| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 动物源性食品安全现状 | 第11页 |
| 1.2 兽药残留 | 第11页 |
| 1.3 氨苯砜概述 | 第11-12页 |
| 1.4 氨苯砜残留的危害 | 第12页 |
| 1.5 氨苯砜的残留限量规定 | 第12页 |
| 1.6 氨苯砜常规检测技术 | 第12-14页 |
| 1.6.1 高效液相色谱法 (HPLC) | 第13页 |
| 1.6.2 高效液相色谱法－质谱联用法(HPLC－MS) | 第13-14页 |
| 1.7 氨苯砜免疫检测技术 | 第14-16页 |
| 1.7.1 酶联免疫吸附技术(ELISA) | 第14-15页 |
| 1.7.2 免疫胶体金技术（GICA） | 第15-16页 |
| 1.8 本研究的目的、意义及内容 | 第16-17页 |
| 1.8.1 研究目的及意义 | 第16页 |
| 1.8.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 2 氨苯砜免疫原及包被原的制备及鉴定 | 第17-22页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 药品及试剂 | 第17页 |
| 2.1.2 缓冲溶液体系 | 第17-18页 |
| 2.1.3 仪器及设备 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 DDS免疫原和包被原的合成 | 第19页 |
| 2.2.2 DDS-BSA偶联物的鉴定 | 第19-20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-21页 |
| 2.3.1 目测法鉴定偶联物的合成 | 第20页 |
| 2.3.2 紫外分光光度计法鉴定偶联物的合成 | 第20页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE电泳分析法鉴定DDS-BSA的合成 | 第20-21页 |
| 2.4 本章小结 | 第21-22页 |
| 3 氨苯砜多克隆抗体的制备及纯化 | 第22-30页 |
| 3.1 材料 | 第22-24页 |
| 3.1.1 药品及试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.2 缓冲溶液体系 | 第23页 |
| 3.1.3 仪器及设备 | 第23页 |
| 3.1.4 试验动物与饲养条件 | 第23-24页 |
| 3.2 方法 | 第24-26页 |
| 3.2.1 DDS多克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
| 3.2.2 抗血清效价的测定[67] | 第25页 |
| 3.2.3 DDS抗体纯化及浓度的测定 | 第25-26页 |
| 3.2.4 间接 ELISA 测定抗体亲和力 | 第26页 |
| 3.3 结果与分析 | 第26-29页 |
| 3.3.1 间接ELISA法测定血清效价 | 第26-27页 |
| 3.3.2 抗体纯化及浓度测定 | 第27-28页 |
| 3.3.3 抗体亲和力的测定 | 第28-29页 |
| 3.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 4 氨苯砜直接竞争ELISA方法的建立及验证 | 第30-48页 |
| 4.1 材料 | 第30-31页 |
| 4.1.1 药品及试剂 | 第30-31页 |
| 4.1.2 仪器及设备 | 第31页 |
| 4.1.3 试验样品 | 第31页 |
| 4.2 方法 | 第31-35页 |
| 4.2.1 过碘酸钠法合成酶标抗原（DDS-HRP） | 第31-32页 |
| 4.2.2 ELISA法测定抗体亲和力 | 第32页 |
| 4.2.3 包被抗体浓度和酶标抗原工作浓度的初步确定 | 第32-33页 |
| 4.2.4 直接ELISA反应体系条件的优化 | 第33页 |
| 4.2.5 dcELISA标准工作曲线的建立 | 第33页 |
| 4.2.6 ELISA样品的检测 | 第33-34页 |
| 4.2.7 高效液相色谱法（HPLC）验证 | 第34-35页 |
| 4.3 结果与分析 | 第35-47页 |
| 4.3.1 ELISA法测定抗体亲和力 | 第35-36页 |
| 4.3.2 直接ELISA法包被抗体浓度和酶标抗原工作浓度的初步确定 | 第36-37页 |
| 4.3.3 直接 ELISA 反应体系条件的优化 | 第37-39页 |
| 4.3.4 dc ELISA 标准曲线的建立 | 第39-41页 |
| 4.3.5 ELISA样品的检测 | 第41-43页 |
| 4.3.6 高效液相色谱法（HPLC）验证 | 第43-47页 |
| 4.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 5 胶体金标记免疫检测技术及其应用 | 第48-60页 |
| 5.1 材料 | 第48-49页 |
| 5.1.1 药品及试剂 | 第48-49页 |
| 5.1.2 仪器及设备 | 第49页 |
| 5.1.3 试验样品 | 第49页 |
| 5.2 方法 | 第49-52页 |
| 5.2.1 胶体金的制备 | 第49页 |
| 5.2.2 免疫金的制备 | 第49-50页 |
| 5.2.3 胶体金标记试纸条的制备 | 第50-51页 |
| 5.2.4 胶体金试纸条检测条件的优化 | 第51页 |
| 5.2.5 样品的测定 | 第51-52页 |
| 5.3 结果及分析 | 第52-59页 |
| 5.3.1 胶体金质量的鉴定 | 第52-53页 |
| 5.3.2 胶体金与DDS抗体结合最适pH值的确定 | 第53-54页 |
| 5.3.3 稳定 1 mL胶体金所需抗体最小量的确定 | 第54-55页 |
| 5.3.4 胶体金试纸条检测条件的优化 | 第55-57页 |
| 5.3.5 最低检出限的确定 | 第57页 |
| 5.3.6 样品基质的消除 | 第57-58页 |
| 5.3.7 添加回收率 | 第58-59页 |
| 5.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 6 结论 | 第60-63页 |
| 6.1 全文总结 | 第60-61页 |
| 6.1.1 氨苯砜免疫原及包被原的制备及鉴定 | 第60页 |
| 6.1.2 dcELISA分析方法的建立及应用 | 第60-61页 |
| 6.1.3 胶体金标记免疫检测技术的建立及其应用 | 第61页 |
| 6.2 本研究的创新点 | 第61页 |
| 6.3 本研究的不足之处 | 第61-62页 |
| 6.4 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
