阪崎克罗诺杆菌双抗夹心酶联免疫方法的建立
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| ·食源性致病菌污染现状 | 第8页 |
| ·克罗诺杆菌的概述 | 第8-11页 |
| ·克罗诺杆菌的生物学特性 | 第9-10页 |
| ·克罗诺杆菌的毒理学研究 | 第10-11页 |
| ·克罗诺杆菌的污染来源 | 第11页 |
| ·克罗诺杆菌检测方法研究进展 | 第11-15页 |
| ·传统分离鉴定方法 | 第12页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第12-14页 |
| ·免疫学检测技术 | 第14-15页 |
| ·酶联免疫分析技术 | 第15-16页 |
| ·酶联免疫分析技术概述 | 第15页 |
| ·酶联免疫分析技术中使用的抗体种类 | 第15-16页 |
| ·论文研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| ·论文研究的主要内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18-22页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·多克隆抗体 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·实验菌株 | 第20-21页 |
| ·人工接种样品 | 第21页 |
| ·溶液的配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的培养 | 第22页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌计数 | 第22页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌免疫原的制备 | 第22页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第22-27页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法的建立 | 第27-29页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法性能指标评价 | 第29-30页 |
| ·人工接种婴儿奶粉 | 第30-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-48页 |
| ·OD_(600)值与活菌数的相关曲线 | 第31页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第31-36页 |
| ·小鼠抗血清效价的测定 | 第31-33页 |
| ·细胞融合及筛选 | 第33-35页 |
| ·杂交瘤细胞克隆和亚克隆 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第36页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第36-37页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法的建立 | 第37-43页 |
| ·捕获抗体与检测抗体的选择 | 第37-38页 |
| ·捕获抗体包被量的优化 | 第38页 |
| ·检测抗体稀释倍数的优化 | 第38-39页 |
| ·封闭液种类的选择 | 第39-40页 |
| ·封闭时间的优化 | 第40页 |
| ·样品稀释液的选择 | 第40-41页 |
| ·抗体作用时间的确定 | 第41-42页 |
| ·HRP-羊抗兔抗体作用时间的确定 | 第42页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法标准曲线的绘制 | 第42-43页 |
| ·双抗夹心ELSIA检测方法性能指标评价 | 第43-46页 |
| ·特异性的测定 | 第43-44页 |
| ·检测限与定量限 | 第44-45页 |
| ·精密度 | 第45-46页 |
| ·婴儿奶粉样品人工接种阪崎克罗诺杆菌检测 | 第46-48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 5 展望 | 第49-50页 |
| 6 参考文献 | 第50-56页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第56-57页 |
| 8 致谢 | 第57页 |
