木聚糖酶XYNZG在乳酸克鲁维酵母中的表达及在面包烘焙中的应用研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 縮略词 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-27页 |
| ·研究背景和意义 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的研究进展 | 第14-20页 |
| ·木聚糖的结构 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶的多样性和多域性 | 第15页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的克隆和表达 | 第16-18页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶的研究趋势 | 第19-20页 |
| ·乳酸克鲁维酵母 | 第20-23页 |
| ·乳酸克鲁维酵母的研究历史 | 第20-21页 |
| ·乳酸克鲁维酵母的基因操作工具 | 第21-23页 |
| ·乳酸克鲁维酵母表达系统的优点 | 第23页 |
| ·面包改良剂的组成及其作用 | 第23-26页 |
| ·氧化剂对面包的改良作用 | 第24页 |
| ·乳化剂对面包的改良作用 | 第24-25页 |
| ·营养强化剂对面包的改良作用 | 第25页 |
| ·酶制剂对面包的改良作用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的 | 第26-27页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第27-39页 |
| ·材料 | 第27-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·试剂和酶 | 第28页 |
| ·仪器和设备 | 第28-29页 |
| ·实验主要涉及的溶液 | 第29-30页 |
| ·交联木聚糖的制备 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-39页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第31页 |
| ·凝胶回收目的DNA片段 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA的抽提及纯化 | 第32页 |
| ·大肠感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌的转化及重组子鉴定 | 第33页 |
| ·乳酸克鲁维酵母感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
| ·重组乳酸克鲁维酵母菌株的鉴定 | 第34页 |
| ·外源基因在乳酸克鲁维酵母中的摇瓶诱导表达 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE检测表达蛋白 | 第34-35页 |
| ·活性PAGE电泳检测表达木聚糖酶的活性 | 第35页 |
| ·木聚糖酶活性测定 | 第35-37页 |
| ·木聚糖酶酶学性质的测定 | 第37页 |
| ·木聚糖酶在不同培养基中表达的比较 | 第37-38页 |
| ·木聚糖酶水解产物分析 | 第38页 |
| ·面包的制作与品质评估 | 第38-39页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第39-52页 |
| ·表达载体pKLAC2-xynZG的构建 | 第39-41页 |
| ·木聚糖酶xynZG的获得 | 第39页 |
| ·构建重组表达载体pKLAC2-xynZG | 第39-40页 |
| ·重组表达载体pKLAC2-xynZG的验证 | 第40-41页 |
| ·乳酸克鲁维酵母的转化与重组菌株的筛选 | 第41-43页 |
| ·重组表达载体pKLAC2-xynZG的线性化 | 第41-42页 |
| ·乳酸克鲁维酵母的转化与筛选 | 第42-43页 |
| ·重组木聚糖酶XYNZG的诱导表达 | 第43-44页 |
| ·重组木聚糖酶XYNZG酶学性质分析 | 第44-47页 |
| ·最适反应温度的测定 | 第44-45页 |
| ·最适反应pH的测定 | 第45页 |
| ·酶的温度敏感性 | 第45-46页 |
| ·酶的pH耐受性 | 第46页 |
| ·金属离子和化学试剂对酶活性的影响 | 第46-47页 |
| ·不同表达培养基对重组木聚糖酶XYNZG的影响 | 第47-48页 |
| ·重组木聚糖酶XYNZG水解产物的分析 | 第48-49页 |
| ·重组木聚糖酶XYNZG对面包改良作用的研究 | 第49-52页 |
| 第四部分 讨论与展望 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·表达培养基的优化 | 第52页 |
| ·重组木聚糖酶XYNZG的水解产物 | 第52-53页 |
| ·重组木聚糖酶XYNZG在面包制作中的应用 | 第53页 |
| ·展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
