中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1前言 | 第15-31页 |
1.1 立题背景 | 第15页 |
1.2 婴幼儿肠道微生物的定植 | 第15-16页 |
1.3 婴幼儿肠道微生物定植的影响因素 | 第16-19页 |
1.3.1 母体的影响 | 第16-17页 |
1.3.2 分娩方式 | 第17页 |
1.3.3 喂养方式 | 第17页 |
1.3.4 生活环境 | 第17-18页 |
1.3.5 胎龄 | 第18页 |
1.3.6 益生菌 | 第18页 |
1.3.7 益生元 | 第18-19页 |
1.3.8 抗生素 | 第19页 |
1.4 婴幼儿肠道微生物的代谢产物 | 第19-22页 |
1.4.1 短链有机酸 | 第19-20页 |
1.4.2 酚类物质 | 第20页 |
1.4.3 胆碱 | 第20-21页 |
1.4.4 胆酸类物质 | 第21页 |
1.4.5 维生素 | 第21页 |
1.4.6 其它 | 第21-22页 |
1.5 婴幼儿肠道微生物的生理功能 | 第22-23页 |
1.5.1 大然屏障功能 | 第22页 |
1.5.2 营养功能 | 第22页 |
1.5.3 免疫功能 | 第22-23页 |
1.5.4 促进生长发育 | 第23页 |
1.6 婴幼儿肠道微生物与疾病 | 第23-25页 |
1.6.1 肥胖和Ⅱ型糖尿病 | 第23-24页 |
1.6.2 炎性肠病(IBD) | 第24页 |
1.6.3 结肠癌 | 第24-25页 |
1.6.4 神经行为类疾病 | 第25页 |
1.7 研究婴幼儿肠道微生物的方法 | 第25-28页 |
1.7.1 传统培养方法 | 第25页 |
1.7.2 基于聚合酶链式反应的变性梯度凝胶电泳 | 第25-26页 |
1.7.3 荧光原位杂交技术 | 第26页 |
1.7.4 实时荧光定量PCR技术 | 第26页 |
1.7.5 基因芯片技术 | 第26-27页 |
1.7.6 第二代测序技术 | 第27-28页 |
1.7.7 第三代测序技术 | 第28页 |
1.8 婴幼儿奶粉的类型 | 第28-30页 |
1.8.1 足月儿婴幼儿配方奶粉 | 第28页 |
1.8.2 早产儿和浓缩婴幼儿配方奶粉 | 第28-29页 |
1.8.3 专门的婴幼儿配方奶粉 | 第29-30页 |
1.9 本研究的目的和意义 | 第30页 |
1.10 主要研究内容 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-41页 |
2.1 试验仪器和试剂 | 第31-32页 |
2.1.1 试验仪器 | 第31页 |
2.1.2 主要试剂与原料 | 第31-32页 |
2.2 婴幼儿肠道微生物的研究 | 第32-34页 |
2.2.1 婴幼儿粪便的采取 | 第32-33页 |
2.2.2 婴幼儿粪便微生物基因组DNA的提取和鉴定 | 第33页 |
2.2.3 婴幼儿肠道微生物16SrRNA基因的PCR扩增 | 第33页 |
2.2.4 PCR产物的测序 | 第33-34页 |
2.2.5 微生物生物信息学分析 | 第34页 |
2.3 SD乳鼠大肠微生态的研究 | 第34-39页 |
2.3.1 SD乳鼠肠道内容物状态的测定 | 第34-35页 |
2.3.2 SD乳鼠大肠内容物短链有机酸的测定 | 第35页 |
2.3.3 SD乳鼠大肠氨的测定 | 第35页 |
2.3.4 SD乳鼠大肠内容物蛋白酶活性的测定 | 第35页 |
2.3.5 基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
2.3.6 基因组DNA的PCR扩增 | 第36页 |
2.3.7 PCR产物的DGGE分析 | 第36-37页 |
2.3.8 PCR扩增产物的测序 | 第37页 |
2.3.9 微生物生物信息学分析 | 第37-38页 |
2.3.10 实时荧光定量PCR测定相关基因表达 | 第38-39页 |
2.4 微生物代谢产物的分析 | 第39-40页 |
2.5 统计分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-67页 |
3.1 不同喂养方式对婴幼儿肠道微生物菌群的影响 | 第41-46页 |
3.1.1 母乳和奶粉喂养婴幼儿肠道菌群的多样性 | 第41页 |
3.1.2 母乳和奶粉喂养婴幼儿肠道中微生物在门水平上的差异 | 第41-43页 |
3.1.3 母乳和奶粉喂养婴幼儿肠道中微生物在科水平上的差异 | 第43-44页 |
3.1.4 母乳和奶粉喂养婴幼儿肠道中微生物在属水平上的差异 | 第44-46页 |
3.2 婴幼儿配方奶粉(低蛋白+较高碳水化合物)对SD乳鼠肠道微生态的影响 | 第46-63页 |
3.2.1 婴幼儿奶粉(低蛋白+较高碳水化合物)成分组成 | 第46页 |
3.2.2 三种不同饮食对SD乳鼠生长状态的影响 | 第46-47页 |
3.2.3 三种不同饮食对SD乳鼠大肠短链有机酸的影响 | 第47页 |
3.2.4 三种不同饮食对SD乳鼠大肠氨的影响 | 第47-48页 |
3.2.5 三种不同饮食对SD乳鼠大肠蛋白酶活性的影响 | 第48页 |
3.2.6 SD乳鼠大肠微生物基因DNA抽提结果 | 第48-49页 |
3.2.7 SD乳鼠大肠微生物16S rRNA V1-V3区扩增结果 | 第49页 |
3.2.8 SD乳鼠大肠微生物PCR-DGGE分析 | 第49-51页 |
3.2.9 SD乳鼠大肠微生物的丰度和多样性 | 第51-52页 |
3.2.10 样品的稀释曲线、物种积累曲线和Shannon-Wiener曲线分析 | 第52-55页 |
3.2.11 样品的细菌分类分析 | 第55-57页 |
3.2.12 样品的的细菌相似度分析 | 第57-58页 |
3.2.13 样品的PCA和NMDS分析 | 第58-59页 |
3.2.14 样品的热图分析 | 第59-60页 |
3.2.15 样品的OTU分布VENN图分析 | 第60-61页 |
3.2.16 肠道微生物与饮食的关系分析 | 第61-62页 |
3.2.17 不同饮食方式对SD乳鼠大肠相关基因表达的影响 | 第62-63页 |
3.3 断奶前婴幼儿和SD乳鼠肠道微生态的比较 | 第63-67页 |
3.3.1 婴幼儿粪便和SD乳鼠肠道微生物的比较分析 | 第63-66页 |
3.3.2 婴幼儿粪便和SD乳鼠肠道微生物代谢产物的比较分析 | 第66-67页 |
4 讨论 | 第67-72页 |
4.1 母乳和配方奶粉喂养婴幼儿肠道菌群的差异 | 第67-69页 |
4.2 婴幼儿配方奶粉对婴幼儿肠道微生物组成的影响 | 第69-71页 |
4.3 不同受体肠道微生物的差异 | 第71-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-91页 |
附录 | 第91-92页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第92页 |