摘要 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 铅的毒性作用机制 | 第10-14页 |
1.1.1 铅污染现状 | 第10页 |
1.1.2 食品中的铅污染的来源 | 第10-11页 |
1.1.3 食品中铅污染的现状 | 第11页 |
1.1.4 铅污染对人体的危害 | 第11-13页 |
1.1.4.1 铅对神经系统的影响 | 第11-12页 |
1.1.4.2 铅对心血管系统的影响 | 第12页 |
1.1.4.3 铅对生殖系统的影响 | 第12页 |
1.1.4.4 铅对消化系统的影响 | 第12页 |
1.1.4.5 铅对免疫系统的影响 | 第12-13页 |
1.1.5 铅中毒机制研究 | 第13页 |
1.1.6 铅与阿兹海默病 | 第13-14页 |
1.1.6.1 脂质过氧化 | 第13-14页 |
1.1.6.2 Aβ与Tau蛋白 | 第14页 |
1.1.6.3 钙 | 第14页 |
1.2 叶酸对神经细胞的保护作用 | 第14-17页 |
1.2.1 食品中的叶酸 | 第15页 |
1.2.2 人体缺乏叶酸的危害 | 第15页 |
1.2.3 叶酸的抗氧化性 | 第15-16页 |
1.2.4 叶酸的毒性 | 第16-17页 |
1.2.4.1 叶酸过量对VB12的影响 | 第16页 |
1.2.4.2 叶酸过量对锌的影响 | 第16页 |
1.2.4.3 叶酸过量对肿瘤的影响 | 第16页 |
1.2.4.4 叶酸过量与自闭症 | 第16-17页 |
1.3 本研究的意义及目的 | 第17页 |
1.4 研究内容 | 第17-18页 |
第二章 PC12细胞铅暴露模型的建立及叶酸对其生长发育的影响 | 第18-24页 |
2.1 试剂与仪器 | 第18-19页 |
2.1.1 主要试剂 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器及耗材 | 第18页 |
2.1.3 相关溶液及其配制方法 | 第18-19页 |
2.2 构建PC12细胞铅暴露及叶酸干预模型 | 第19-20页 |
2.2.1 细胞培养方法 | 第19-20页 |
2.2.1.1 PC12细胞的原代培养 | 第19页 |
2.2.1.2 PC12细胞传代 | 第19-20页 |
2.2.2 构建PC12细胞铅暴露模型 | 第20页 |
2.3 MTT实验检测叶酸对铅暴露下PC12细胞增殖的影响 | 第20-21页 |
2.3.1 MTT原理 | 第20页 |
2.3.2 PC12细胞实验分组 | 第20页 |
2.3.3 计算细胞增殖抑制率 | 第20-21页 |
2.4 数据处理 | 第21页 |
2.5 结果与分析 | 第21-23页 |
2.6 讨论 | 第23-24页 |
第三章 叶酸对铅暴露下PC12细胞抗氧化能力的影响 | 第24-33页 |
3.1 试剂及仪器 | 第24页 |
3.1.1 主要试剂 | 第24页 |
3.1.2 主要仪器 | 第24页 |
3.2 实验方法 | 第24-29页 |
3.2.1 细胞实验分组 | 第24页 |
3.2.2 提取PC12细胞总蛋白 | 第24-26页 |
3.2.2.1 提取蛋白方法 | 第24-25页 |
3.4.2.2 PC12细胞总蛋白的测定 | 第25-26页 |
3.2.3 SOD活力测定 | 第26-27页 |
3.2.3.1 实验方法 | 第26页 |
3.2.3.2 计算 | 第26-27页 |
3.2.4 MDA含量测定 | 第27-28页 |
3.2.4.1 试剂准备 | 第27页 |
3.2.4.2 实验方法 | 第27-28页 |
3.2.4.3 计算 | 第28页 |
3.2.5 GSH-PX活力测定 | 第28-29页 |
3.2.5.1 试剂准备 | 第28页 |
3.2.5.2 实验方法 | 第28-29页 |
3.2.5.3 计算 | 第29页 |
3.3 数据处理 | 第29-30页 |
3.4 结果与分析 | 第30页 |
3.5 讨论 | 第30-33页 |
3.5.1 自由基与氧化应激 | 第30-31页 |
3.5.2 叶酸对铅暴露下PC12细胞抗氧化能力的影响 | 第31-33页 |
第四章 叶酸对铅暴露下PC12细胞内Caspase-3蛋白表达的影响 | 第33-38页 |
4.1 试剂与仪器 | 第33页 |
4.1.1 主要试剂 | 第33页 |
4.1.2 主要仪器及耗材 | 第33页 |
4.2 实验方法 | 第33-34页 |
4.2.1 细胞准备 | 第33-34页 |
4.2.2 免疫荧光步骤 | 第34页 |
4.3 数据处理 | 第34页 |
4.4 结果与分析 | 第34-35页 |
4.5 讨论 | 第35-38页 |
4.5.1 细胞坏死与细胞凋亡 | 第35-36页 |
4.5.2 叶酸与细胞凋亡 | 第36页 |
4.5.3 叶酸对铅暴露下PC12细胞内Caspase-3蛋白表达的影响 | 第36-38页 |
第五章 叶酸对铅暴露下PC12细胞培养液中Aβ40和Aβ42的影响 | 第38-43页 |
5.1 材料与方法 | 第38页 |
5.1.1 主要试剂 | 第38页 |
5.1.2 主要仪器 | 第38页 |
5.2 实验方法 | 第38-41页 |
5.2.1 检测细胞培养液Aβ1-40含量 | 第38-39页 |
5.2.1.1 细胞准备 | 第38页 |
5.2.2.2 ELISA | 第38-39页 |
5.2.2 检测细胞培养液Aβ1-42含量 | 第39页 |
5.2.3 分别绘制Aβ1-40和Aβ1-42的标准曲线 | 第39-41页 |
5.3 数据分析 | 第41页 |
5.4 结果与分析 | 第41页 |
5.5 讨论 | 第41-43页 |
第六章 结论与创新点 | 第43-45页 |
6.1 全文总结 | 第43-44页 |
6.2 创新点 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
ABSTRACT | 第52-53页 |