        1.2.2 致病机理第13-16页
            1.2.2.1 不耐热肠毒素(heat-labileenterotoxin,LT)第13-14页
            1.2.2.2 耐热肠毒素(Heat-stableenterotoxin,ST)第14-15页
            1.2.2.3 定值因子第15页
            1.2.2.4 鞭毛第15-16页
        1.2.3 外源物质对致病性产肠毒素大肠杆菌的抑制作用第16-17页
            1.2.3.1 海洋微生物溶菌酶第16页
            1.2.3.2 乳酸链球菌素第16页
            1.2.3.3 二氢杨梅素第16页
            1.2.3.4 中草药第16-17页
    1.3 群体感应概述第17页
        1.3.1 LuxS/AI-2型感应系统第17页
        1.3.2 SdiA第17页
    1.4 研究的目的及意义第17-19页
第二章 含硫化合物的抑菌活性研究第19-26页
    2.1 实验材料与仪器第19-20页
        2.1.1 实验菌株第19页
        2.1.2 实验样品第19页
        2.1.3 培养基第19页
        2.1.4 试剂及药品第19-20页
        2.1.5 仪器设备第20页
    2.2 实验方法第20-22页
        2.2.1 供试菌的活化第20-21页
        2.2.2 样品处理第21页
        2.2.3 最小抑菌浓度(MIC)的测定第21页
        2.2.4 生长曲线的测定第21-22页
    2.3 结果与讨论第22-25页
        2.3.1 BITC对产肠毒素大肠杆菌最小抑制浓度测定结果第22页
        2.3.2 PEITC对产肠毒素大肠杆菌最低抑制浓度测定结果第22页
        2.3.3 DADS对产肠毒素大肠杆菌最小抑制浓度测定结果第22-23页
        2.3.4 BITC对产肠毒素大肠杆菌生长的影响第23-24页
        2.3.5 PEITC对产肠毒素大肠杆菌生长曲线的影响第24页
        2.3.6 DADS对产肠毒素大肠杆菌生长的影响第24-25页
        2.3.7 讨论第25页
    2.4 本章小结第25-26页
第三章 含硫化合物对菌体毒力基因表达的影响第26-36页
    3.1 实验材料与仪器第26-28页
        3.1.1 实验菌株第26页
        3.1.2 实验样品第26页
        3.1.3 培养基的配置第26页
        3.1.4 实验试剂与药品第26-27页
        3.1.5 仪器设备第27-28页
    3.2 实验方法第28-30页
        3.2.1 菌株活化第28页
        3.2.2 样品制备第28页
        3.2.3 细菌总RNA提取与检测第28页
        3.2.4 除杂与cDNA合成第28-29页
        3.2.5 实时荧光定量PCR第29页
            3.2.5.1 引物特异性验证第29页
            3.2.5.2 含硫化合物对ETEC的毒力基因(st、lt)表达的影响第29页
        3.2.6 统计分析第29-30页
    3.3 结果与讨论第30-35页
        3.3.1 RNA的提取与检测第30-31页
        3.3.2 引物特异性检测第31页
        3.3.3 含硫化合物对ETEC毒力基因表达的影响第31-34页
            3.3.3.1 BITC对耐热毒素和不耐热毒素表达的影响第31-32页
            3.3.3.2 DADS对耐热肠毒素和不耐热肠毒素表达的影响第32-33页
            3.3.3.3 PEITC对耐热肠毒素和不耐热肠毒素表达的影响第33-34页
        3.3.4 讨论第34-35页
    3.4 本章小结第35-36页
第四章 含硫化合物对菌体群体感应基因表达的影响第36-42页
    4.1 实验材料与仪器第36-37页
        4.1.1 实验菌株第36页
        4.1.2 实验样品第36页
        4.1.3 培养基的配置第36页
        4.1.4 实验试剂与药品第36-37页
        4.1.5 仪器设备第37页
    4.2 实验方法第37-38页
        4.2.1 菌株活化第37页
        4.2.2 样品制备第37页
        4.2.3 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌群体感应信号分子的影响第37-38页
        4.2.4 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌群体感应基因表达的影响第38页
        4.2.5 统计分析第38页
    4.3 结果与讨论第38-41页
        4.3.1 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌信号分子表达的影响第38页
            4.3.1.1 BITC对信号分子AI-2相对活性表达的影响第38页
            4.3.1.2 DADS对信号分子AI-2相对活性表达的影响第38页
        4.3.2 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌群体感应基因的影响第38-40页
            4.3.2.1 BITC对LuxS和SdiA表达的影响第38-40页
            4.3.2.2 DADS对LuxS和SdiA表达的影响第40页
        4.3.3 讨论第40-41页
    4.4 本章小结第41-42页
第五章 含硫化合物对菌体生物特性的影响第42-48页
    5.1 实验材料与仪器第42-43页
        5.1.1 实验菌株第42页
        5.1.2 实验样品第42页
        5.1.3 试剂与药品第42-43页
    5.2 实验方法第43-44页
        5.2.1 菌株活化第43页
        5.2.2 样品处理第43页
        5.2.3 总ATP和胞外ATP的测定第43-44页
            5.2.3.1 总ATP的测定第43页
            5.2.3.2 胞外ATP测定第43-44页
        5.2.4 扫描电镜(SEM)第44页
        5.2.5 统计分析第44页
    5.3 结果与讨论第44-47页
        5.3.1 总ATP和胞外ATP测定第44-45页
        5.3.2 含硫化合物对产肠毒素大肠杆菌菌体形态的影响第45页
        5.3.3 讨论第45-47页
    5.4 本章小结第47-48页
第六章 结论与展望第48-50页
    结论第48页
    展望第48-50页
参考文献第50-56页
致谢第56页

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