摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语索引 | 第10-15页 |
第一章 绪论 | 第15-37页 |
1.1 食源性致病菌及其毒力基因 | 第15-16页 |
1.1.1 食源性致病菌 | 第15页 |
1.1.2 食源性致病菌毒力基因 | 第15-16页 |
1.2 食源性致病菌及其毒力因子检测现状 | 第16-22页 |
1.2.1 传统培养检测方法 | 第16页 |
1.2.2 免疫检测方法 | 第16-17页 |
1.2.3 基于分子生物学检测方法 | 第17-18页 |
1.2.4 纳米颗粒增强效应生物传感检测方法 | 第18-22页 |
1.3 miRNAs | 第22-25页 |
1.3.1 miRNAs概述 | 第22-23页 |
1.3.2 miRNAs与疾病 | 第23-24页 |
1.3.3 miRNAs与食源性致病菌 | 第24-25页 |
1.4 miRNAs检测现状 | 第25-33页 |
1.4.1 传统检测miRNAs方法的研究 | 第25-26页 |
1.4.2 基于荧光共振能量转移构建miRNAs传感检测方法 | 第26-29页 |
1.4.3 基于toehold介导的DNA链置换构建miRNAs传感检测方法 | 第29-33页 |
1.5 立题背景与意义 | 第33-34页 |
1.6 本课题主要研究内容 | 第34-37页 |
第二章 金银核壳纳米棒的合成及其表征 | 第37-45页 |
2.1 前言 | 第37页 |
2.2 材料与设备 | 第37页 |
2.2.1 主要试剂与材料 | 第37页 |
2.2.2 主要仪器与设备 | 第37页 |
2.3 实验方法 | 第37-38页 |
2.3.1 金种的制备 | 第37页 |
2.3.2 AuNRs的合成 | 第37-38页 |
2.3.3 Au@AgNRs的制备 | 第38页 |
2.3.4 Au@AgNRs合成过程的监控 | 第38页 |
2.4 结果与讨论 | 第38-44页 |
2.4.1 单因素及Au@AgNRs最优生长条件的确定 | 第38-41页 |
2.4.2 不同纵横比Au@Ag纳米棒的制备 | 第41-42页 |
2.4.3 纳米棒生长过程表征及其生长机理的探讨 | 第42-44页 |
2.5 本章小结 | 第44-45页 |
第三章 构建金银核壳纳米棒表面增强荧光“ON-OFF”检测大肠杆菌O157:H7毒力基因eae A | 第45-58页 |
3.1 前言 | 第45页 |
3.2 材料与设备 | 第45-46页 |
3.2.1 主要试剂与材料 | 第45-46页 |
3.2.2 主要仪器与设备 | 第46页 |
3.3 实验方法 | 第46-47页 |
3.3.1 金纳米棒和金纳米十字的制备 | 第46-47页 |
3.3.2 Au@AgNRs的制备 | 第47页 |
3.3.3 Au@AgNRs表面偶联ssDNA探针 | 第47页 |
3.3.4 Au@AgNRs与Cy3荧光分子间距对Cy3荧光强度的探究 | 第47页 |
3.3.5 Au@AgNRs表面增强荧光“ON-OFF”型荧光检测方法的构建 | 第47页 |
3.4 结果与讨论 | 第47-56页 |
3.4.1 Au@AgNRs表面增强荧光“ON-OFF”型eaeA核酸传感器的构建 | 第47-48页 |
3.4.2 Au@AgNRs结构表征 | 第48-50页 |
3.4.3 Au@AgNRs表面修饰ssDNA的表征 | 第50-51页 |
3.4.4 探讨影响Au@AgNRs表面增强Cy3荧光强度的因素 | 第51-53页 |
3.4.5 Au@AgNRs核酸传感器检测大肠杆菌O157:H7毒力基因eaeA | 第53-55页 |
3.4.6 Au@AgNRs核酸传感器的特异性及回收率的测定 | 第55-56页 |
3.5 本章小结 | 第56-58页 |
第四章 构建金纳米十字@二硫化钼异源二聚体电化学检测大肠杆菌O157:H7毒力基因eaeA | 第58-72页 |
4.1 前言 | 第58-59页 |
4.2 材料与设备 | 第59-60页 |
4.2.1 主要试剂与材料 | 第59页 |
4.2.2 主要仪器与设备 | 第59-60页 |
4.3 实验方法 | 第60-61页 |
4.3.1 金纳米十字的制备 | 第60页 |
4.3.2 金纳米十字表面功能化单链DNA | 第60页 |
4.3.3 丝网印刷电极表面AuNCs@MoS_2的修饰及其电化学行为的测定 | 第60页 |
4.3.4 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感器的制备及其条件优化 | 第60-61页 |
4.3.5 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感检测毒力基因eaeA | 第61页 |
4.3.6 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感器的检测特异性 | 第61页 |
4.4 结果与讨论 | 第61-71页 |
4.4.1 实验原理 | 第61-62页 |
4.4.2 AuNCs以及MoS_2修饰前后结构表征 | 第62-64页 |
4.4.3 MoS_2的表征以及修饰后的丝网印刷电极电化学行为表征 | 第64-66页 |
4.4.4 AuNCs@MoS_2异源二聚体构建电化学传感器 | 第66-68页 |
4.4.5 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学检测毒力基因eaeA | 第68-70页 |
4.4.6 AuNCs@MoS_2异源二聚体电化学传感器的特异性评估 | 第70-71页 |
4.5 本章小结 | 第71-72页 |
第五章 基于“FRET-SEF”荧光信号的金纳米棒-金纳米十字二聚体检测微小RNA含量及其胞内成像 | 第72-94页 |
5.1 前言 | 第72-73页 |
5.2 材料与设备 | 第73-74页 |
5.2.1 主要试剂与材料 | 第73页 |
5.2.2 主要仪器与设备 | 第73-74页 |
5.3 实验方法 | 第74-76页 |
5.3.1 AuNR以及AuNC的合成 | 第74页 |
5.3.2 AuNR表面修饰单链DNA | 第74页 |
5.3.3 有限差分时域(FDTDSolutions)仿真模拟 | 第74页 |
5.3.4 AuNR-AuNC二聚体传感器的构建 | 第74-75页 |
5.3.5 特异性分析 | 第75页 |
5.3.6 AuNR-AuNC二聚体探针细胞毒性测定 | 第75页 |
5.3.7 细胞内AuNR-AuNC二聚体探针检测miRNA传感器的构建 | 第75页 |
5.3.8 细胞内AuNR-AuNC二聚体探针特异性的测定 | 第75-76页 |
5.3.9 AuNR-AuNC二聚体探针用于测定外源性物质对胞内miRNA表达量的影响 | 第76页 |
5.4 结果与讨论 | 第76-92页 |
5.4.1 实验原理 | 第76-77页 |
5.4.2 金纳米棒表面修饰单链DNA表征 | 第77-80页 |
5.4.3 AuNR-AuNC二聚体探针的表征以及光学特性的探讨 | 第80-82页 |
5.4.4 AuNR-AuNC二聚体探针对胞外miRNA的测定及其特异性 | 第82-84页 |
5.4.5 AuNR-AuNC二聚体探针胞内稳定性和毒性的测定 | 第84-87页 |
5.4.6 AuNR-AuNC二聚体探针胞内测定miRNA光学信号表征 | 第87-90页 |
5.4.7 外源性物质刺激细胞后miRNA表达量的测定 | 第90-92页 |
5.5 本章小结 | 第92-94页 |
第六章 金纳米花@石墨烯量子点异源二聚体的构建及其在体外体内对miRNA-34a的测定 | 第94-121页 |
6.1 前言 | 第94-95页 |
6.2 材料与设备 | 第95-96页 |
6.2.1 主要试剂与材料 | 第95页 |
6.2.2 主要仪器与设备 | 第95-96页 |
6.3 实验方法 | 第96-99页 |
6.3.1 AuNFs的合成 | 第96页 |
6.3.2 红色石墨烯量子点的制备 | 第96页 |
6.3.3 纳米材料表面功能化单链DNA | 第96页 |
6.3.4 AuNF@GQDs异源二聚体的构建 | 第96-97页 |
6.3.5 AuNF@GQDs异源二聚体检测miRNA-34a增敏探针的构建 | 第97页 |
6.3.6 特异性分析 | 第97页 |
6.3.7 AuNF@GQDs异源二聚体细胞毒性及稳定性的测定 | 第97页 |
6.3.8 细胞内AuNF@GQDs异源二聚体的构建 | 第97-98页 |
6.3.9 实时定量(qRT-PCR)检测miRNAs表达量 | 第98页 |
6.3.10 AuNF@GQDs异源二聚体的体内成像及其毒性评价 | 第98-99页 |
6.4 结果与讨论 | 第99-119页 |
6.4.1 实验原理 | 第99-100页 |
6.4.2 AuNFs和GQDs修饰ssDNA前后结构表征和光谱分析 | 第100-102页 |
6.4.3 AuNF@GQDs异源二聚体结构表征及光学性能探讨 | 第102-105页 |
6.4.4 AuNF@GQDs异源二聚体的稳定性及其细胞毒性评估 | 第105-107页 |
6.4.5 基于FRET“off”到DNA循环“on”的AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针胞外测定miRNA-34a | 第107-110页 |
6.4.6 AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针用于活细胞中荧光成像 | 第110-114页 |
6.4.7 AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针用于检测活细胞中miRNA-34a的表达量 | 第114-116页 |
6.4.8 AuNF@GQDs异源二聚体增敏探针用于动物体内检测miRNA-34a的表达水平 | 第116-119页 |
6.5 本章小结 | 第119-121页 |
主要结论与展望 | 第121-123页 |
主要结论 | 第121-122页 |
展望 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-140页 |
本论文创新点 | 第140-141页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第141页 |