| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| ·金黄色葡萄球菌及表面蛋白 | 第8-10页 |
| ·金黄色葡萄球菌的生物学特性 | 第8页 |
| ·金黄色葡萄球菌的流行病学 | 第8-9页 |
| ·金黄色葡萄球菌的致病机理 | 第9页 |
| ·金黄色葡萄球菌的表面蛋白 | 第9-10页 |
| ·金黄色葡萄球菌的检测方法 | 第10-14页 |
| ·纸片法 | 第10-11页 |
| ·免疫学方法 | 第11-13页 |
| ·分子生物学方法 | 第13-14页 |
| ·生物传感器检测法 | 第14页 |
| ·论文研究的目的与意义 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-39页 |
| ·实验材料 | 第16-21页 |
| ·实验菌株与载体 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16-18页 |
| ·实验仪器 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·溶液配制 | 第19-21页 |
| ·实验方法 | 第21-39页 |
| ·表面蛋白SdrD的基因克隆与重组表达 | 第21-29页 |
| ·表面蛋白IsdA的基因克隆与重组表达 | 第29-34页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第34-36页 |
| ·双抗夹心酶联免疫吸附试验检测方法的建立 | 第36-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-65页 |
| ·S.aureus SdrD蛋白的基因克隆与重组表达 | 第39-46页 |
| ·sdrD基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·重组质粒pET26b-sdrD的构建 | 第40-42页 |
| ·重组蛋白SdrD的表达 | 第42-43页 |
| ·SdrD蛋白的可溶性表达 | 第43-44页 |
| ·SdrD蛋白表达IPTG诱导浓度的优化 | 第44-45页 |
| ·SdrD蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·S.aureus IsdA蛋白的基因克隆与重组表达 | 第46-54页 |
| ·isdA基因的克隆 | 第46-47页 |
| ·isdA基因的TA克隆 | 第47-48页 |
| ·重组质粒PMD18-T-isdA的鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pET26b-isdA的构建 | 第49-51页 |
| ·重组蛋白IsdA的表达 | 第51-52页 |
| ·IsdA蛋白表达IPTG诱导浓度的优化 | 第52页 |
| ·IsdA蛋白的可溶性表达 | 第52-53页 |
| ·IsdA蛋白的纯化 | 第53-54页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第54页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第54-57页 |
| ·表面蛋白的选择 | 第54页 |
| ·实验动物的选择 | 第54-55页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第55页 |
| ·抗血清的纯化 | 第55-56页 |
| ·抗体浓度的确定 | 第56-57页 |
| ·间接ELISA法测纯化后抗体的效价 | 第57页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法的初步建立 | 第57-65页 |
| ·捕获抗体与检测抗体的选择 | 第57-58页 |
| ·捕获抗体包被量的优化 | 第58-59页 |
| ·封闭液种类的优化 | 第59页 |
| ·封闭液浓度的优化 | 第59-60页 |
| ·检测抗体稀释倍数的优化 | 第60-61页 |
| ·酶标二抗稀释倍数的优化 | 第61页 |
| ·双抗夹心酶联免疫吸附试验检测法标准曲线的绘制 | 第61-63页 |
| ·双抗夹心ELISA检测金黄色葡萄球菌的检测限和定量限 | 第63页 |
| ·双抗夹心ELISA检测金黄色葡萄球菌方法的重复性 | 第63-64页 |
| ·双抗夹心ELISA检测金黄色葡萄球菌方法的初步建立 | 第64-65页 |
| 4 结论 | 第65-66页 |
| 5 展望 | 第66-67页 |
| 6 参考文献 | 第67-74页 |
| 7 致谢 | 第74页 |
