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大马哈鱼(Oncorhynchus keta)中硫酸软骨素的提纯工艺与抗氧化活性研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第10-27页
    1.1 硫酸软骨素的介绍第10-12页
        1.1.1 硫酸软骨素的含量分布第10页
        1.1.2 硫酸软骨素的存在状态第10-11页
        1.1.3 硫酸软骨素的结构组成第11-12页
    1.2 硫酸软骨素的提取第12-14页
        1.2.1 稀碱浓盐法第12页
        1.2.2 稀碱稀盐法第12-13页
        1.2.3 稀碱酶解法第13页
        1.2.4 复合酶解法第13页
        1.2.5 超声辅助法第13页
        1.2.6 乙酸抽提法第13-14页
    1.3 硫酸软骨素的纯化第14-15页
        1.3.1 溶剂沉淀法第14页
        1.3.2 季铵盐法第14页
        1.3.3 超滤膜法第14页
        1.3.4 离子交换法第14-15页
        1.3.5 超滤-离子层析法第15页
    1.4 含量测定第15-20页
        1.4.1 Elson-Morgan比色法第15-16页
        1.4.2 硫酸咔唑法第16页
        1.4.3 间苯三酚法第16-17页
        1.4.4 CPC浊度法第17-18页
        1.4.5 天青A分光光度法第18页
        1.4.6 液相色谱法第18-19页
        1.4.7 高效毛细管电泳法第19-20页
    1.5 结构分析第20-21页
        1.5.1 光谱扫描第20页
        1.5.2 分子量测定第20页
        1.5.3 二糖分析第20-21页
        1.5.4 硫酸基含量第21页
        1.5.5 氨基酸分析第21页
    1.6 衍生物制备第21-23页
        1.6.1 低分子CS的制备第21-22页
        1.6.2 多硫酸化CS的制备第22页
        1.6.3 CS的脱硫酸化和甲基化第22-23页
    1.7 功能研究第23-25页
        1.7.1 调节脂蛋白和抗动脉粥样硬化作用第23页
        1.7.2 抗凝血和血栓作用第23页
        1.7.3 抗关节炎作用第23页
        1.7.4 抗氧化清除自由基的作用第23-24页
        1.7.5 促进骨细胞增生和成骨作用第24页
        1.7.6 增强免疫力和抗肿瘤作用第24页
        1.7.7 调节细胞粘附作用第24页
        1.7.8 在组织工程中的应用第24-25页
    1.8 本课题的研究内容及意义第25-27页
        1.8.1 研究内容第25页
        1.8.2 研究意义第25-26页
        1.8.3 技术路线图第26-27页
第二章 大马哈鱼鼻软骨中硫酸软骨素提取工艺研究第27-35页
    引言第27页
    2.1 材料与仪器第27-28页
        2.1.1 实验材料第27页
        2.1.2 主要仪器第27页
        2.1.3 主要试剂第27-28页
    2.2 实验方法第28-29页
        2.2.1 原料预处理第28页
        2.2.2 CS含量测定第28页
        2.2.3 碱提方法第28页
            2.2.3.1 单因素试验第28页
            2.2.3.2 响应面优化提取工艺第28页
        2.2.4 碱提—酶提两步提取法第28-29页
    2.3 结果与讨论第29-34页
        2.3.1 单因素结果第29-30页
        2.3.2 响应面优化碱提工艺第30-33页
            2.3.2.1 响应面试验结果第30页
            2.3.2.2 回归模型的建立与方差分析第30-31页
            2.3.2.3 因素交互作用分析第31-33页
            2.3.2.4 实验验证第33页
        2.3.3 碱提—酶解提取CS的酶解优化第33-34页
            2.3.3.1 酶的筛选结果第33页
            2.3.3.2 酶解时间的优化第33-34页
    2.4 本章小结第34-35页
第三章CS的分离纯化与结构初步解析第35-46页
    引言第35页
    3.1 材料与仪器第35-36页
        3.1.1 实验材料第35页
        3.1.2 实验仪器第35页
        3.1.3 实验试剂第35-36页
    3.2 实验方法第36-37页
        3.2.1 醇沉工艺参数确定第36页
        3.2.2 产品中CS和蛋白含量分析第36页
        3.2.3 紫外光谱分析第36页
        3.2.4 红外光谱分析第36-37页
        3.2.5 DEAE Sepharose F.F离子交换层析第37页
        3.2.6 分离组分的单糖组成分析第37页
    3.3 结果与讨论第37-44页
        3.3.1 醇沉工艺参数的确定第37-39页
            3.3.1.1 乙醇浓度对CS纯化效果的影响第37-38页
            3.3.1.2 乙酸钠质量浓度对CS纯化效果的影响第38页
            3.3.1.3 提取液pH对CS纯化效果的影响第38-39页
        3.3.2 CS和蛋白含量分析结果第39页
        3.3.3 紫外光谱分析结果第39-40页
        3.3.4 红外光谱分析结果第40-41页
        3.3.5 CS的柱层析分离第41-43页
        3.3.6 分离组分的单糖分析结果第43-44页
    3.4 本章结论第44-46页
第四章CS及其降解产物抗氧化活性研究第46-52页
    引言第46页
    4.1 材料与仪器第46-47页
        4.1.1 实验材料第46页
        4.1.2 主要仪器第46页
        4.1.3 主要试剂第46-47页
    4.2 实验方法第47-48页
        4.2.1 DPPH清除率测定第47页
        4.2.2 羟自由基清除率测定第47页
        4.2.3 超氧阴离子清除率测定第47页
        4.2.4 半抑制浓度(IC50)的测定第47-48页
        4.2.5 硫酸软骨素的酸降解第48页
    4.3 结果与讨论第48-51页
        4.3.1 对DPPH·清除作用的比较第48-49页
        4.3.2 对·OH清除作用的比较第49页
        4.3.3 对O2~-·清除作用的比较第49-50页
        4.3.4 自由基清除能力的比较第50-51页
    4.4 本章结论第51-52页
结论第52-53页
参考文献第53-60页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第60-63页
致谢第63页

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