摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第10-27页 |
1.1 硫酸软骨素的介绍 | 第10-12页 |
1.1.1 硫酸软骨素的含量分布 | 第10页 |
1.1.2 硫酸软骨素的存在状态 | 第10-11页 |
1.1.3 硫酸软骨素的结构组成 | 第11-12页 |
1.2 硫酸软骨素的提取 | 第12-14页 |
1.2.1 稀碱浓盐法 | 第12页 |
1.2.2 稀碱稀盐法 | 第12-13页 |
1.2.3 稀碱酶解法 | 第13页 |
1.2.4 复合酶解法 | 第13页 |
1.2.5 超声辅助法 | 第13页 |
1.2.6 乙酸抽提法 | 第13-14页 |
1.3 硫酸软骨素的纯化 | 第14-15页 |
1.3.1 溶剂沉淀法 | 第14页 |
1.3.2 季铵盐法 | 第14页 |
1.3.3 超滤膜法 | 第14页 |
1.3.4 离子交换法 | 第14-15页 |
1.3.5 超滤-离子层析法 | 第15页 |
1.4 含量测定 | 第15-20页 |
1.4.1 Elson-Morgan比色法 | 第15-16页 |
1.4.2 硫酸咔唑法 | 第16页 |
1.4.3 间苯三酚法 | 第16-17页 |
1.4.4 CPC浊度法 | 第17-18页 |
1.4.5 天青A分光光度法 | 第18页 |
1.4.6 液相色谱法 | 第18-19页 |
1.4.7 高效毛细管电泳法 | 第19-20页 |
1.5 结构分析 | 第20-21页 |
1.5.1 光谱扫描 | 第20页 |
1.5.2 分子量测定 | 第20页 |
1.5.3 二糖分析 | 第20-21页 |
1.5.4 硫酸基含量 | 第21页 |
1.5.5 氨基酸分析 | 第21页 |
1.6 衍生物制备 | 第21-23页 |
1.6.1 低分子CS的制备 | 第21-22页 |
1.6.2 多硫酸化CS的制备 | 第22页 |
1.6.3 CS的脱硫酸化和甲基化 | 第22-23页 |
1.7 功能研究 | 第23-25页 |
1.7.1 调节脂蛋白和抗动脉粥样硬化作用 | 第23页 |
1.7.2 抗凝血和血栓作用 | 第23页 |
1.7.3 抗关节炎作用 | 第23页 |
1.7.4 抗氧化清除自由基的作用 | 第23-24页 |
1.7.5 促进骨细胞增生和成骨作用 | 第24页 |
1.7.6 增强免疫力和抗肿瘤作用 | 第24页 |
1.7.7 调节细胞粘附作用 | 第24页 |
1.7.8 在组织工程中的应用 | 第24-25页 |
1.8 本课题的研究内容及意义 | 第25-27页 |
1.8.1 研究内容 | 第25页 |
1.8.2 研究意义 | 第25-26页 |
1.8.3 技术路线图 | 第26-27页 |
第二章 大马哈鱼鼻软骨中硫酸软骨素提取工艺研究 | 第27-35页 |
引言 | 第27页 |
2.1 材料与仪器 | 第27-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第27页 |
2.1.2 主要仪器 | 第27页 |
2.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-29页 |
2.2.1 原料预处理 | 第28页 |
2.2.2 CS含量测定 | 第28页 |
2.2.3 碱提方法 | 第28页 |
2.2.3.1 单因素试验 | 第28页 |
2.2.3.2 响应面优化提取工艺 | 第28页 |
2.2.4 碱提—酶提两步提取法 | 第28-29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-34页 |
2.3.1 单因素结果 | 第29-30页 |
2.3.2 响应面优化碱提工艺 | 第30-33页 |
2.3.2.1 响应面试验结果 | 第30页 |
2.3.2.2 回归模型的建立与方差分析 | 第30-31页 |
2.3.2.3 因素交互作用分析 | 第31-33页 |
2.3.2.4 实验验证 | 第33页 |
2.3.3 碱提—酶解提取CS的酶解优化 | 第33-34页 |
2.3.3.1 酶的筛选结果 | 第33页 |
2.3.3.2 酶解时间的优化 | 第33-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-35页 |
第三章CS的分离纯化与结构初步解析 | 第35-46页 |
引言 | 第35页 |
3.1 材料与仪器 | 第35-36页 |
3.1.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.2 实验仪器 | 第35页 |
3.1.3 实验试剂 | 第35-36页 |
3.2 实验方法 | 第36-37页 |
3.2.1 醇沉工艺参数确定 | 第36页 |
3.2.2 产品中CS和蛋白含量分析 | 第36页 |
3.2.3 紫外光谱分析 | 第36页 |
3.2.4 红外光谱分析 | 第36-37页 |
3.2.5 DEAE Sepharose F.F离子交换层析 | 第37页 |
3.2.6 分离组分的单糖组成分析 | 第37页 |
3.3 结果与讨论 | 第37-44页 |
3.3.1 醇沉工艺参数的确定 | 第37-39页 |
3.3.1.1 乙醇浓度对CS纯化效果的影响 | 第37-38页 |
3.3.1.2 乙酸钠质量浓度对CS纯化效果的影响 | 第38页 |
3.3.1.3 提取液pH对CS纯化效果的影响 | 第38-39页 |
3.3.2 CS和蛋白含量分析结果 | 第39页 |
3.3.3 紫外光谱分析结果 | 第39-40页 |
3.3.4 红外光谱分析结果 | 第40-41页 |
3.3.5 CS的柱层析分离 | 第41-43页 |
3.3.6 分离组分的单糖分析结果 | 第43-44页 |
3.4 本章结论 | 第44-46页 |
第四章CS及其降解产物抗氧化活性研究 | 第46-52页 |
引言 | 第46页 |
4.1 材料与仪器 | 第46-47页 |
4.1.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.2 主要仪器 | 第46页 |
4.1.3 主要试剂 | 第46-47页 |
4.2 实验方法 | 第47-48页 |
4.2.1 DPPH清除率测定 | 第47页 |
4.2.2 羟自由基清除率测定 | 第47页 |
4.2.3 超氧阴离子清除率测定 | 第47页 |
4.2.4 半抑制浓度(IC50)的测定 | 第47-48页 |
4.2.5 硫酸软骨素的酸降解 | 第48页 |
4.3 结果与讨论 | 第48-51页 |
4.3.1 对DPPH·清除作用的比较 | 第48-49页 |
4.3.2 对·OH清除作用的比较 | 第49页 |
4.3.3 对O2~-·清除作用的比较 | 第49-50页 |
4.3.4 自由基清除能力的比较 | 第50-51页 |
4.4 本章结论 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |