| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| ·纯生啤酒的发展和现状 | 第11-12页 |
| ·纯生啤酒的定义 | 第11页 |
| ·瓶装纯生啤酒的发展和现状 | 第11页 |
| ·青岛纯生啤酒的发展和现状 | 第11页 |
| ·纯生啤酒质量的行业难题 | 第11-12页 |
| ·啤酒泡沫的研究进展 | 第12-14页 |
| ·啤酒泡沫的特性 | 第12页 |
| ·啤酒泡沫的测定技术 | 第12页 |
| ·啤酒泡沫形成的物理学解释 | 第12页 |
| ·啤酒泡沫的化学组成及其对泡沫的影响机理 | 第12-14页 |
| ·酵母蛋白酶A的研究进展 | 第14-17页 |
| ·酵母蛋白酶A的形成 | 第14-15页 |
| ·酵母蛋白酶A的分泌 | 第15页 |
| ·酵母蛋白酶A的结构 | 第15-16页 |
| ·酵母蛋白酶A的生物功能 | 第16页 |
| ·酵母蛋白酶A的检测方法 | 第16-17页 |
| ·酵母蛋白酶A酶学特性和抑制剂 | 第17页 |
| ·啤酒酿造过程中蛋白酶A活性的变化和影响因素 | 第17页 |
| ·啤酒酵母S.carlsbergensis的倍体特性 | 第17-20页 |
| ·S.carlsbergensis的由来 | 第17-18页 |
| ·S.carlsbergensis的倍性和染色体组成的复杂性 | 第18-20页 |
| ·分子生物学技术与酵母的育种 | 第20页 |
| ·酵母基因中断技术 | 第20-21页 |
| ·酵母基因中断技术的创立 | 第20页 |
| ·PCR介导的酵母基因中断技术 | 第20-21页 |
| ·酵母基因的多重中断技术 | 第21页 |
| ·立题背景和主要研究内容 | 第21-22页 |
| ·立题背景 | 第21-22页 |
| ·主要研究内容 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-31页 |
| 第二章 啤酒泡沫组成的复杂性 | 第31-48页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-35页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·试剂配制 | 第32页 |
| ·啤酒样品 | 第32页 |
| ·主要实验方法 | 第32-34页 |
| ·主要分析方法 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-44页 |
| ·纯生啤酒及泡沫1、2蛋白的组成氨基酸差异 | 第35-36页 |
| ·纯生啤酒及泡沫1、2蛋白的一维电泳结果 | 第36页 |
| ·纯生啤酒及泡沫1、2蛋白的二维电泳结果 | 第36-37页 |
| ·啤酒泡沫蛋白中LTP1糖基化形式的检出 | 第37-38页 |
| ·纯生啤酒及泡沫蛋白的LC/MS/MS检测结果 | 第38-44页 |
| ·展望 | 第44页 |
| ·本章小结 | 第44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 第三章 纯生啤酒生产中蛋白酶A的变化及对泡沫稳定性的影响 | 第48-57页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·仪器 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·试剂配制 | 第49页 |
| ·主要实验方法 | 第49页 |
| ·主要分析方法 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-54页 |
| ·蛋白酶A检测方法的改进 | 第50页 |
| ·蛋白酶A对纯生啤酒泡沫稳定性影响的普遍性 | 第50-52页 |
| ·青啤现有纯生啤酒生产菌株的核型差异 | 第52页 |
| ·酵母使用代数对蛋白酶A变化的影响 | 第52-53页 |
| ·杀菌单位对成品啤酒蛋白酶A、蔗糖酶酶活的影响 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第四章 蛋白酶A部分缺失型酵母菌株的构建 | 第57-78页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料与方法 | 第57-62页 |
| ·菌株和质粒 | 第57页 |
| ·仪器 | 第57-58页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第58页 |
| ·试剂配制 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58-59页 |
| ·PCR引物 | 第59-60页 |
| ·主要实验方法 | 第60-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-75页 |
| ·S.carlsbergensis PEP4基因测序 | 第62页 |
| ·pSH-Zeo质粒的构建 | 第62-63页 |
| ·出发菌株的PCR验证 | 第63页 |
| ·第一个PEP4等位基因的敲除 | 第63-68页 |
| ·第二个PEP4等位基因的敲除 | 第68-75页 |
| ·本章小结 | 第75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 第五章 低蛋白酶A改良菌株的筛选及其遗传稳定性 | 第78-87页 |
| ·引言 | 第78页 |
| ·材料与方法 | 第78-81页 |
| ·酵母菌株 | 第78页 |
| ·仪器 | 第78-79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·培养基 | 第79页 |
| ·主要实验方法 | 第79-80页 |
| ·主要分析方法 | 第80-81页 |
| ·结果与讨论 | 第81-85页 |
| ·突变菌株的初筛 | 第81-82页 |
| ·突变菌株的复筛 | 第82-83页 |
| ·改良菌株突变PEP4基因的遗传稳定性 | 第83页 |
| ·改良菌株与出发菌株的性能比较 | 第83-85页 |
| ·本章小结 | 第85页 |
| 参考文献 | 第85-87页 |
| 第六章 低蛋白酶A改良菌株的酿造应用中试 | 第87-96页 |
| ·引言 | 第87页 |
| ·材料与方法 | 第87-89页 |
| ·菌株 | 第87页 |
| ·仪器 | 第87-88页 |
| ·主要试剂 | 第88页 |
| ·培养基 | 第88页 |
| ·主要实验方法 | 第88-89页 |
| ·主要分析方法 | 第89页 |
| ·结果与讨论 | 第89-94页 |
| ·出发菌株的PEP4基因验证 | 第89页 |
| ·发酵过程中相关指标变化情况 | 第89-93页 |
| ·终了发酵液的指标对比 | 第93-94页 |
| ·本章小结 | 第94页 |
| 参考文献 | 第94-96页 |
| 主要结论 | 第96-98页 |
| 创新点 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 附表 | 第100-103页 |
| 攻读博士期间发表论文清单 | 第103页 |