四环素酶联免疫检测方法的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-23页 |
| ·食品安全现状 | 第8-9页 |
| ·兽药残留概述 | 第9-11页 |
| ·兽药残留产生的原因 | 第9页 |
| ·兽药残留的危害 | 第9-11页 |
| ·兽药残留的控制措施 | 第11页 |
| ·免疫分析研究概述 | 第11-15页 |
| ·同位素免疫分析方法 | 第11-12页 |
| ·非同位素免疫分析方法 | 第12-14页 |
| ·ELISA的应用 | 第14-15页 |
| ·四环素概述 | 第15-22页 |
| ·四环素的理化性质 | 第16-17页 |
| ·四环素的药物毒理学作用与危害 | 第17-18页 |
| ·四环素残留现状及管理 | 第18-19页 |
| ·四环素残留的检测方法 | 第19-22页 |
| ·论文研究的目的及意义 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·实验药品 | 第23-24页 |
| ·实验试剂 | 第24页 |
| ·仪器及设备 | 第24-25页 |
| ·基质样品 | 第25页 |
| ·常用溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·四环素免疫原的制备 | 第26-29页 |
| ·四环素包被原的制备 | 第29页 |
| ·四环素多克隆抗体制备 | 第29-31页 |
| ·四环素间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第31-32页 |
| ·四环素抗体特异性的测定 | 第32页 |
| ·样品前处理 | 第32-33页 |
| ·样品的添加回收 | 第33页 |
| ·四环素间接竞争ELISA检测方法性能指标的评价 | 第33-34页 |
| ·商品化试剂盒验证 | 第34-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-56页 |
| ·四环素人工抗原的制备与鉴定 | 第35-40页 |
| ·甲醛一步连接法 | 第35-36页 |
| ·戊二醛一步连接法 | 第36-37页 |
| ·重氮法 | 第37-40页 |
| ·四环素抗体的制备 | 第40-41页 |
| ·抗血清效价与特异性的测定 | 第41页 |
| ·抗体的纯化 | 第41页 |
| ·四环素间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第41-48页 |
| ·包被原的筛选 | 第41-42页 |
| ·包被量和抗体稀释度的优化 | 第42-44页 |
| ·抗体稀释缓冲溶液的筛选 | 第44-45页 |
| ·封闭液的筛选 | 第45-46页 |
| ·HRP标记羊抗兔二抗稀释度的优化 | 第46-47页 |
| ·四环素间接竞争ELISA检测方法标准曲线的绘制 | 第47-48页 |
| ·四环素抗体的特异性 | 第48页 |
| ·样品添加回收实验 | 第48-53页 |
| ·牛奶样品的添加回收 | 第48-49页 |
| ·蜂蜜样品的添加回收 | 第49页 |
| ·猪肉样品的添加回收 | 第49-50页 |
| ·牛肉样品的添加回收 | 第50页 |
| ·鸡肉样品的添加回收 | 第50-51页 |
| ·鱿鱼样品的添加回收 | 第51页 |
| ·大眼鲷鱼样品的添加回收 | 第51-52页 |
| ·比目鱼样品的添加回收 | 第52页 |
| ·虾样品的添加回收 | 第52-53页 |
| ·四环素间接竞争ELISA检测方法性能指标的评价 | 第53-54页 |
| ·检测限 | 第53页 |
| ·精密度 | 第53-54页 |
| ·温度对抗体稳定性的影响 | 第54页 |
| ·商品化试剂盒验证 | 第54-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-64页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第64-65页 |
| 8 致谢 | 第65页 |