| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 纤维堆囊菌概要 | 第15-16页 |
| 1.1.1 纤维堆囊菌简介 | 第15页 |
| 1.1.2 纤维堆囊菌生物活性产物 | 第15页 |
| 1.1.3 纤维堆囊菌的研究与应用 | 第15-16页 |
| 1.2 埃博霉素概要 | 第16-18页 |
| 1.2.1 埃博霉素的发现与命名 | 第16页 |
| 1.2.2 埃博霉素的结构和抗肿瘤机制 | 第16-17页 |
| 1.2.3 埃博霉素的研究与应用 | 第17-18页 |
| 1.3 埃博霉素的生物合成与关键酶 | 第18-20页 |
| 1.3.1 埃博霉素的生物合成及其前体来源 | 第18-19页 |
| 1.3.2 埃博霉素生物合成的关键酶 | 第19页 |
| 1.3.3 丙酮酸激酶与效应剂 | 第19-20页 |
| 1.3.4 S-腺苷甲硫氨酸合成酶与效应剂 | 第20页 |
| 1.3.5 α-酮戊二酸脱氢酶复合体与效应剂 | 第20页 |
| 1.4 本课题的选题依据与研究意义 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题的总体思路与研究内容 | 第21-23页 |
| 第2章 效应剂对关键酶活力和埃博霉素产量的影响 | 第23-39页 |
| 2.1 引言 | 第23-24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第24-25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第25页 |
| 2.2.4 培养基 | 第25页 |
| 2.2.5 效应剂 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 菌株扩种与发酵 | 第26页 |
| 2.3.2 粗酶液的获得 | 第26-27页 |
| 2.3.3 酶活测定体系的配制 | 第27-28页 |
| 2.3.4 SAM和埃博霉素的标准曲线的制作 | 第28-29页 |
| 2.3.5 蛋白质标准曲线的制作与蛋白含量测定 | 第29页 |
| 2.3.6 酶活测定 | 第29-30页 |
| 2.3.7 埃博霉素产量的测定 | 第30页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第30-38页 |
| 2.4.1 蛋白质标准曲线 | 第30-33页 |
| 2.4.2 埃博霉素标准曲线 | 第33页 |
| 2.4.3 效应剂对丙酮酸激酶活力的影响 | 第33-34页 |
| 2.4.4 效应剂对OGDHC活力的影响 | 第34-35页 |
| 2.4.5 效应剂对SAMs活力的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.6 效应剂对埃博霉素产量的影响 | 第36-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 效应剂对培养基pH、还原糖含量和菌体生长的影响 | 第39-51页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第39页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第39页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第39页 |
| 3.2.4 培养基 | 第39页 |
| 3.2.5 效应剂 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-41页 |
| 3.3.1 菌株扩种与发酵 | 第40页 |
| 3.3.2 pH测定 | 第40页 |
| 3.3.3 还原糖测定 | 第40页 |
| 3.3.4 菌体干重测定 | 第40-41页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第41-49页 |
| 3.4.1 效应剂对pH的影响 | 第41-43页 |
| 3.4.2 效应剂对还原糖的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.3 效应剂对菌体干重的影响 | 第44-46页 |
| 3.4.4 单位质量菌体对应埃博霉素产量的变化 | 第46-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-51页 |
| 第4章 效应剂对关键酶基因转录水平的影响 | 第51-67页 |
| 4.1 引言 | 第51-52页 |
| 4.2 实验材料 | 第52页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第52页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第52页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第52页 |
| 4.2.4 培养基 | 第52页 |
| 4.2.5 效应剂 | 第52页 |
| 4.2.6 试剂盒和专用材料 | 第52页 |
| 4.3 实验方法 | 第52-57页 |
| 4.3.1 菌株扩种与发酵 | 第52-53页 |
| 4.3.2 纤维堆囊菌DNA的提取 | 第53-54页 |
| 4.3.3 目的基因与引物设计 | 第54页 |
| 4.3.4 纤维堆囊菌总RNA的提取与质检 | 第54-56页 |
| 4.3.5 cDNA的合成与质检 | 第56页 |
| 4.3.6 Q-PCR分析目的基因 | 第56-57页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第57-64页 |
| 4.4.1 纤维堆囊菌的DNA | 第57页 |
| 4.4.2 纤维堆囊菌总RNA | 第57-59页 |
| 4.4.3 相对定量方法优缺点分析 | 第59-60页 |
| 4.4.4 目的基因相对表达水平分析 | 第60-64页 |
| 4.5 本章小结 | 第64-67页 |
| 第5章 对甲苯磺酸钠添加量优化与埃博霉素产量验证 | 第67-75页 |
| 5.1 引言 | 第67页 |
| 5.2 实验材料 | 第67-68页 |
| 5.2.1 实验菌株 | 第67页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第67页 |
| 5.2.3 实验试剂 | 第67页 |
| 5.2.4 培养基 | 第67-68页 |
| 5.2.5 效应剂 | 第68页 |
| 5.3 实验方法 | 第68-69页 |
| 5.3.1 菌株扩种与发酵 | 第68页 |
| 5.3.2 对甲苯磺酸钠溶液的配制 | 第68页 |
| 5.3.3 对甲苯磺酸钠最佳添加浓度和时间 | 第68页 |
| 5.3.4 发酵液中pH、还原糖浓度和菌体生长的测定 | 第68-69页 |
| 5.3.5 提取粗酶液和酶活测定 | 第69页 |
| 5.3.6 SAM测定与SAMs活力测定 | 第69页 |
| 5.3.7 埃博霉素产量的测定 | 第69页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第69-74页 |
| 5.4.1 不同浓度的对甲苯磺酸钠对埃博霉素产量的提高效果 | 第69-70页 |
| 5.4.2 对甲苯磺酸钠最佳添加浓度 | 第70-71页 |
| 5.4.3 对甲苯磺酸钠最佳添加时间 | 第71页 |
| 5.4.4 发酵液中pH、还原糖浓度和菌体生长的测定 | 第71-72页 |
| 5.4.5 SAMs活力测定 | 第72-73页 |
| 5.4.6 SAMs活力与埃博霉素生物合成的关系 | 第73-74页 |
| 5.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 全文总结与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第85页 |
