碧螺春脂肪氧合酶的构象与酶学特性研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| ·研究背景及意义 | 第9-10页 |
| ·脂肪氧合酶概述 | 第10页 |
| ·脂肪氧合酶的催化机理 | 第10-11页 |
| ·不同来源的LOX及其研究进展 | 第11-12页 |
| ·外界条件对LOX催化作用的影响 | 第12-13页 |
| ·温度的影响 | 第12页 |
| ·pH的影响 | 第12页 |
| ·底物和抗氧化剂的影响 | 第12-13页 |
| ·脂肪氧合酶在茶叶加工中的作用 | 第13-14页 |
| ·萎凋 | 第13页 |
| ·杀青 | 第13页 |
| ·发酵 | 第13-14页 |
| ·农产品灭酶的常用方法和红外技术介绍 | 第14-15页 |
| ·农产品加工中的常见灭酶方法 | 第14页 |
| ·红外同步灭酶干燥技术原理及应用 | 第14-15页 |
| ·研究目的和内容 | 第15-17页 |
| ·研究目的 | 第15页 |
| ·研究内容 | 第15-17页 |
| 2 实验材料与方法 | 第17-21页 |
| ·材料与试剂 | 第17页 |
| ·实验设备 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-21页 |
| ·反应底物的制备 | 第17页 |
| ·LOX活性的测定 | 第17页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第17页 |
| ·LOX提取条件的确定 | 第17-18页 |
| ·pH对LOX提取的影响 | 第17-18页 |
| ·triton浓度对LOX提取的影响 | 第18页 |
| ·PVP含量对LOX提取的影响 | 第18页 |
| ·提取条件的设计与优化 | 第18页 |
| ·碧螺春LOX的纯化 | 第18-19页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第18页 |
| ·Sepharose FF阴离子柱层析 | 第18-19页 |
| ·Sephadex G-200层析 | 第19页 |
| ·茶叶脂肪氧合酶的SDS-PAGE鉴定 | 第19页 |
| ·绿茶中脂肪氧合酶的酶学性质 | 第19-20页 |
| ·LOX的贮藏稳定性 | 第19页 |
| ·最适底物浓度 | 第19页 |
| ·金属离子对LOX活力的影响 | 第19页 |
| ·抑制剂对LOX活力的影响 | 第19页 |
| ·LOX的热稳定性 | 第19-20页 |
| ·不同红外条件下碧螺春脂肪氧合酶的结构变化 | 第20-21页 |
| ·红外条件的确定 | 第20页 |
| ·LOX失活后二级构象 | 第20页 |
| ·LOX失活后三级构象 | 第20-21页 |
| 3 结果与讨论 | 第21-41页 |
| ·LOX的提取与纯化 | 第21-26页 |
| ·提取液pH对LOX提取的影响 | 第21页 |
| ·triton浓度对LOX提取效率的影响 | 第21-22页 |
| ·PVP含量对LOX提取效率的影响 | 第22-23页 |
| ·LOX提取条件优化实验 | 第23-26页 |
| ·实验设计方案及实验结果 | 第23-24页 |
| ·响应曲面分析 | 第24-25页 |
| ·最佳方案的预测与验证 | 第25-26页 |
| ·LOX纯化 | 第26-29页 |
| ·不同饱和度硫酸铵对LOX沉淀的影响 | 第26-27页 |
| ·Sepharose FF 层析 | 第27页 |
| ·Sephadex G-200层析 | 第27-29页 |
| ·碧螺春中LOX的分子质量 | 第29页 |
| ·LOX的酶学特性 | 第29-36页 |
| ·LOX的贮藏稳定性 | 第29-30页 |
| ·LOX的构象随贮藏时间的变化趋势 | 第30-32页 |
| ·最适底物浓度 | 第32-33页 |
| ·金属离子对LOX活力的影响 | 第33页 |
| ·抑制剂对LOX活力的影响 | 第33-34页 |
| ·LOX的热稳定性 | 第34-35页 |
| ·不同温度处理对LOX构象的影响 | 第35-36页 |
| ·红外条件下LOX的结构变化 | 第36-41页 |
| ·不同红外条件处理对LOX活性的影响 | 第36-38页 |
| ·红外条件下失活后LOX的二级构象 | 第38-39页 |
| ·红外条件下失活后LOX的三级构象 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 4 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文（专利） | 第49页 |
