| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-35页 |
| 1.1 概述 | 第9页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第9-32页 |
| 1.2.1 微生物代谢工程发展概述 | 第9-11页 |
| 1.2.2 基于酿酒酵母平台代谢工程“新策略、新工具” | 第11-17页 |
| 1.2.3 氨基酸源化学品酿酒酵母细胞工厂构建 | 第17-26页 |
| 1.2.4 具有广泛功能与应用的鸟氨酸及其衍生物 | 第26-28页 |
| 1.2.5 微生物鸟氨酸代谢与代谢调控 | 第28-30页 |
| 1.2.6 鸟氨酸生产菌株代谢工程改造 | 第30-32页 |
| 1.3 本论文主要研究内容 | 第32-35页 |
| 1.3.1 利用酿酒酵母过量积累L-鸟氨酸主要面临的问题 | 第33页 |
| 1.3.2 本文主要研究内容 | 第33-35页 |
| 第二章 L-鸟氨酸合成途径模块化与抗L-精氨酸反馈调节工程酵母构建 | 第35-59页 |
| 2.1 前言 | 第35-36页 |
| 2.2 材料与方法 | 第36-47页 |
| 2.2.1 菌株、质粒和引物 | 第36-40页 |
| 2.2.2 试剂和仪器 | 第40-41页 |
| 2.2.3 微生物培养 | 第41页 |
| 2.2.4 分子生物学操作 | 第41-45页 |
| 2.2.5 分析方法 | 第45-47页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第47-57页 |
| 2.3.1 鸟氨酸合成途径模块化 | 第47-48页 |
| 2.3.2 鸟氨酸氨甲酰基转移酶转录下调促进鸟氨酸胞外分泌 | 第48-50页 |
| 2.3.3 鸟氨酸氨基转移酶基因CAR2敲除对工程酵母鸟氨酸积累的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.4 过表达氨基酸合成正调因子Gcn4p对工程酵母鸟氨酸积累的影响 | 第51-53页 |
| 2.3.5 过表达鸟氨酸乙酰基衍生物循环单一组分未明显提高鸟氨酸合成 | 第53-55页 |
| 2.3.6 鸟氨酸乙酰基衍生物循环强化促进鸟氨酸合成 | 第55-56页 |
| 2.3.7 药物氢离子逆向转运蛋白Aqr1p未介导鸟氨酸跨膜分泌 | 第56-57页 |
| 2.4 本章小结 | 第57-59页 |
| 第三章 去代谢区隔化效应以及中心氮代谢强化过量合成L-鸟氨酸 | 第59-79页 |
| 3.1 前言 | 第59页 |
| 3.2 材料与方法 | 第59-68页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第59-65页 |
| 3.2.2 试剂和仪器 | 第65-66页 |
| 3.2.3 微生物培养 | 第66页 |
| 3.2.4 分子生物学操作 | 第66-67页 |
| 3.2.5 分析方法 | 第67-68页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第68-78页 |
| 3.3.1 过表达鸟氨酸跨线粒体膜转运蛋白Ort1p促进鸟氨酸合成 | 第68-69页 |
| 3.3.2 过表达谷氨酸跨线粒体膜转运蛋白Agc1p促进谷氨酸跨线粒体膜转运 | 第69-71页 |
| 3.3.3 强化氨同化提高谷氨酸前体供应促进鸟氨酸积累 | 第71-72页 |
| 3.3.4 过表达α-酮戊二酸跨线粒体膜转运蛋白Odc1p对鸟氨酸合成的影响 | 第72-74页 |
| 3.3.5 谷氨酸脱氢酶线粒体锚定对鸟氨酸合成以及工程酵母生长的影响 | 第74-75页 |
| 3.3.6 构建来自原核“鸟氨酸乙酰基衍生物循环”嵌合途径促进鸟氨酸合成 | 第75-78页 |
| 3.4 本章小结 | 第78-79页 |
| 第四章 多维策略调控葡萄糖效应过量积累L-鸟氨酸 | 第79-101页 |
| 4.1 前言 | 第79-80页 |
| 4.2 材料与方法 | 第80-89页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第80-86页 |
| 4.2.2 试剂和仪器 | 第86页 |
| 4.2.3 微生物培养 | 第86-87页 |
| 4.2.4 分子生物学操作 | 第87-89页 |
| 4.2.5 分析方法 | 第89页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第89-98页 |
| 4.3.1 丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)扰动强化TCA循环代谢流 | 第89-92页 |
| 4.3.2 过量表达替代性NADH氧化酶AOX降低葡萄糖效应 | 第92-93页 |
| 4.3.3 NADH: 泛醌氧化还原酶过表达对鸟氨酸合成影响 | 第93-94页 |
| 4.3.4 葡萄糖转运钝化对葡萄糖效应以及鸟氨酸合成影响 | 第94-96页 |
| 4.3.5 过表达精氨酸酶基因CAR1强化尿素循环 | 第96-97页 |
| 4.3.6 KDHC组分弱化对TCA循环代谢流以及鸟氨酸合成影响 | 第97-98页 |
| 4.4 本章小结 | 第98-101页 |
| 主要结论与展望 | 第101-104页 |
| 主要结论 | 第101-102页 |
| 展望 | 第102-104页 |
| 论文创新点 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-114页 |
| 附录：作者在攻读博士期间发表的论文 | 第114页 |
