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基于纳米金增强效应新型生物传感方法构建及其在食源性致病菌毒力基因及miRNAs检测的应用

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
缩略语索引第10-15页
第一章 绪论第15-37页
    1.1 食源性致病菌及其毒力基因第15-16页
        1.1.1 食源性致病菌第15页
        1.1.2 食源性致病菌毒力基因第15-16页
    1.2 食源性致病菌及其毒力因子检测现状第16-22页
        1.2.1 传统培养检测方法第16页
        1.2.2 免疫检测方法第16-17页
        1.2.3 基于分子生物学检测方法第17-18页
        1.2.4 纳米颗粒增强效应生物传感检测方法第18-22页
    1.3 miRNAs第22-25页
        1.3.1 miRNAs概述第22-23页
        1.3.2 miRNAs与疾病第23-24页
        1.3.3 miRNAs与食源性致病菌第24-25页
    1.4 miRNAs检测现状第25-33页
        1.4.1 传统检测miRNAs方法的研究第25-26页
        1.4.2 基于荧光共振能量转移构建miRNAs传感检测方法第26-29页
        1.4.3 基于toehold介导的DNA链置换构建miRNAs传感检测方法第29-33页
    1.5 立题背景与意义第33-34页
    1.6 本课题主要研究内容第34-37页
第二章 金银核壳纳米棒的合成及其表征第37-45页
    2.1 前言第37页
    2.2 材料与设备第37页
        2.2.1 主要试剂与材料第37页
        2.2.2 主要仪器与设备第37页
    2.3 实验方法第37-38页
        2.3.1 金种的制备第37页
        2.3.2 AuNRs的合成第37-38页
        2.3.3 Au@AgNRs的制备第38页
        2.3.4 Au@AgNRs合成过程的监控第38页
    2.4 结果与讨论第38-44页
        2.4.1 单因素及Au@AgNRs最优生长条件的确定第38-41页
        2.4.2 不同纵横比Au@Ag纳米棒的制备第41-42页
        2.4.3 纳米棒生长过程表征及其生长机理的探讨第42-44页
    2.5 本章小结第44-45页
第三章 构建金银核壳纳米棒表面增强荧光“ON-OFF”检测大肠杆菌O157:H7毒力基因eae A第45-58页
    3.1 前言第45页
    3.2 材料与设备第45-46页
        3.2.1 主要试剂与材料第45-46页
        3.2.2 主要仪器与设备第46页
    3.3 实验方法第46-47页
        3.3.1 金纳米棒和金纳米十字的制备第46-47页
        3.3.2 Au@AgNRs的制备第47页
        3.3.3 Au@AgNRs表面偶联ssDNA探针第47页
        3.3.4 Au@AgNRs与Cy3荧光分子间距对Cy3荧光强度的探究第47页
        3.3.5 Au@AgNRs表面增强荧光“ON-OFF”型荧光检测方法的构建第47页
    3.4 结果与讨论第47-56页
        3.4.1 Au@AgNRs表面增强荧光“ON-OFF”型eaeA核酸传感器的构建第47-48页
        3.4.2 Au@AgNRs结构表征第48-50页
        3.4.3 Au@AgNRs表面修饰ssDNA的表征第50-51页
        3.4.4 探讨影响Au@AgNRs表面增强Cy3荧光强度的因素第51-53页
        3.4.5 Au@AgNRs核酸传感器检测大肠杆菌O157:H7毒力基因eaeA第53-55页
        3.4.6 Au@AgNRs核酸传感器的特异性及回收率的测定第55-56页
    3.5 本章小结第56-58页
第四章 构建金纳米十字@二硫化钼异源二聚体电化学检测大肠杆菌O157:H7毒力基因eaeA第58-72页
    4.1 前言第58-59页
    4.2 材料与设备第59-60页
        4.2.1 主要试剂与材料第59页
        4.2.2 主要仪器与设备第59-60页
    4.3 实验方法第60-61页
        4.3.1 金纳米十字的制备第60页
        4.3.2 金纳米十字表面功能化单链DNA第60页
        4.3.3 丝网印刷电极表面AuNCs@MoS_2的修饰及其电化学行为的测定第60页
        4.3.4 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感器的制备及其条件优化第60-61页
        4.3.5 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感检测毒力基因eaeA第61页
        4.3.6 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感器的检测特异性第61页
    4.4 结果与讨论第61-71页
        4.4.1 实验原理第61-62页
        4.4.2 AuNCs以及MoS_2修饰前后结构表征第62-64页
        4.4.3 MoS_2的表征以及修饰后的丝网印刷电极电化学行为表征第64-66页
        4.4.4 AuNCs@MoS_2异源二聚体构建电化学传感器第66-68页
        4.4.5 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学检测毒力基因eaeA第68-70页
        4.4.6 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感器的特异性评估第70-71页
    4.5 本章小结第71-72页
第五章 基于“FRET-SEF”荧光信号的金纳米棒-金纳米十字二聚体检测微小RNA含量及其胞内成像第72-94页
    5.1 前言第72-73页
    5.2 材料与设备第73-74页
        5.2.1 主要试剂与材料第73页
        5.2.2 主要仪器与设备第73-74页
    5.3 实验方法第74-76页
        5.3.1 AuNR以及AuNC的合成第74页
        5.3.2 AuNR表面修饰单链DNA第74页
        5.3.3 有限差分时域(FDTDSolutions)仿真模拟第74页
        5.3.4 AuNR-AuNC二聚体传感器的构建第74-75页
        5.3.5 特异性分析第75页
        5.3.6 AuNR-AuNC二聚体探针细胞毒性测定第75页
        5.3.7 细胞内AuNR-AuNC二聚体探针检测miRNA传感器的构建第75页
        5.3.8 细胞内AuNR-AuNC二聚体探针特异性的测定第75-76页
        5.3.9 AuNR-AuNC二聚体探针用于测定外源性物质对胞内miRNA表达量的影响第76页
    5.4 结果与讨论第76-92页
        5.4.1 实验原理第76-77页
        5.4.2 金纳米棒表面修饰单链DNA表征第77-80页
        5.4.3 AuNR-AuNC二聚体探针的表征以及光学特性的探讨第80-82页
        5.4.4 AuNR-AuNC二聚体探针对胞外miRNA的测定及其特异性第82-84页
        5.4.5 AuNR-AuNC二聚体探针胞内稳定性和毒性的测定第84-87页
        5.4.6 AuNR-AuNC二聚体探针胞内测定miRNA光学信号表征第87-90页
        5.4.7 外源性物质刺激细胞后miRNA表达量的测定第90-92页
    5.5 本章小结第92-94页
第六章 金纳米花@石墨烯量子点异源二聚体的构建及其在体外体内对miRNA-34a的测定第94-121页
    6.1 前言第94-95页
    6.2 材料与设备第95-96页
        6.2.1 主要试剂与材料第95页
        6.2.2 主要仪器与设备第95-96页
    6.3 实验方法第96-99页
        6.3.1 AuNFs的合成第96页
        6.3.2 红色石墨烯量子点的制备第96页
        6.3.3 纳米材料表面功能化单链DNA第96页
        6.3.4 AuNF@GQDs异源二聚体的构建第96-97页
        6.3.5 AuNF@GQDs异源二聚体检测miRNA-34a增敏探针的构建第97页
        6.3.6 特异性分析第97页
        6.3.7 AuNF@GQDs异源二聚体细胞毒性及稳定性的测定第97页
        6.3.8 细胞内AuNF@GQDs异源二聚体的构建第97-98页
        6.3.9 实时定量(qRT-PCR)检测miRNAs表达量第98页
        6.3.10 AuNF@GQDs异源二聚体的体内成像及其毒性评价第98-99页
    6.4 结果与讨论第99-119页
        6.4.1 实验原理第99-100页
        6.4.2 AuNFs和GQDs修饰ssDNA前后结构表征和光谱分析第100-102页
        6.4.3 AuNF@GQDs异源二聚体结构表征及光学性能探讨第102-105页
        6.4.4 AuNF@GQDs异源二聚体的稳定性及其细胞毒性评估第105-107页
        6.4.5 基于FRET“off”到DNA循环“on”的AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针胞外测定miRNA-34a第107-110页
        6.4.6 AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针用于活细胞中荧光成像第110-114页
        6.4.7 AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针用于检测活细胞中miRNA-34a的表达量第114-116页
        6.4.8 AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针用于动物体内检测miRNA-34a的表达水平第116-119页
    6.5 本章小结第119-121页
主要结论与展望第121-123页
    主要结论第121-122页
    展望第122-123页
致谢第123-125页
参考文献第125-140页
本论文创新点第140-141页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第141页

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